알츠하이머병 모델을 위한 아밀로이드-베타 단백질의 직접 입체성 뇌 주입

두개골이 노출된 마취된 마우스로 시작합니다. 마우스는 응집되기 쉬운 아밀로이드-베타 단백질로 미리 채워진 주사기가 포함된 정위 프레임에 고정됩니다.

단백질 주입 좌표를 결정하기 위한 핵심 기준점인 브레그마를 표시하십시오.

주사기를 움직여 브레그마를 만진 다음 람다를 터치하여 등쪽-복부 좌표를 결정하여 정확한 바늘 깊이를 보장합니다.

기억 처리에 중요한 치상회를 대상으로 미리 결정된 내측-외측 좌표 위로 주사기를 재배치합니다.

두개골 표면을 만지고 등쪽-복부 좌표가 한계 내에 있는지 확인하고 표시합니다. 반대쪽에서도 이 절차를 반복합니다.

표시된 내측-외측 좌표에서 드릴링하고 아밀로이드-베타 단백질을 치상회에 주입하고 역류를 방지하기 위해 유지합니다.

균일한 단백질 분산을 위해 반대쪽에 아밀로이드-베타 단백질을 뚫고 주입합니다.

마우스에서 이어바를 분리한 다음 절개 부위를 봉합합니다.

시간이 지남에 따라 아밀로이드-베타 단백질이 응집되어 치상회 뉴런을 저하시키고 기억 처리를 방해하여 알츠하이머병을 유발하는 플라크를 형성합니다.

메스로 두피의 정중선을 2-3mm 절개합니다. 곧고 가는 가위를 사용하여 절개선을 약 1.0cm로 확장하여 두개골의 시상 봉합사, 브레그마 및 람다를 노출시킵니다. 그런 다음 집게를 사용하여 피부를 분리합니다.

멸균 식염수에 적신 멸균 면봉으로 두개골을 청소하십시오. 그런 다음 깨끗하고 마른 면봉을 사용하여 두개골을 말립니다. 다음으로 브레그마에 점을 표시합니다. 바늘 끝이 브레그마의 점에 닿도록 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 해밀턴 주사기를 배치합니다. 그런 다음 DV 좌표를 기록합니다.

람다 포인트에 점을 표시합니다. 주사기를 람다 지점으로 뒤쪽으로 움직여 두개골의 AP 축이 수평인지 확인하십시오. 바늘 끝은 브레그마 지점과 마찬가지로 람다 지점에 닿아야 합니다. 그런 다음 DV 위치를 기록합니다. 브레그마 및 람다의 DV 좌표는 0.5mm 이내여야 합니다.

이제 바늘 끝을 브레그마 점으로 되돌립니다. 시작 AP 위치를 기록합니다. 그런 다음 시작 AP 좌표에서 2mm를 빼서 종료 AP 위치를 계산하고 주사기 바늘을 최종 AP 좌표로 재배치합니다.

다음으로 현재 ML 좌표를 기록합니다. 시작 ML 좌표에서 1.3mm를 더하거나 빼서 왼쪽 및 오른쪽 끝 ML 좌표를 계산하고 주사기 바늘을 끝 ML 좌표로 이동합니다. 바늘 끝을 양쪽 끝 ML 좌표의 두개골 표면에 대고 DV 좌표가 0.5