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신경과학
0 조회수 • 3:47 분 • July 8th, 2025
쥐 강아지의 뇌를 등쪽이 위를 향하도록 슬라이드 위에 놓습니다.
뇌의 앞쪽을 다듬고 생성된 평평한 표면에 재배치합니다.
슬라이드에 뇌의 등쪽 표면과 정중선을 정렬합니다. 연결된 청각 중뇌와 전뇌 구조를 정렬하기 위해 비스듬히 절단합니다. 이러한 구조는 하구 또는 IC, 내측 슬상 체 또는 MGB, 시상 망상 핵 또는 TRN 및 청각 피질 또는 AC입니다.
한천 블록으로 진동 절개 표본 스테이지에 각진 절단된 뇌 표면을 부착하여 후뇌가 더 얇은 블록에 지탱되도록 합니다.
스테이지를 비브라톰으로 옮기고 조직 손상을 방지하기 위해 완충액을 추가합니다.
슬라이싱을 시작하여 IC, MGB, TRN 및 AC를 찾습니다.
colliculo-thalamocortical slice라고 하는 연결된 영역을 포함하는 슬라이스를 회수하고 슬라이스를 홀딩 챔버로 옮겨 조직 생존력을 보존합니다.
슬라이싱을 위한 절단 단계를 준비하기 위해 뇌의 백스톱으로 사용할 약 1입방센티미터의 3% 한천 작은 조각과 하구를 지지하는 범프로 사용하기 위해 1.5센티미터 x 1.5밀리미터 x 3밀리미터의 또 다른 조각을 자릅니다.
그런 다음 백스톱을 시아노아크릴레이트 접착제로 스테이지에 붙인 다음 백스톱 오른쪽에 있는 범프를 80도 각도를 형성하도록 붙입니다. 왼쪽 상단에서 오른쪽 하단까지 90도의 두 선과 17도 대각선으로 표시된 슬라이드에서 두 선의 교차점에 뇌의 등쪽이 위로 향하도록 놓습니다.
면도날을 사용하여 뇌의 끝에서 2-4mm를 제거하여 평평한 표면을 만듭니다. 다음으로, 새로 생성된 평평한 표면에 뇌 꼬리 쪽을 위로 올려 놓습니다. 뇌의 등쪽 표면을 수평선으로 정렬하고 뇌의 정중선을 슬라이드에 표시된 수직선으로 정렬합니다. 그런 다음 면도날을 17도 선으로 정렬합니다. 면도기를 30도 각도로 기울이고 이중 대각선으로 오른쪽 피질의 약 3mm를 제거합니다.
비브라톰 스테이지에 뇌를 장착하려면 긴 치수가 정중선에 수직이 되도록 뇌의 복부 쪽에 작은 여과지를 놓습니다. 백스톱 앞쪽과 범프 왼쪽 부위에 소량의 시아노아크릴레이트 접착제를 조심스럽게 도포합니다. 그런 다음 이중으로 대각선으로 절단된 뇌 쪽을 접착제 위에 놓아 뇌의 꼬리 부분과 후뇌가 범프 위에 지탱되고 뇌의 오른쪽이 백스톱에 닿도록 합니다.
이 절차에서 절단 단계를 비브라톰에 빠르게 배치합니다. 절단 용액으로 스테이지를 채웁니다. 다음으로 칼날을 뇌 상단에 맞춥니다. 뇌 상단에서 1
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