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신경과학
0 조회수 • 4:42 분 • July 8th, 2025
두개골이 노출된 정위 프레임에 고정된 마취된 쥐부터 시작하십시오.
두개골의 기준점을 사용하여 원하는 좌표를 보정하고 표시합니다.
표시된 위치에 구멍을 뚫습니다.
파편을 제거하고 뇌의 바깥층을 잘라냅니다.
건조를 방지하기 위해 식염수로 구멍을 자주 씻어내십시오.
전극을 지지하기 위해 추가 구멍과 앵커 나사를 뚫습니다.
기준 전극과 전기생리학적 기록 전극을 설치합니다. 아크릴 수지를 도포하여 고정합니다.
뇌의 다중 표적 위치에 따라 프레임에 텅스텐 마이크로와이어 전극을 배열합니다.
여러 전극을 사용하면 여러 표적 부위의 뇌 활동을 동시에 기록할 수 있습니다.
두개골의 기준점을 사용하여 텅스텐 마이크로와이어 전극을 배치합니다.
뇌에 부드럽게 삽입하십시오.
뇌 활동을 감지하도록 녹음 소프트웨어를 구성합니다.
전극을 목표 깊이까지 내리고 데이터 기록을 시작합니다.
현미경으로 표준 정위 쥐 정렬 도구를 사용하여 지정된 팁을 브레그마에 보정하고 도구의 브레그마와 람다에 대한 지정된 지점이 동시에 두개골에 닿을 때까지 앞니 막대를 조정합니다. 캐뉼라가 있는 정위 홀더를 사용하여 브레그마에 맞게 보정한 다음 두개골의 모든 드릴 구멍 위치를 계산합니다.
그런 다음 두개골을 조심스럽게 긁거나 수술용 색상 마커를 사용하여 뚫을 구멍의 위치를 표시하십시오. 그런 다음 마이크로 드릴을 사용하여 직경 약 1mm의 모든 구멍을 조심스럽게 뚫습니다. STN 및 SNr의 경우 약 2mm x 3mm 크기의 공통 구멍을 뚫습니다.
하나의 가는 캐뉼라를 가져다가 끝을 구부려 두 개의 갈고리를 만듭니다. 그런 다음 후크를 사용하여 드릴 구멍에서 이물질을 제거하고 공통 STN/SNr 구멍의 경막을 조심스럽게 자르고 제거합니다. 그런 다음 생리 식염수로 드릴 구멍을 세척하십시오.
뇌와 경막이 건조해지는 것을 방지하기 위해 15분마다 생리 식염수를 드릴 구멍에 한 방울씩 바르십시오. 그런 다음 마이크로 드릴과 일치하는 스테인리스 스틸 마이크로 나사를 사용합니다. 구멍을 뚫고 소뇌 위의 기준 경막외 전극의 드릴 구멍 사이에 마이크로 나사를 조입니다.
그런 다음 가는 핀셋으로 전극 끝을 안내하고 두개골 뼈 바로 아래에서 드릴 구멍으로 밀어 넣습니다. 모든 경막외 전극을 2액형 치과용 아크릴로 고정합니다. 브레그마 지점을 덮거나 공통 STN/SNr 구멍에 영향을 미치지 않도록 하십시오.
그런 다음 텅스텐 마이크로와이어 전극이 있는 준비된 홀더를 정위 고정 프레임에 삽입합니다. STN을 표적으로 삼기 위한 브레그마에 대한 가장 복부 전극을 보정합니다. 공통 STN/SNr 구멍 위의 계산된 위치로 조정하고 전극을 뇌까지 내립니다.
텅스텐 마이크로와이어 전극이 뇌 내부로 원활하게 들어가는지 확인하십시오. 이 절차에서는 대역 통과 필터와 같은 기록 소프트웨어를 설정하고 원시 데이터 신호를 증폭합니다. 그런 다음 적절한 설정으로 온라인 LFP 및 스파이크 필터를 사용합니다.
모든 필터에 버터워스 유형 필터를 사용하십시오. 온라인 스파이크 정렬을 위한 스파이크 임계값을 설정합니다. 대부분의 녹음 소프트웨어는 소프트웨어에서 신호가 스파이크로 표시되는 임계값보다 높은 진폭 값인 스파이크 임계값을 설정할 수 있습니다. 그런 다음 텅스텐 마이크로와이어 전극을 STN 위 1mm까지 천천히 내리고 필요한 경우 신호가 안정화될 때까지 기다립니다.