여러 뇌 영역의 전기생리학적 기록을 위한 마이크로 드라이브 어레이 방법

마취된 쥐를 정위 고정 프레임에 고정합니다. 두피를 면도하고 소독한 후 절개하여 두개골을 노출시킵니다.

후각 전구 위에 구멍을 뚫어 기록 전극을 이식합니다. 전두엽 피질 위에 구멍을 뚫어 기본 뇌 활동 신호를 획득하는 기준 전극을 이식합니다.

해마 주위에 앵커 나사를 삽입하고 해당 부위 위에 큰 구멍을 만듭니다.

구멍 위에 기록 전극이 포함된 캐뉼라가 있는 통합 마이크로 드라이브 어레이를 배치합니다.

겔 형성 용액을 사용하여 어레이를 고정합니다. 앵커 나사에 부착되어 기계적 안정성을 제공하는 치과용 시멘트를 도포합니다.

어레이를 이식된 전극에 연결하여 여러 뇌 영역에서 동시에 기록합니다. 신호 품질을 향상시키기 위해 연결을 절연합니다.

쥐가 회복되도록 한 다음 어레이 전극을 전진시켜 뇌에 접촉하고 신호가 안정화되도록 합니다.

전극을 이식한 쥐는 뇌의 전기 신호를 기록할 준비가 되어 있습니다.

쥐를 정위 고정 장치에 고정한 다음 두개골을 면도하고 청소한 다음 눈 사이 지점에서 목까지 정중선을 따라 3cm 절개로 어레이 이식을 시작합니다. 고속 드릴을 사용하여 후각 구 위 직경 0.7mm에서 1.0mm 사이의 한 쌍의 원형 개두술을 만듭니다., 이는 bregma 앞쪽 11.0mm, 양측 1mm입니다.

그런 다음 나사 끝이 약 2mm 깊이의 뇌와 접촉할 수 있을 만큼 충분히 깊숙이 두 개의 BR 전극을 이식합니다. 나사를 6-8번 완전히 돌리십시오.

다음으로, 전두엽 피질 위, 앞쪽 2.7mm, 양측 2.7mm에 또 다른 한 쌍의 개두술을 만듭니다. 이 구멍에 두 개의 접지 기준 전극을 고정하여 약 1.6mm 깊이의 뇌에 닿도록 합니다. 나사를 4-5번 완전히 돌려야 합니다.

이제 해마 위 직경 약 2.0mm, 후방 3.8mm, bregma 양측 2.5mm의 대형 원형 개두술을 계획합니다. 그런 다음 개두술을 둘러싼 부위에 6-8개의 1.0mm 구멍을 만듭니다.

이 각 구멍에 앵커 나사를 이식합니다. 그런 다음 나사 사이에 계획된 개두술을 합니다. 큰 구멍 위에 캐뉼라 팁이 큰 개두술 바로 위에 오도록 통합 마이크로드라이브 어레이를 배치합니다.

캐뉼라 팁과 뇌 표면 사이의 간격 공간을 약 100마이크로리터의 2액형 에폭시로 채웁니다. 다음 5분 동안 혼합물이 투명한 젤로 변하도록 합니다. 다음으로 캐뉼라, BR 전극, 접지 기준 전극 및 앵커 나사를 치과용 시멘트로 덮습니다.

BR 또는 접지 기준 전극의 열린 끝을 덮지 않고 약 5mm의 시멘트를 도포합니다. 이제 전극의 열린 끝을 모두 보드에 연결되는 곳에 납땜합니다. 그런 다음 통합 마이크로드라이브 어레이의 하단 부분과 모든 전극 와이어를 치과용 시멘트로 덮습니다.

이식 후 쥐가 긁히지 않도록 전극선을 완전히 덮는 것이 중요합니다. 이제 쥐가 회복되도록 하십시오. 흉골 누운 자세를 유지할 수 있을 만큼 충분한 의식을 회복한 후에는 새장 동료 없이 혼자 수용하고 음식과 물을 자유롭게 이용할 수 있도록 합니다.

수술 후에는 매일 나사를 전진시켜 사상단을 점차적으로 전진시킵니다. 사상단이 대상 뇌 영역에 인접하면 신호가 안정화되는 동안 며칠 동안 정착시킵니다.