0 조회수 • 2:53 분 • July 8th, 2025
산소가 함유된 aCSF의 흐름이 있는 기록 챔버에서 갓 태어난 설치류로부터 뇌간-척수 준비를 확보합니다. 제제를 덮고 있는 얇은 조직을 제거합니다.
뇌간의 신경 네트워크는 호흡을 제어하기 위해 척수의 네 번째 복부 또는 C4 신경근의 운동 뉴런을 통해 전달되는 흡기 폭발이라고 하는 리드미컬한 전기 활동을 생성합니다.
기록 피펫을 신경근 근처에 놓고 흡입을 사용하여 신경근을 안쪽으로 끌어당겨 밀봉을 형성합니다.
뇌간 뉴런의 고유한 특성은 나트륨 유입을 일으켜 막을 탈분극시키고 활동 전위를 생성한 다음 재분극을 위해 칼륨 유출을 일으킵니다.
그에 따른 과분극은 나트륨-칼륨 ATPase가 ATP를 활용하여 막 전위를 회복할 때까지 새로운 활동 전위를 방지합니다.
활동 전위는 리드미컬한 폭발로 신경근으로 전파됩니다.
산소가 부족한 aCSF를 흐르면 ATP 생성이 방해되고 ATPase 기능이 손상되어 활동 전위를 지연시키고 리드미컬한 폭발을 감소시킵니다.
산소가 공급된 aCSF로 다시 전환하면 리드미컬한 버스트 횟수가 회복됩니다.
이 절차에서는 신경 조직을 복부가 위를 향하도록 기록실에 넣습니다. 척수의 가장 낮은 부분과 뇌간의 가장 부분에 핀으로 고정합니다. 그 후, 신경 조직의 표면을 덮고 있는 얇은 조직인 지주막을 제거합니다. 신경 조직의 연막과 혈관을 제거하지 않도록 주의하십시오. 그런 다음 전극에 ACSF를 채웁니다.
마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 전극을 네 번째 복부 뿌리 가까이에 조심스럽게 배치합니다. 주사기를 사용하여 신경 뿌리를 부드럽게 흡인합니다. 그런 다음 신경근이 있는 전극을 척수에 대고 놓습니다. 그 후, 제제의 기본 매개변수를 결정하기 위해 최소 20분 동안 정상 산소 조건에서 신경 조직에 의해 생성된 전기생리학적 활동을 기록합니다.
관류 용액을 카보겐 버블 ACSF에서 저산소증 자극 ACSF로 전환하고 15분 동안 기록합니다. 그런 다음 관류 용액을 표준 카보겐 버블 ACSF로 다시 전환하고 기록을 종료하기 전에 최소 15분 동안 더 기록합니다.
본 논문은 신생 설치류의 분리된 뇌줄기-척수 표본을 이용한 전기생리학적 기록 프로토콜을 제시합니다. 이 방법을 통해 연구자는 산소 공급 및 산소 결핍 조건 모두에서 제4 복측 신경근으로부터 흡기 버스트를 기록함으로써 신경 호흡 네트워크의 출력을 모니터링할 수 있습니다.
분리된 뇌줄기-척수 표본의 전기생리학적 기록을 통해 제어된 대사 조건 하에서 신경 호흡 네트워크 기능에 대한 정밀한 조사가 가능합니다. 이러한 접근 방식은 특히 대사 스트레스에 민감한 경로에 대해 초기 단계의 신경과학 표적 검증 시 기전적 위험 제거와 예측 신뢰도를 지원합니다. 이 방법은 신경 회로의 회복력과 회복을 평가할 수 있는 재현 가능한 플랫폼을 제공하며, 신경 약리학 및 호흡기 치료제 분야의 포트폴리오 결정에 유용한 정보를 제공합니다.
이 전기생리학적 플랫폼은 초기 타겟 검증부터 호흡 및 신경약리학 프로그램의 전임상 모델 개발에 이르기까지의 발견 연속체에 통합됩니다.
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마지막 업데이트: 29 8월 2026