전기생리학적 기록을 사용한 공동 배양에서의 신경 연결 형성 평가

JoVE Encyclopedia of Experiments

신경과학

0 조회수 • 2:17 분 • July 8th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

산소가 함유된 세포외 용액이 관류된 기록 챔버에 공동 배양이 포함된 커버슬립을 놓습니다.

공동 배양은 성상세포, 형광 단백질에 융합된 빛에 민감한 이온 채널을 발현하는 쥐 피질 뉴런 및 다른 형광 단백질을 발현하는 iPSC 유래 뉴런으로 구성됩니다.

공초점 현미경을 사용하여 형광 iPSC 유래 뉴런을 식별합니다.

세포내 용액으로 채워진 기록 피펫을 뉴런 쪽으로 전진시켜 전체 세포 구성을 설정합니다.

정확한 전류 측정을 위해 일정한 음의 멤브레인 전위를 유지합니다.

빛으로 공동 배양을 비추어 피질 뉴런의 빛에 민감한 이온 채널을 활성화하여 활동 전위를 생성합니다.

활동 전위는 시냅스 틈으로 신경 전달 물질을 방출합니다

.

시냅스로 연결되면 신경 전달 물질은 패치된 iPSC 유래 뉴런의 수용체에 결합하여 이온 채널을 열고 시냅스 후 전류를 생성합니다.

빛 자극 후 iPSC 유래 뉴런의 증가된 시냅스 후 전류는 피질 뉴런과의 시냅스 연결을 확인합니다.

60x 수침 렌즈가 장착된 공초점 현미경을 사용하십시오. 95% 산소, 5% 이산화탄소로 지속적으로 거품을 일으키는 외부 용액에 실온에서 세포를 관류시킵니다. 내부 용액을 사용하여 기록 마이크로피펫을 채웁니다.

광유전학적 자극을 수행하려면 전체 세포 모드에서 tdTomato-양성 세포를 패치하고 전압 클램프를 음의 70밀리볼트로 설정합니다. 전체 필드 수은 램프와 480-over-40 여기 필터를 사용하여 30초 동안 전체 필드를 자극합니다. ChR2 발현 시냅스 전 피질 뉴런의 광자극에 의해 유도된 패치된 세포의 시냅스 후 전류 또는 PSC를 기록합니다.

10:24

급성 뇌 조각에서 신경 세포의 미세 회로의 전기 생리 및 형태 학적 특성은 페어 패치 클램프 녹음을 사용하여

관련 동영상

0 조회수

09:55

Drosophila 테트로도톡신 저항 나트륨 채널을 사용 하 여 Monosynaptic 연결 검사

관련 동영상

0 조회수

07:51

깨어 있는 쥐에 유리 Optrode 신경 형식의 Optogenetics 식별

관련 동영상

0 조회수

09:27

어떻게 문화, 기록 및 미세 전극 배열에의 연결을 네트워크를 자극 (MEAs)에

관련 동영상

0 조회수

04:21

전기생리학적 기록(Electrophysiological Recordings for Assessing Neuronal Regenerations in Co-cultured Spinal Cord Slices)

관련 동영상

0 조회수

05:45

Neuron-Astrocyte 공동 배양에서 Neuronal Network의 전기생리학적 활동 기록

관련 동영상

0 조회수

11:01

컴퓨터를 이용한 다중 전극 패치 클램프 시스템

관련 동영상

0 조회수

11:22

공동 문화 시스템에 신경 연결의 형성을 평가하기위한 Optogenetic 접근

관련 동영상

0 조회수

07:51

다중 전극 배열에 나선 신경절 신경 이식편 문화 및 전기 생리학

관련 동영상

0 조회수

09:32

약물 저항성 측두엽 간질 환자에서 난원 공 개존증 전극 녹음의 네트워크 분석

관련 동영상

0 조회수

마지막 업데이트: 15 8월 2026