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세포외 기질 코팅 다중 전극 어레이(MEA)에서 초기 배아 병아리 뉴런의 부착 배양으로 시작합니다.
MEA의 베이스에는 신경 활동을 기록하는 작은 전극 그리드가 포함되어 있습니다.
테스트 배양에서 뉴런은 독소가 있을 때 성장하는 반면, 대조군 배양에서는 뉴런이 독소 없이 성장합니다.
기록하기 전에 두 MEA의 배지를 독소가 없는 배지로 교체하고 잠시 배양합니다.
그런 다음 녹음 장치에 하나의 MEA를 넣고 녹음을 시작합니다.
뉴런은 활동 전위 또는 스파이크라고 하는 전기 자극을 통해 통신합니다.
시냅스에서 이러한 활동 전위는 신경 전달 물질 방출을 유발하여 신호를 다음 뉴런으로 전파합니다.
MEA 전극은 시냅스로 연결된 뉴런에 의해 생성된 스파이크를 기록합니다.
제어 조건에서 건강한 성숙한 뉴런 네트워크는 동기식 스파이크 활동을 나타냅니다.
테스트 배양에서 감소된 스파이크 및 동기화는 독소로 인한 신경 네트워크 성숙 장애를 시사합니다.
획득 당일 배양 배지를 신선한 신경기저 배지로 교체하고 기록하기 전에 최소 2시간 동안 어레이를 CO2 인큐베이터로 되돌립니다. 녹음 소프트웨어를 시작하고 온도 아이콘을 클릭하여 다중 전극 어레이의 온도를 섭씨 37도로 설정합니다. 왼쪽 창 패널에서 스트림을 선택하고 뮤즈 아이콘을 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하여 획득 매개변수를 설정합니다. 그런 다음 처리 및 스파이크 감지기 추가를 선택하고 팝업 창에서 확인을 클릭합니다. STD의 Spike Detector 6이 파일 이름 아래에 나타납니다.
그런 다음 스파이크 디텍터를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 처리 및 버스트 디텍터 추가를 선택한 다음 팝업 창에서 확인을 클릭합니다. 버스트 감지기 ISI가 뮤즈 아이콘 아래에 나타납니다. 그런 다음 Burst Detector를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 Add Processing and Neural Statistics Compiler를 선택합니다. 팝업 창에서 파일 헤더, 집계된 웰 통계 및 동기화가 선택되어 있는지 확인합니다. 확인을 클릭합니다.
통계 컴파일러가 아래에 나타납니다. 화면 하단의 시계 아이콘을 클릭하고 설정 섹션의 정보를 5.1분마다 녹화하고 5분 동안 녹화하도록 변경합니다. 이것은 즉시 시작되고 한 번 실행됩니다. 인큐베이터에서 다중 전극 어레이를 회수한 후 기록 장치에 놓고 제자리에 고정합니다. 예약된 녹화 섹션에서 녹화 시작을 클릭하여 네트워크 활동 녹화를 시작합니다.
