0 조회수 • 3:37 분 • July 8th, 2025
신경 줄기 세포 배양의 오염을 최소화하려면 층류 후드, 완충 챔버, 공정 챔버 및 현미경 챔버가 있는 시설을 사용하며 각각 밀폐 도어로 분리되어 있습니다.
이제 습도를 유지하기 위해 인큐베이터의 배양 플레이트에 물을 채웁니다.
버퍼 챔버, 공정 챔버 및 인큐베이터 매개변수를 최적의 수준으로 조정하십시오.
미생물 오염 물질을 제거하기 위해 소독제와 멸균 거즈로 모든 표면을 청소하십시오.
신경 줄기 세포 배양 플레이트를 여과된 공기를 제공하는 층류 후드에 먼저 놓습니다.
에탄올에 적신 거즈로 플레이트 외부를 닦은 다음 최적의 가스 수준으로 여과된 공기를 제공하는 완충 챔버로 옮깁니다.
마지막으로 공정 챔버를 통해 플레이트를 인큐베이터로 옮기고 문을 닫습니다.
배양 후 배양 플레이트를 신선한 배지와 함께 공정 챔버로 다시 이동합니다.
신선한 배지를 평형화하십시오.
배양 플레이트에서 배지를 새로 고치고 플레이트를 다시 배양합니다.
각 인큐베이터 바닥에 있는 물팬에 페트리 접시 3개를 놓습니다. 이 접시에 멸균수를 채우고 인큐베이터의 상대 습도 설정점을 유지하는 데 중요하므로 접시의 수위를 유지합니다.
그래픽 인터페이스 내에서 인큐베이터를 클릭합니다. 그런 다음 설정점 아래의 상대 습도에 대한 기존 값을 클릭하고 85%를 입력합니다. 그런 다음 녹색 확인 표시를 클릭하여 이 값을 수락합니다.
다음으로, 버퍼 챔버, 공정 챔버 및 인큐베이터를 도입되는 셀 유형에 필요한 가스 설정점으로 조정합니다. 멸균 거즈와 염화벤잘코늄 기반 제품과 같은 불연성 소독제로 공정 챔버 표면을 청소하십시오.
그런 다음 장갑과 문 손잡이와 같이 자주 만지는 표면을 청소하십시오. 그런 다음 층류 후드와 완충 챔버의 표면을 70% 에탄올로 청소하고 건조시킵니다.
그런 다음 플라스크 또는 세포 플레이트를 후드에 넣고 에탄올로 적신 멸균 거즈 스폰지로 외부 표면을 잠깐 닦습니다. 그런 다음 플라스크 또는 플레이트를 완충 챔버에 넣고 희석 계수를 실행합니다. 완료되면 즉시 플라스크 또는 플레이트를 적절한 인큐베이터로 옮깁니다.
인큐베이터는 공정 챔버 뒤쪽에 있으므로 세포 배치를 위해 선반을 공정 챔버로 당겨 빼내고 인큐베이터 도어를 불필요하게 또는 장시간 열지 마십시오.
이 단계에서는 세포 배양 배지를 준비합니다. 배지 용기의 뚜껑을 약간 없이 20분 동안 방치하여 배지가 시스템 내에 존재하는 이산화탄소 및 산소 수준과 평형을 이룰 수 있도록 합니다.
그런 다음 우물에서 오래된 배지를 제거하십시오. 만능줄기세포의 경우, 수유 과정에서 건조를 방지하기 위해 소량의 오래된 배지가 남아 있는 상태에서 거의 모든 오래된 배지를 제거합니다. 신경줄기세포의 경우 기존 배지의 절반을 제거합니다. 그런 다음 세포 배양 플레이트에 신선한 배지를 추가하고 플레이트를 지정된 인큐베이터에 다시 넣습니다.