신생아 저산소성-허혈성 뇌 손상의 마우스 모델 확립

마

취된 쥐 새끼를 해부 현미경으로 복부를 고정합니다.

목을 절개합니다.

지방 조직을 후퇴시켜 편측 우측 경동맥을 노출시킵니다.

동맥을 결찰하여 우뇌 반구로의 혈류를 제한하여 허혈 상태를 시뮬레이션합니다.

절개 부위를 닫고 강아지를 저산소 챔버로 옮깁니다.

강아지가 의식을 되찾으면 챔버를 닫고 산소 수준을 낮추어 저산소 상태를 설정합니다.

뇌의 혈액 공급과 산소 수치가 감소하면 흥분성 신경 전달 물질이 방출됩니다.

이러한 신경 전달 물질은 신경 과흥분성, 칼슘 유입, 신경 막, 세포 단백질 및 DNA에 대한 칼슘 의존성 손상을 유도하여 신경 사멸을 유발합니다.

이에 대한 반응으로 미세아교세포가 활성화되어 전염증성 사이토카인을 방출하여 뇌 손상을 악화시킵니다.

강아지가 일주일 동안 회복되고 성장하도록 하십시오.

강아지를 마취하고 복부를 아래로 향하게 한 후 두피를 절개합니다.

저산소성 허혈성 손상을 감지하기 위해 반투명 두개골을 통해 우반구의 뇌 병변을 시각화합니다.

최소 5마리의 P7 쥐 새끼를 마취한 후, 새끼를 복부가 위로 향하게 하여 해부 현미경 아래에 놓은 다음 알코올로 목을 청소합니다. 수술을 시작하려면 가위를 사용하여 목을 0.7mm 절개합니다. 그런 다음 편측 우측 경동맥이 노출될 때까지 겸자를 사용하여 지방 조직을 조심스럽게 제거합니다. 다음으로 5-0 봉합사를 사용하여 편측 우측 경동맥을 결찰합니다.

이제 목의 절개 부위를 5-0 나일론으로 봉합하고 절개 부위를 살균합니다. 그런 다음 뚜껑을 연 채 섭씨 37도의 저산소 챔버에서 약 한 시간 동안 강아지가 회복되도록 합니다. 회복을 위해 외과적으로 조작된 다른 마우스를 저산소 챔버에 넣습니다. 새끼가 모두 완전히 깨어나면 챔버 뚜껑을 닫고 가스 수준을 낮추어 저산소 상태를 설정합니다.

90분 동안 저산소증을 유지한 후 뇌 손상을 입은 새끼를 케이지로 돌려보냅니다. 일주일 후, 부상의 증거를 찾기 위해 이전과 같이 새끼들을 수술할 준비를 합니다. 두피를 절개하여 우반구 후외측 부위의 뇌 병변을 확인합니다. 반투명 두개골을 통해 피질 손상과 해마 손상의 증거를 살펴보고 새끼를 부상당한 대조군 또는 부처받지 않은 대조군으로 분류합니다. 확인 후 봉합사로 두피를 봉합하고 절개 부위를 살균합니다.