초파리 유충 뇌 이식의 해부 및 장착

초파리인 초파리의 유충을 접시 안의 생리 식염수에 담그고 시작하십시오. 용액은 유충이 탈수되는 것을 방지합니다.

해부 현미경으로 입 갈고리로 유충의 앞쪽 끝을 찾습니다.

앞쪽 끝에는 안구 디스크와 뇌엽과 복부 신경줄로 구성된 중추신경계(CNS)가 포함되어 있습니다.

집게를 사용하여 유충의 뒤쪽 끝을 잡습니다. 다른 한 쌍의 집게를 사용하여 앞쪽 끝을 당겨 내부 장기를 추출합니다.

안구 디스크에 부착된 CNS를 분리하기 위해 장과 부착된 근육을 제거합니다.

뇌 외식편을 장착하려면 추출된 조직을 유리 슬라이드의 그리스 장벽 안에 둘러싸인 식염수 용액으로 옮깁니다.

외식편의 등쪽이 위를 향하도록 하고 커버슬립으로 조직을 밀봉합니다. 뇌 외식편은 분석 준비가 되었습니다.

유충 초파리의 뇌를 채취하려면 해부 현미경으로 한 쌍의 5번 표준 팁 해부 겸자 한 쌍을 사용하여 유충 표본을 제자리에 고정하고 다른 한 쌍을 사용하여 뇌를 조심스럽게 해부하여 안구 디스크, 뇌엽 및 복부 신경줄을 보존합니다. 그런 다음 부착된 근육을 제거하여 이미징 중 샘플의 움직임을 최소화합니다. 모든 뇌를 채취하면 진공 그리스를 사용하여 유리 슬라이드에 정사각형 챔버를 그리고 챔버에 20마이크로리터의 외부 식염수를 추가합니다.

집게를 사용하여 뇌를 챔버로 옮기고 등쪽이 위를 향하도록 현미경으로 뇌의 위치를 조정합니다. 챔버를 유리 커버슬립으로 덮고 커버슬립을 부드럽게 눌러 이미징 절차 중 샘플 드리프트를 줄입니다.