초파리 중추신경계의 전기적 활동에 대한 세포외 기록

0 조회수3:04 • July 8th, 2025

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염수로 채워진 기록 챔버 안에 초파리 유충의 절개된 중추신경계(CNS)를 배치합니다.

절개된 CNS에는 복부 신경절과 하행 말초 신경이 포함됩니다.

절개된 CNS의 후쪽 끝에 흡입 전극을 배치합니다. 챔버를 접지선에 연결하여 배경 소음을 줄이십시오.

음압을 가하여 말초 신경을 전극으로 끌어당기고 신경 활동의 세포외 기록을 시작합니다.

시간이 지남에 따라 뉴런에 의한 활동 전위의 자발적인 생성을 모니터링하고, 기준선 발화 빈도라고 하며, 이를 안정

화시킵니다.

용매를 대조군으로 추가합니다. 실행 빈도가 기준선과 일치하도록 활동을 기록합니다.

용매에 용해된 대상 시험제를 도입하고 소성 빈도를 기록합니다.

빈도의 증가는 작용제의 흥분 효과를 나타내는 반면, 빈도의 감소는 억제 효과를 나타냅니다.

시작하려면 먼저 붕규산 유리 모세관에서 유리 피펫 전극을 5-15메가옴의 저항으로 당깁니다. 절개된 CNS를 200마이크로리터의 식염수가 들어 있는 왁스 챔버에 삽입합니다. 고정amp 접지선에 납땜된 악어 클립으로 코팅되지 않은 곤충 핀을 사용하고 핀을 식염수에 삽입하여 회로를 완성합니다. 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 전극을 절개된 CNS의 꼬리 끝으로 향

하게 합니다.

말초 신경 줄기를 연결하기 전에 획득 분석 소프트웨어에서 임계값 수준을 조정하여 배경 소음을 제거합니다. 주사기에 약간의 음압을 가하여 말초 신경을 흡입 전극으로 끌어당깁니다. 데이터 수집 소프트웨어에서 기록을 시작하고 기준선 발사 속도 데이터를 수집하기 전에 기준선 발사 속도가 5분 동안 평형을 이룰 수 있도록 합니다.

5분 후 200마이크로리터의 식염수와 비히클을 추가하여 챔버의 총 부피를 400마이크로리터로 만들어 제어 발사 속도 기록을 시작합니다. 대조군 처리의 발사 패턴이 여기에 표시된 예와 유사하지 않은 경우 준비 및 기록을 폐기합니다.

기록 3-5분 후 기준선이 설정되면 식염수 200마이크로리터를 빼내고 식염수에 가용화된 실험제제 200마이크로리터를 추가합니다. 획득 분석 소프트웨어에 약물 적용의 이 시점을 라벨링하여 약물 및 최종 농도를 포함하는 설명을 포함합니다.

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마지막 업데이트: 15 8월 2026