Schwann 세포 표현형 연구를 위한 마이크로패턴 기질의 준비

0 조회수3:38 • July 8th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

원하는 형상의 마이크로 패턴이 있는 실리콘 웨이퍼를 사용하여 정의된 모양으로 세포를 성장시킵니다.

그 위에 폴리머 혼합물을 붓고 응고시키십시오.

폴리머의 정사각형 스탬프를 자릅니다.

스탬프의 패턴 표면에 단백질 층을 코팅하여 세포 부착을 용이하게 합니다.

공기 흐름을 사용하여 무제한 단백질을 제거합니다.

폴리머 코팅된 커버슬립을 가져 가십시오.

그 위에 스탬프의 패턴이 있는 면을 놓습니다.

탬프를 눌러 패턴을 옮깁니다. 스탬프를 제거합니다.

커버슬립을 계면활성제가 들어 있는 웰에 옮겨 맨 표면을 코팅합니다. 이는 표면 소수성을 증가시켜 원치 않는 세포 부착을 방지합니다.

계면활성제를 제거하고 인산염 완충액으로 세척합니다.

Schwann 세포를 추가하고 마이크로 패턴에 부착되도록 합니다.

부착되지 않은 세포를 제거하기 위해 완충액으로 세척합니다.

배양 배지를 넣고 배양합니다.

세포가 표면을 따라 성장함에 따라 마이크로패턴 모양을 취하여 슈완 세포 표현형을 연구할 수 있습니다.

마이크로 패턴 기판을 준비하려면 패턴 실리콘 웨이퍼를 직경 150mm x 높이 15mm의 원형 페트리 접시 안에 놓고 가스를 제거한 PDMS를 웨이퍼에 붓습니다. PDMS를 섭씨 60도의 오븐에서 밤새 응고시킵니다. PDMS를 실온으로 식힌 다음 수술용 메스를 사용하여 실리콘 웨이퍼가 손상되지 않도록 주의하면서 올바른 패턴이 포함된 30 x 30mm 정사각형의 스탬프를 자릅니다. PDMS 스탬프와 조정 가능한 커버슬립을 70% 에탄올에 30분 동안 담가 멸균합니다.

마이크로패턴의 효능을 확인하려면 여과된 기류를 사용하여 PDMS 스탬프의 표면을 건조시키고 밀리리터당 50마이크로그램의 BSA 용액을 피펫팅하여 스탬프의 패턴 면을 전체적으로 덮습니다. 단백질 흡착을 위해 스탬프를 실온에서 1시간 동안 BSA 용액과 함께 배양한 다음 스탬프를 자연 건조시켜 BSA 용액을 제거합니다. 여과된 기류를 사용하여 조정 가능한 커버슬립의 표면을 건조시킵니다.

스탬프의 패턴이 있는 면을 조정 가능한 커버슬립과 등각 접촉시켜 커버슬립 표면에 BSA가 흡수되도록 하고 스탬프를 커버슬립에 5분 동안 부드럽게 누릅니다. FITC 필터가 있는 형광 현미경을 사용하여 마이크로 패턴을 검사합니다. 형광 패턴이 아닌 세포 접착 영역을 인쇄하려면 BSA 단백질을 라미닌으로 대체하십시오.

커버슬립에서 스탬프를 제거하고 커버슬립을 멸균된 6웰 플레이트로 옮깁니다. 각 웰에 0.2% Pluronic F127 용액 2밀리리터를 첨가하여 커버슬립의 표면을 덮고 플레이트를 실온에서 1시간 동안 배양합니다. F127 용액을 흡인하고 커버슬립을 PBS로 5회, 세포 배양 배지로 한 번 세척한 다음 제곱센티미터당 1,000개의 세포의 파종 밀도로 슈완 세포를 파종합니다. 세포 파종 후 45분 후, 세포 배양 배지를 제거하고 커버슬립을 PBS로 두 번 세척하여 여러 세포가 동일한 패턴에 부착되는 것을 방지합니다. 정량화 전 48시간 동안 원하는 세포 배양 환경에서 세포를 유지합니다.

09:40

세포 유래 세포 외 매트릭스의 빠른, 분리, 기능 연구에 대한 확장 방법, 및 분석

관련 동영상

0 조회수

08:15

혀 기질과 혀 편평 세포 암 종에서 생체 외에서 의 재구성의 제조

관련 동영상

0 조회수

08:34

탈세포화된 연골 세포외 기질 하이드로겔의 합성

관련 동영상

0 조회수

04:13

패턴화된 뉴런에서 교모세포종 세포 공동 배양: 체외에서 쥐 해마 뉴런에서 교모세포종 세포의 이동을 모니터링하는 기술

관련 동영상

0 조회수

02:26

자기장에 의한 패턴화된 신경 배양의 자극(Stimulation of patterned neuronal cultures by a magnetic field)

관련 동영상

0 조회수

08:07

차별화 운명의 공간 조직을 프로빙에 대한 인간 다 능성 줄기 세포의 스텐실 미세화

관련 동영상

0 조회수

09:57

패터닝 단백질과 세포의 다목적 방법

관련 동영상

0 조회수

09:56

마이크로패턴과 정량적 이미징을 사용하여 포유류 세포의 응급 공간 조직 매핑

관련 동영상

0 조회수

09:49

세포외 매트릭스 단백질에 대한 세포 반응을 연구하기 위해 마이크로 패터닝을 위한 PRIMO 시스템을 사용하여 단백질의 빛 유발 분자 흡착

관련 동영상

0 조회수

10:04

조직 수준 역학을 제어하기 위해 준수 기판에 인간 배아 줄기 세포 식민지의 기하학적 패터닝

관련 동영상

0 조회수

마지막 업데이트: 22 8월 2026