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신경과학
0 조회수 • 2:26 분 • July 8th, 2025
세포외 기질에서 배양된 인간 유도 뉴런 또는 iN을 예로 들어 보겠습니다.
배지를 제거하고 매트릭스를 파괴하여 세포를 해리시키는 소화 효소를 추가합니다.
iN을 튜브로 옮깁니다. 현탁액을 원심분리하고 효소를 함유한 상청액을 버립니다.
iN을 공동 배양 배지에 재현탁하고, 유도된 희소돌기아교세포 전구체 세포 또는 iOPC의 배양물로 옮긴다.
iOPC는 뉴런의 축삭 주위에 수초를 형성하는 희소돌기아교세포의 전구체입니다.
배양 시 iOPC는 iN과 시냅스 연결을 형성합니다. 배지의 iOPC와 성장 인자에 의해 방출되는 영양 인자는 뉴런으로의 iN 성숙을 촉진하여 다른 뉴런과 시냅스 연결을 형성하는 증가된 세포 과정을 나타냅니다.
배지에서 성숙한 뉴런과 성장 인자의 전기적 활동은 iOPC를 희소돌기아교세포로 성숙
시키도록 유도합니다.희소돌기아교세포는 세포 과정을 확장하여 신경 축삭 주위에 수초를 형성합니다.
확립된 공동 배양은 분석 준비가 되었습니다.
14일째에 OPC 분화 배지의 24웰 플레이트에 웰당 1 x 105 세포의 밀도로 iOPC를 도금합니다. 다음날, 유도된 인간 뉴런을 세포 분리 용액으로 분리합니다. 배양된 OPC에 뉴런을 추가하고 웰당 2 x 105 세포의 안정 밀도로 도금합니다. 신경기저 A-배지, 2% B-27 보충제 및 밀리리터당 100나노그램 T3 트리요오드티로닌을 함유한 공동 배양 배지를 사용하십시오. 다음날에 매체를 교체한 다음 격일로 매체를 교체하십시오. OPC가 너무 빨리 증식하여 3일 이내에 합류에 도달하는 경우 2-5마이크로몰 Ara-C를 추가합니다.