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신경과학
0 조회수 • 1:59 분 • July 8th, 2025
혈관 안정성에 필수적인 CCM2 유전자를 운반하는 유전자 변형 쥐 새끼부터 시작하십시오.
이 유전자 옆에는 두 개의 loxP 부위가 있습니다. 새끼의 내피 세포는 또한 에스트로겐 수용체 또는 ER에 융합된 Cre 재조합효소를 발현합니다.
강아지에게 4-하이드록시타목시펜 또는 4-HT를 위내주사합니다.
4-HT는 내피 세포를 통해 확산되고 Cre-ER 융합 단백질의 에스트로겐 수용체 부분에 결합합니다.
이 결합은 내피 세포의 핵으로 들어가 loxP 부위에 결합하는 Cre 재조합효소를 활성화하는 형태 변화를 유발합니다.
이것은 loxP 부위 사이의 재조합 사건을 촉진하여 루프를 형성하고 CCM2 유전자 세그먼트를 절제합니다.
CCM2의 손실은 내피 세포의 무결성을 방해하여 혈관벽의 안정성을 손상시킵니다.
이로 인해 깨지기 쉽고 누출되기 쉬운 대뇌 해면체 기형 또는 CCM으로 알려진 부어오른 비정상적인 혈관 구조가 발생합니다.
4-HT를 100% 에탄올에 밀리리터당 10mg의 농도로 용해시키는 것부터 시작합니다. 30마이크로리터 분취량을 준비한 다음 섭씨 영하 80도에서 보관합니다. 사용 당일 옥수수 기름에 분취된 4-HT를 밀리리터당 0.5mg으로 희석하십시오. 그런 다음 인슐린 주사기를 사용하여 P1 신생아 새끼에게 50마이크로리터의 4-HT를 위내로 주사하여 실험적 CCM 병변을 유도합니다.