쥐의 뇌에서 기울어진 편도체 조각의 생성

0 조회수2:32 • July 8th, 2025

음처럼 차가운 완충액에 담근 쥐의 뇌를 가져 가십시오.

소뇌를 제거하고 내측 전두엽 피질 또는 mPFC를 포함하는 전방 섹션을 다듬습니다.

진동 절개 표본 스테이지에 접착된 각진 한천 블록에 조직을 부착합니다.

슬라이싱 중 안정성을 제공하기 위해 추가 한천 블록을 부착합니다. 산소가 함유된 얼음처럼 차가운 완충액으로 채워진 비브라톰 절단 챔버 내부에 스테이지를 놓습니다.

편도

체에 시냅스 연결을 형성하고 활동을 조절하는 mPFC의 공포 자극 및 신경 투영에 반응하는 편도체를 포함하는 기울어진 슬라이스를 생성합니다.

기울어진 슬라이스는 돌출부를 노출시켜 mPFC와 편도체 사이의 기능적 연결성을 연구할 수 있습니다.

슬라이스를 반으로 자르고 실온에서 산소가 공급된 인공 뇌척수액이 들어 있는 챔버에 넣어 조직을 안정시킵니다.

라이스를 생리학적 온도에서 배양하여 다운스트림 분석을 위해 조직을 회수합니다.

메스를 사용하여 소뇌를 잘라냅니다. 그런 다음 내측 전두엽 피질을 포함하는 뇌의 앞쪽 부분을 분리합니다. 냉각 장치를 사용하여 섭씨 4도로 유지되는 얼음처럼 차가운 절단 용액으로 절단 챔버를 채웁니다. 용액에 산소를 공급하십시오.

여과지로 뇌를 닦아내십시오. 진동 단계에 대해 35도 각도로 절단된 4% 한천 블록을 접착하고 뇌 조직의 뒤쪽 부분을 이 블록에 접착합니다. 슬라이스하는 동안 안정성을 위해 뇌 블록 앞뒤에 두 개의 추가 한천 블록을 붙입니다.

절단 챔버에 티슈가 부착된 스테이지를 놓고 물에 잠겼는지 확인합니다. 예리한 조각을 자르기 시작합니다. 각 슬라이스를 반으로 자르고 실온에서 산소가 공급된 ACSF가 공급되는 인터페이스 챔버로 옮깁니다. 급성 편도체 슬라이스를 절단한 후 인터페이스 챔버를 섭씨 36도의 수조에 넣고 슬라이스가 35-45분 동안 회복되도록 합니다.