쥐 새끼 뇌에서 rhinal cortex-hippocampus 슬라이스 준비

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신경과학

0 조회수 • 3:18 분 • July 8th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

갓 수확한 쥐 새끼 뇌를 등쪽이 위로 향하게 하여 식힌 완충액이 있는 배양 플레이트에 넣습니다.

뇌 반구를 열고 해마를 덮고 있는 조직을 제거합니다.

해마와 코 피질을 포함하도록 반구를 절개합니다.

해마가 위를 향하고 평행하게 하여 양쪽 반구를 여과지 위에 놓습니다.

이 어셈블리를 블레이드가 반구에 수직인 티슈 다지기로 옮깁니다.

반구를 필요한 두께로 절단하여 슬라이스를 얻고 냉각된 완충액이 있는 배양 플레이트로 옮깁니다.

조각을 조심스럽게 분리하고 구조적으로 온전한 해마 및 코 피질 영역을 포함하도록 해부합니다.

슬라이스를 배지가 포함된 멀티웰 플레이트의 막 인서트로 옮깁니다.

슬라이스에서 여분의 완충액을 제거하고 조직 회수를 위해 배양합니다.

미디어를 새로 고칩니다. 슬라이스는 추가 분석에 사용할 수 있습니다.

등쪽이 위로 향하게 하는 뇌를 5밀리리터의 차가운 GBSS가 들어 있는 60mm 플레이트로 옮깁니다. 소뇌에 미세한 집게를 삽입하고 정중선을 따라 주걱을 삽입하여 반구를 조심스럽게 엽니다. 짧고 구부러진 집게를 사용하여 해마 구조에 닿지 않고 해마를 덮고 있는 과도한 조직을 조심스럽게 제거합니다. 그런 다음 각 해마 아래를 자릅니다.

한 번에 한 반구씩 해마가 위로 향하게 하고 서로 평행하게 여과지 위에 옮깁니다. 반구가 칼날과 수직이 되도록 티슈 다지기 위에 여과지를 놓고 반구를 350미크론 조각으로 자릅니다. 얇게 썬 조직을 5밀리리터의 차가운 GBSS가 들어 있는 새 페트리 접시에 옮기고 둥근 끝 전극을 사용하여 조각을 조심스럽게 분리합니다.

구조적으로 온전한 비피질과 해마가 있는 샘플만 유지하고, 주걱과 둥근 끝 전극을 사용하여 웰당 1.1밀리리터의 배양 배지를 포함하는 6웰 플레이트의 적절한 수의 웰에 있는 개별 인서트에 최대 4개의 온전한 슬라이스를 배치합니다.

P20 피펫을 사용하여 각 슬라이스 주변에서 과도한 해부 배지를 제거합니다. 플레이트를 세포 배양 인큐베이터에 넣습니다. 2-3일마다 배지를 교체하십시오. 집게를 사용하여 인서트를 들어 올립니다. 해당 웰에서 배지를 흡인하고 인서트를 제자리에 다시 놓습니다. P1000 피펫을 사용하여 각 웰에 섭씨 37도의 신선한 배지 1밀리리터를 추가합니다.

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마지막 업데이트: 15 8월 2026