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마취된 쥐를 정위 고정 장치에 고정합니다.
두피의 털을 제거하고 절개 부위를 소독합니다. 정중선 절개를 하고 피부를 수축시켜 두개골을 노출시킵니다.
드릴과의 간섭을 피하기 위해 결합 조직을 제거하십시오. 뇌간에 위치한 구조인 뇌교의 좌표를 결정하기 위한 기준점으로 브레그마를 식별합니다.
두개골에 구멍을 뚫습니다.
구멍을 통해 프로브를 삽입하여 뇌교에 도달합니다.
다음으로, 전극을 전기 자극기에 연결하고 뇌 자극을 위해 양극을 프로브에 부착하고 음극을 쥐의 귀에 부착하여 회로를 완성합니다.
뇌교에 전기 펄스를 전달하여 국소 조직 손상 또는 경색을 유도합니다.
자극 후 자극 효과를 안정화하기 위해 프로브를 잠시 제자리에 두십시오.
그런 다음 프로브를 천천히 제거하고 뼈 시멘트로 수술 부위를 밀봉합니다.
절개 부위를 봉합하고 회복 및 신경학적 분석을 위해 쥐를 케이지로 되돌립니다.
마취 직전에 가열 패드를 섭씨 37도로 예열하고 정위 고정 프레임의 홀더에 두개골 드릴을 부착합니다. 첫 번째 마취된 쥐의 페달 반사에 대한 반응 부족을 확인하고 가열 패드의 엎드린 자세로 쥐를 정위 고정 프레임에 장착합니다. 이어바를 외이도 위에 위치시켜 머리를 고정하고, 주사가 비뚤어지지 않도록 두개골이 수평으로 유지되도록 주의하십시오.
동물의 눈에 연고를 바르고 마이크로 면도기를 사용하여 두개골의 털을 제거합니다. 마커를 사용하여 두개골 정중선을 따라 양측 측안각선에서 후천문 뒤 0.5cm까지 3cm 선을 그리고 메스를 사용하여 표시된 선을 따라 정중선 절개를 합니다. 면봉을 사용하여 혈액을 제거하고 피부 피판의 양쪽에 수술용 테이프를 붙여 두개골을 노출시킵니다.
0.9% 염화나트륨에 적신 새 면봉을 사용하여 두개골에서 결합 조직을 부드럽게 제거하고 브레그마를 찾습니다. 끝이 가는 마커 펜을 사용하여 브레그마의 중심점을 원점으로 나타냅니다. 드릴을 전후 6mm, 내측 2mm에 배치합니다. 드릴을 사용하여 직경 1mm의 개두술을 조심스럽게 수행합니다. 그런 다음 드릴을 절연 피복이 있는 22게이지 프로브로 교체하고 팁은 피복의 근위 끝에서 2mm 위에 배치합니다.
칼집을 뇌에 7mm 삽입하고 탐침 상단이 뇌 표면 아래 9mm가 될 때까지 칼집을 따라 탐침을 전진시킵니다. 전극을 전기 자극기에 연결하고 양극을 프로브에 연결합니다. 그런 다음 음극을 쥐의 귀에 연결합니다. 그런 다음 전기 자극기를 켜고 단일 펄스 폭을 4,050밀리초, 전압을 50볼트, 전류를 4밀리암페어로 설정합니다.
뇌에서 장치를 제거하기 전에 자극 후 5분 동안 프로브를 제자리에 두십시오. 개두술을 뼈 시멘트로 덮고 시멘트를 건조시킨 후 4-0 폴리아미드 봉합사 필라멘트를 사용하여 상처를 봉합합니다. 서너 바늘을 꿰매고 나서 2-1-1 표준 수술용 매듭을 묶습니다. 그런 다음 쥐에게 250마이크로리터의 페니실린을 복강 주사하고 동물을 우리로 돌리기 전에 완전히 깨어날 때까지 15분마다 쥐를 모니터링합니다.
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