실험적 자가면역 신경염 마우스 모델에서 운동 기능 평가

0 views • 4:18 min • July 8th, 2025

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런닝머신에 마우스를 올려 달리는 동작을 기록하고 신체 움직임을 제어하는 능력을 나타내는 운동 기능을 평가합니다.

검사 후 마취된 마우스의 복강에 백일해 독소를 주입하여 혈액-신경 장벽을 약화시킵니다.

다음으로, 쥐의 견갑골 사이의 털을 제거하고 해당 부위를 소독한 다음 보조제와 함께 미엘린 모방 펩타이드를 피하 조직에 주입합니다.

최적의 반응을 위해 두 주입을 모두 반복합니다.

펩타이드는 항원 제시 세포를 자극하여 림프절로 이동하여 자가반응성 T 세포를 생성합니다.

이 T 세포는 혈류로 들어가 손상된 혈액 신경 장벽을 통과하고 말초 신경을 표적으로 삼아 사이토카인을 방출합니다.

이것은 대식세포와 B 세포를 끌어당겨 수초를 분해하는 이펙터 분자를 방출합니다.

미엘린의 분해는 신경 신호 전달을 손상시키고 실험적 자가면역 신경염 또는 EAN의 발병을 손상시킵니다.

마지막으로 런닝머신 테스트를 반복합니다. 마우스는 달리기와 사지 움직임 조정에 어려움을 보이며 이는 운동 기능 장애를 나타냅니다.

질병 유도 3일 전에 운동 기능 평가 장치를 켜고 조명 버튼을 켭니다. 마우스를 집어 들고 빨간색 식용 염료가 담긴 용기 위에 내립니다. 마우스를 보행실에 넣고 런닝머신 속도를 초당 15센티미터로 설정합니다. 런닝머신을 켜고 "기록"을 클릭하여 보행 기능 이미징 시스템을 사용하여 36초 동안 마우스의 달리기 동작을 캡처합니다.

36초 후 녹화와 런닝머신을 중지하고 연습 달리기의 연습 달리기 비디오 파일을 지정된 폴더에 저장합니다.

첫 번째 예방접종 하루 전, 301/2 게이지 바늘이 장착된 0.5밀리리터 주사기를 사용하여 250마이크로리터의 마우스 등장성 PBS IP에 백일해 독소 밀리리터당 1.6마이크로그램을 투여하여 마취된 6-8주 수컷 C57 블랙 6 마우스에게 투여합니다.

다음날, 0.9% 식염수에 같은 양의 갓 준비된 펩타이드 용액과 결 밀리리터당 20mg을 비드 비터의 완전한 프로인트 보조제에 혼합하고 실온에서 1분 동안 최대 속도로 용액을 혼합합니다.

23게이지 바늘이 장착된 주사기에 접종물을 넣고 주사기 샤프트 내의 공기를 배출하기 전에 주사기를 뒤집고 흔듭니다.

접종물을 전달하기 전에 견갑골 사이의 정중선 바로 옆쪽의 털을 제거하고 노출된 피부를 70% 에탄올로 소독하십시오.

그런 다음 한 쌍의 Addison 겸자를 사용하여 피부를 잡고 피하 주사를 통해 백일해 독소 주사 마우스에게 50마이크로리터의 용액을 전달합니다.

다음날 아침, 방금 시연한 대로 250마이크로리터의 PBS IP에 밀리리터당 1.2마이크로그램의 백일해 독소를 전달한 다음 48시간 후에 백일해 독소 IP를 밀리리터당 1.2마이크로그램을 추가로 주입합니다.

3일 후, 3차 백일해 주사 후, 이전과 동일한 주사 부위에 새로 준비된 접종물 50마이크로리터를 추가로 투여하고, 실험이 끝날 때까지 일주일에 두 번 동물의 임상 점수와 운동 기능을 모니터링한다.

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Last updated: 18 July 2026