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신경 펩타이드와 열사멸 박테리아 보조제를 함유한 에멀젼을 마취된 마우스에 피하 주사하는 것으로 시작합니다.
피하 조직에서 보조제는 주요 조직적합성 복합체에서 신경 펩타이드를 처리하고 제시하는 항원 제시 세포 또는 APC를 유인합니다.
활성화된 APC는 림프절에 도달하여 순진한 T 세포와 상호 작용하여 자가반응성 T 세포로의 분화를 유도합니다.
이 T 세포는 순환하여 혈액뇌장벽(BBB)에 도달합니다.
다음으로 박테리아 유래 외독소를 복강 내 주입합니다.
외독소는 BBB에 도달하여 투과성을 증가시키고 T 세포가 중추신경계(CNS)로 침투할 수 있도록 합니다.
CNS에서 T 세포는 신경 펩타이드를 제시하는 상주 APC와 상호 작용하여 추가 면역 세포 침윤을 유도하는 사이토카인 방출을 촉진합니다.
면역 세포는 전염증성 사이토카인을 방출하여 미엘린 손상을 일으킵니다.
또한 B 세포는 T 세포와 상호 작용하여 미엘린을 더욱 손상시키는 자가항체를 분비하여 실험적 자가면역 뇌척수염(EAE)을 확립합니다.
이 절차에서 PTX를 1x PBS에 밀리리터당 2마이크로그램으로 녹이고 잘 혼합합니다. 그런 다음 짧은 이소플루란 마취 동안 꼬리 기저부에 두 번 100마이크로리터의 PLP/CFA를 마우스에 피하 주입합니다. 등 위쪽이나 목 피부의 면역 반응이 머리와 척수의 영상을 방해하므로 목 뒤쪽에 주사하지 마십시오.
예방접종 1-2시간 후, 100마이크로리터의 PTX를 마우스에 복강 내로 주입합니다.
그런 다음 예방접종 24시간 후, 마우스에게 100마이크로리터의 PTX를 다시 주입합니다. 대조군 마우스의 경우, PLP가 없는 100마이크로리터의 CFA를 꼬리 기저부에 두 번 주입합니다.
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