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신경과학
0 조회수 • 2:41 분 • July 8th, 2025
패턴화된 다중 전극 어레이 또는 MEA 위에 배치된 라미닌 코팅, 구획화된 미세유체 장치로 시작합니다.
이 장치는 MEA의 미세 전극에 부착된 배양된 iPSC 유래 피질 글루타메이트성 뉴런을 운반합니다.
이 뉴런은 전기 신호를 통해 통신합니다. 이러한 신호를 기본 신경 활동으로 기록합니다.
다음으로, 뇌종양 세포의 일종인 글루타메이트가 풍부한 소아 고급 신경아교종 세포를 장치에 시드하고 배양합니다.
시간이 지남에 따라 신경아교종 세포가 채널에 들어가 부착되어 공동 배양이 확립됩니다. 나중에 신경아교종 세포는 흥분성 신경 전달 물질인 글루타메이트를 방출합니다.
방출된 글루타메이트는 신경 수용체와 상호 작용하여 칼슘 및 나트륨 이온의 유입을 일으켜 신경 막 탈분극을 유발합니다.
이것은 신경 흥분성을 유도하고 신경 활동을 향상시킵니다.
전기 신호를 다시 기록하고 공동 배양 후 상당한 증가는 성공적인 뉴런과 신경아교종 세포 상호 작용을 나타냅니다.
각 전용 미세유체 장치의 성숙한 부착 글루타메이트성 뉴런 위에 트립신화된 UW479 및 BT35 세포를 시드합니다. 섭씨 37도 및 글루탐산산 뉴런 D11 이상 배지와 함께 5% 이산화탄소의 통제된 환경에서 2일 동안 공동 배양을 유지합니다.
이미지 분석 소프트웨어로 분석한 현미경 사진을 사용하여 소아 고급 신경아교종 세포의 수를 계산하여 생존력을 평가하고 세포의 백분율을 계산합니다. MFD를 기록 장치에 넣고 시중에서 판매되는 소프트웨어를 사용하여 21일째에 글루타메이트성 뉴런의 전기생리학적 기록을 수행합니다.
소아 고급 신경아교종 세포를 파종하기 전에, 공동 배양과 병행하여 대조군으로 배양된 분화된 글루타메이트성 뉴런의 두 번째 전기생리학적 기록을 수행합니다.