JoVE 실험 백과사전
신경과학
0 조회수 • 2:53 분 • July 8th, 2025
살아있는 초파리 파리를 머리를 노출하고 더듬이를 접착 테이프에 부착하고 고정 막대로 고정한 튜브에 장착합니다.
건조를 방지하기 위해 가습된 공기의 일정한 흐름 하에 제제를 보관하십시오.
입 부분을 보호하는 지지 구조인 clypeus를 통해 기준 전극을 삽입하여 순환계에 도달합니다.
곤충의 감각 기관인 감각기 근처에 기록 전극을 놓습니다.
전극을 감각의 바닥에 삽입합니다.
특정 스파이크가 있는 신호를 기록하여 후각 수용체 뉴런 근처의 올바른 전극 위치를 확인합니다.
테스트 냄새가 들어 있는 카트리지를 전달 튜브에 연결합니다.
파리의 안테나를 겨냥하여 튜브를 배치하고 전극으로부터의 높이와 거리를 조정합니다.
소프트웨어를 사용하여 냄새 유량과 투여량을 설정한 다음 냄새를 방출합니다.
이제 전기 신호를 기록하여 냄새에 대한 파리의 신경 반응을 포착합니다.
기록을 찍으려면 빠르고 부드러운 움직임을 사용하여 기준 전극을 clypeus에 삽입하십시오. 혈림프와 접촉할 큐티클 바로 아래에 놓습니다. 다음으로, 표적 감각과 동일한 시야에 들어갈 때까지 기록 전극을 천천히 내립니다. 그런 다음 기록 전극을 감각베이스에 삽입합니다.
계속하기 전에 at4A 및 at4C 뉴런에서 식별 가능한 스파이크와 함께 높은 신호 대 잡음비가 있는지 확인하십시오. at4A 뉴런은 20헤르츠보다 빠르게 발화해서는 안 됩니다.
이제 카트리지를 냄새 전달 튜브에 연결합니다. 이 경우 팔미톨레산 카트리지가 부착됩니다. 그런 다음 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 카트리지를 머리를 향하도록 하면서 준비 쪽으로 움직입니다. 약 4mm 거리에서 안테나를 직접 가리키는 카트리지 팁을 배치합니다. 카트리지도 슬라이드 위 약 1mm에 있어야 합니다.
카트리지는 전극과 슬라이드로 밀접하게 접해 있을 수 있습니다. 이상적으로는 두 전극에서 최소 4mm 떨어져 있어야 합니다. 자극을 위해 냄새 유량 컨트롤러를 500밀리초 버스트로 설정하고 분당 500밀리리터 유량을 사용하십시오. 각 자극 폭발에 대해 10초 동안 전기적 활동을 기록합니다.