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신경과학
0 조회수 • 2:56 분 • July 8th, 2025
마취된 성체 제브라피쉬로 시작하십시오.
생선을 실리콘 핀 홀더에 옮기고 합성 폴리머 층을 발라 눈을 윤활하십시오.
그런 다음 레이저 렌즈를 눈 앞에 배치하여 레이저 조준 빔을 망막에 집중시킵니다.
제브라피쉬의 눈에 레이저를 비추어 망막 손상을 유발합니다.
레이저는 열 손상과 망막 광수용체 세포의 사멸을 유도하여 며칠에 걸쳐 진행되어 망막 색소 상피에서 외부 망상층까지 확장되는 퇴행성 과정을 시작합니다.
이에 대한 반응으로 뮬러 신경아교세포(MG) 세포는 반응성 신경교증을 겪어 비대하고 증식하게 됩니다.
그런 다음 이 세포는 줄기 세포 전구세포로 역분화됩니다.
전구 세포는 점차적으로 손상 부위로 이동하고 미세 환경의 공간적, 시간적 단서에 의해 며칠에 걸쳐 성숙한 망막 세포 유형으로 분화하여 망막 구조의 재생을 촉진합니다.
트리카인 분말 400mg을 탱크 물 97.9밀리리터와 1몰 TBS 2.1밀리리터에 녹여 마취제 원액을 준비합니다. pH 9에서 1몰 트리스로 pH 7.0으로 조정합니다. 작업 용액을 만들려면 트리카인 원액을 탱크 물에 1-25로 희석하고 50밀리리터를 페트리 접시에 옮깁니다. 그런 다음 제브라피쉬가 움직이지 않고 외부 자극에 반응하지 않을 때까지 2-5분 동안 마취액에 넣습니다.
레이저 치료를 위해 각 물고기를 맞춤형 실리콘 핀 홀더에 손으로 옮깁니다.
적절한 마취는 동물의 안녕과 시술의 성공에 매우 중요합니다. 따라서 갓 준비한 트리카인 용액이 중추적인 역할을 하며 물 밖으로 나가는 시간은 10분을 초과해서는 안 됩니다.
532나노미터 다이오드 레이저의 출력 전력을 70밀리와트로, 펄스 지속 시간을 100밀리초로, 공중 직경을 50미크론으로 설정합니다. 그런 다음 2% 하이드록시프로필 메틸셀룰로오스 1-2방울을 눈에 바릅니다.
메틸셀을 눈에 바를 때 점성 용액이 아가미에 닿지 않도록 하십시오.
다음으로 2mm 안저 레이저 렌즈를 사용하여 레이저 조준 빔을 망막에 집중시킵니다. 왼쪽 눈의 시신경 주위에 4개의 레이저 스폿을 배치하고 치료되지 않은 오른쪽 눈을 내부 제어로 사용합니다.