자기장에 의한 패턴화된 신경 배양의 자극(Stimulation of patterned neuronal cultures by a magnetic field)

세포외 기록 용액이 들어 있는 배양 플레이트 내에서 신경 고리 배양이 있는 패턴화된 커버슬립을 취하십시오.

이 세포는 세포내 칼슘 수치를 측정하기 위해 칼슘에 민감한 형광 염료와 함께 사전 배양됩니다.

플레이트를 형광 현미경 스테이지에 놓습니다.

최적의 자극을 보장하기 위해 자기 자극기에 연결된 원형 자기 코일을 배양 위의 적절한 거리에 동심원으로 배치합니다.

자기 자극기를 사용하여 코일을 통해 고전압과 전류를 가하여 시변 자기장을 생성합니다.

이 자기장은 뉴런에 전기장을 유도하여 활동 전위를 생성합니다.

신경 말단에 도달하면 활동 전위는 전압 개폐 칼슘 채널을 활성화하여 칼슘이 세포로 유입되고 시냅스에서 신경 전달 물질이 방출되도록 합니다.

이 방출은 시냅스 연결을 통해 인접한 뉴런으로의 신호 전달을 용이하게 합니다.

칼슘 이온 유입으로 인해 이러한 이온은 세포내 칼슘 민감성 염료에 결합하여 신경 활동을 나타내는 형광을 증가시킵니다.

자기 자극을 시작하려면 원형 패턴으로 성장한 신경 배양물을 현미경 아래에 배치합니다. 시중에서 판매되는 표준 원형 자기 자극 코일과 지지 자극기를 사용하여 배양을 자극합니다.

비표준 자기장 강도로 배양을 자극하려면 맞춤형 자기 자극 코일을 맞춤형 자극기에 연결하십시오. 그런 다음 레이저 포인터를 사용하여 배양액의 중심을 코일의 중심에 정렬하여 성공적인 자극을 보장합니다.

코일 위치가 배양액 중심에서 약 5mm 위에 유지되도록 조정합니다. 자극 코일이 적절하게 배치되면 자극기를 최대 5킬로볼트의 전위로 로드합니다. 그런 다음 고전류, 고전압 스위치를 사용하여 자극 코일을 통해 고전압과 전류를 방전하여 배양된 뉴런의 활동을 자극하는 자기 펄스를 생성합니다.