전기생리학적 기록을 위해 마우스 뇌에 전극 어셈블리를 이식합니다.

체온을 유지하기 위해 가열 패드가 포함된 정위 프레임에 마취된 마우스를 고정합니다.

눈이 건조해지는 것을 방지하기 위해 윤활제를 바르고 전해질액을 피하에 주입하여 수분을 유지합니다.

두피의 털을 제거하고 부위를 소독한 후 진통제를 피하에 주입하여 통증을 경감합니다.

개골을 노출시키기 위해 절개를 한 다음 뇌 영역을 식별하기 위해 해부학적 랜드마크를 보이도록 청소합니다.

치과용 접착제를 바르고 경화광을 사용하여 경화시켜 전극 이식을 돕습니다.

해마와 소뇌 위에 구멍을 뚫고 정위 고정 프레임의 홀더를 사용하여 전극 어셈블리를 장착합니다.

양극성 전극은 해마 활동을 기록하는 반면 기준 전극은 소뇌에서 기본 활동을 얻습니다.

전극을 삽입하고 치과용 시멘트로 어셈블리를 고정한 다음 홀더에서 분리합니다.

전해질과 진통제를 다시 투여합니다.

전기생리학적 기록을 수행하기 전에 마우스가 완전히 회복되도록 하십시오.

수술을 진행하기 전에 8주 된 VGAT-Cre 마우스의 체중을 기록하십시오. 그런 다음 동물을 유도 챔버에 넣어 마취를 유도합니다. 마취된 마우스를 섭씨 37도의 가열 패드 위에 놓습니다. 피드백 제어 온도 시스템을 사용하는 경우 수술 중 온도 모니터링을 위해 온도 프로브를 동물의 직장에 삽입하십시오. 수술을 시작하려면 흡입 마취 흐름을 코 콘으로 방향을 바꾸고 앞니를 앞니에 부드럽게 넣고 콘을 코 위로 움직여 동물을 정위 고정 프레임에 장착한 다음 이어 바를 귀에 넣고 정위 고정 프레임에 부착합니다.

동물의 머리가 수평이고 중앙에 있고 살짝 조사해도 움직일 수 없는지 확인하십시오. 동물이 장착되면 수분 공급을 위해 쥐에게 0.5밀리리터의 노르모솔을 주입하고 각막 건조를 방지하기 위해 안구 윤활제를 바릅니다. 뒷다리 발가락을 꼬집어 마취 깊이를 모니터링합니다. 동물에게 금단 반사가 없으면 수술 부위 주변의 쥐의 두피 털을 제거하십시오. 완료되면 요오드로 마무리 에탄올과 요오드를 번갈아 가며 깨끗한 피부 부위를 3회 소독하고 0.05% 부피바카인 0.25밀리리터를 피하 주사합니다.

메스를 이용해 두개골을 절개한 후 수술용 가위로 피부의 일부를 잘라 두개골을 노출시킵니다. 면봉으로 모든 밑에 있는 조직에서 두개골을 청소하기 전에 피부를 옆으로 밀어냅니다. 멸균 면봉을 사용하여 과산화수소로 두개골을 청소하고 두개골 봉합사, 브레그마 및 람다가 보이도록 합니다. 정체적으로 장착된 드릴을 사용하여 드릴 팁을 브레그마와 0 x, y 및 z 좌표로 이동한 다음 드릴을 올려 람다로 이동하여 좌표를 결정하여 헤드가 수평인지 확인합니다.

두개골을 완전히 건조시킨 후 어플리케이터로 셀프 에칭 치과용 접착제 한 방울을 바릅니다. 치과용 UV 광선으로 치과용 접착제를 40초 동안 경화하기 전에 60초 동안 기다리십시오. 광택 표면은 접착제가 두개골과 효과적으로 가교되었음을 나타냅니다. 0.031인치 드릴 비트를 사용하여 뇌에 구멍을 뚫지 않도록 분당 5,000회전(RPM)으로 두개골에 두 개의 시추공을 조심스럽게 뚫습니다. 버 구멍의 드릴링을 향상시키기 위해 식염수 한 방울을 바르십시오. 해마 깊이 전극을 이식하려면 bregma에서 뒤쪽 3mm, 측면 3mm에 드릴합니다.

레그마에서 뒤쪽 6mm, 측면 0mm에서 람다 뒤쪽, 소뇌 위의 기준 전극용 버 구멍 하나를 뚫습니다. 그런 다음 전극이 조립된 6핀 받침대를 정위 프레임의 전극 홀더에 장착합니다. 해당 버 구멍 위에 전극을 정렬하여 헤드셋을 천천히 내리고 탐색하여 왼쪽 및 오른쪽 해마 버 구멍 바로 위에 있는 두 개의 양극 전극 팁을 찾고, 필요한 경우 기준 전극을 조정하여 구멍 위, 소뇌 위.

해마 비틀림 전극이 구멍 바로 위에 있을 때 z축을 0으로 하고 전극을 좌우 해마로 마이너스 3mm까지 천천히 낮추고 기준 전극을 소뇌 위의 구멍으로 안내합니다. 믹싱볼에 분말과 액체를 섞어 치과용 시멘트를 준비한 후 두개골 표면, 전극, 두개골 표면과 받침대 바닥 사이의 공간을 치과용 시멘트로 덮습니다.

시멘트가 건조되고 굳으면 정위 암에서 전극 홀더를 분리하고 암을 들어 올린 다음 받침대에서 홀더를 제거합니다. 케토프로펜과 노르모솔을 마우스에 피하 투여한 후, 정위 프레임에서 동물을 제거하여 동물을 사육대 케이지의 가열된 패드 위로 옮깁니다. 완전히 깨어나면 한 마리의 동물을 사육장 케이지로 돌려보내고 동물에게 부드러운 음식을 먹이고 수술 후 최대 72시간까지 매일 체중 감소를 모니터링합니다.