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신경과학
0 조회수 • 4:59 분 • July 8th, 2025
알츠하이머 환자에게서 채취한 뇌 조직의 피질 절편이 들어 있는 유리 슬라이드를 가져 가십시오. 조직에는 실질과 대뇌 모세혈관 내에 불용성 아밀로이드-베타 침착물이 포함되어 있습니다.
슬라이드를 희석된 알코올에 담가 지질과 염분을 제거합니다.
무수 알코올로 세척하여 조직을 탈수시킨 다음 고정액을 도포하여 조직 구조를 보존합니다.
슬라이드를 진공 청소기로 건조하여 수분을 제거합니다.
가습된 환경에서 포름산 증기로 처리하여 아밀로이드-베타 응집체를 더 작은 가용성 펩타이드로 분해합니다.
광학 스캐너를 사용하여 조직의 구조적 특징에 대한 이미지를 생성하여 이미징 질량 분석법의 데이터를 해석합니다.
시편 위에 매트릭스 용액을 분사합니다.
질량 분석기를 사용하여 매트릭스가 흡수하는 레이저를 적용하여 펩타이드를 이온화합니다. 그런 다음 검출기는 질량 대 전하 비율을 기반으로 식별합니다.
데이터를 분석하여 이미지를 생성하여 조직 실질과 대뇌 모세혈관에서 아밀로이드-베타 펩타이드의 분포를 밝
힙니다.조직 절편을 헹구려면 샘플을 40-100밀리리터의 70% 에탄올에 유리 염색병에 30초 동안 담가 내인성 지질과 무기염을 제거합니다. 텍스트 프로토콜에 나열된 세척 순서를 사용하여 샘플을 세척합니다. 그런 다음 샘플을 진공 상태에서 30분 동안 건조시킵니다.
이제 부검 뇌 조직에서 아밀로이드-베타 단백질의 더 나은 이온화를 위해 조직 절편을 포름산 증기로 처리합니다. 이렇게하려면 섭씨 60도의 오븐과 5 밀리리터의 100 % 포름산이 담긴 인큐베이션 유리 접시를 준비하십시오. 인큐베이션 유리 접시의 공기 습도를 포화 수준으로 유지하십시오.
포름산에 잠기지 않도록 하면서 조직 슬라이드를 배양 유리 접시에 넣고 6분 동안 처리합니다. 필름 스캐너, 젤 스캐너 또는 디지털 현미경을 사용하여 샘플의 광학 이미지를 촬영합니다. 실온에서 이 단계를 수행합니다.
샘플의 광학 이미지 정렬은 샘플 대상이 기기 내부에 배치될 때 필요합니다. 일반적으로 매트릭스 층 아래의 조직 섹션을 인식할 수 없습니다. 광학 이미지를 샘플과 연관시키려면 광학 이미지와 카메라 광학 장치의 매트릭스 레이어 아래에 모두 보이는 가이드 마크를 만듭니다. 가장 쉬운 방법은 광학 이미지를 촬영하기 전에 샘플 주변에 최소 3개의 수정액 마크를 발견하는 것입니다.
초음파 분무기로 매트릭스를 분사하려면 데시케이터에서 분무할 조직을 제거하고 챔버에 넣으십시오. 티슈가 센서 창을 덮고
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