JoVE 실험 백과사전
신경과학
0 조회수 • 3:00 분 • July 8th, 2025
머리를 정위 프레임에 고정한 마취된 마우스로 시작합니다.
두피를 면도하고 살균하십시오.
절개를 하고 잔여 조직을 제거하여 두개골을 노출시킵니다.
소독제로 두개골을 청소하고 대상 위치에 구멍을 뚫습니다.
뇌의 바깥층을 제거합니다.
이온 용액으로 채워진 미세 전극을 원하는 각도로 구멍에 삽입합니다.
두 미세 전극을 뇌의 목표 좌표로 내립니다.
전극의 저항을 테스트하고 기록 설정을 조정하여 로컬 필드 전위 또는 LFP 데이터를 안정적으로 수집할 수 있도록 합니다.
LFP는 작은 영역 내에서 많은 뉴런의 집단 활동으로 인한 전압 변화를 반영합니다.
양쪽 반구의 LFP를 기록하여 두 반구 간의 신경 활동을 비교합니다.
수술 전에 겸자로 꼬리 또는 발가락을 꼬집어 마우스의 마취 깊이를 확인하십시오. 그런 다음 마우스를 정위 고정 장치에 놓고 머리를 고정합니다. 양쪽 눈에 연고를 발라 촉촉하게 유지하세요.
그런 다음 머리를 면도하고 해당 부위를 소독합니다. 면도한 부위의 중앙에 12-15mm의 작은 절개를 합니다. 집게를 사용하여 두피를 정중선에서 부드럽게 당깁니다. 그런 다음 피부를 부드럽게 분리하고 잔여 조직을 제거합니다.
과산화수소로 코팅된 면봉을 사용하여 두개골을 청소하십시오. 실체 현미경으로 두개골의 왼쪽과 오른쪽 모두에 반경 1-1.5mm의 두 개의 작은 구멍을 뚫어 기록 미세 전극을 M2 영역에 삽입할 수 있습니다.
텅스텐 바늘로 경막을 조심스럽게 제거한 다음 기계적 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 0.5몰 염화나트륨으로 채워진 두 개의 개별 기록 미세 전극을 구멍에 60도 각도로 삽입합니다.
LFP 기록의 경우 왼쪽 및 오른쪽 유리 전극을 M2 좌표로 천천히 내립니다. 품질 관리를 위해 차동 증폭기를 사용하여 각 전극의 저항을 테스트합니다. 그런 다음 녹음 프로세스를 0.1 Hz 고역 통과 및 1,000 Hz 저역 통과로 1,000 배 증폭으로 설정합니다. 마취 하에 마우스가 초당 2회 호흡하면서 최소 60초 동안 안정적인 상태에서 디지털화된 원시 LFP 데이터를 수집합니다.