Triggering and Monitoring heat-induced seizure in a Transgenic Mouse 모델

0 조회수 • 4:03 분 • July 8th, 2025

억제성 중간 뉴런에서 기능 장애 나트륨 채널을 유발하는 유전자 돌연변이를 운반하는 마취된 형질전환 성체 마우스를 예로 들어 보겠습니다.

윤활유가 도포된 직장 탐침을 고정하여 체온을 모니터링합니다.

체온이 안정될 때까지 마우스를 회복 케이지에 넣습니다.

그런 다음 동물을 예열된 가열 챔버로 옮기고 비디오 녹화를 시작합니다.

마우스 체온이 점진적으로 상승하는 것을 모니터링하면서 정기적으로 챔버의 온도를 높입니다.

체온이 상승함에 따라 나트륨 채널의 기능 장애가 악화되어 억제성 신경 전달 물질 방출이 감소합니다.

이러한 감소된 방출은 신경 흥분과 억제 사이의 균형을 방해하여 신경 과흥분성과 발작을 유발합니다.

발작 중 체온을 기록하고 행동 특성을 기록하십시오.

이제 체온이 정상화될 때까지 마우스를 냉각 패드 위에 놓습니다.

마지막으로 직장 탐침을 제거하고 마우스가 회복되도록 합니다.

전원 켜기 버튼으로 마우스 열 챔버를 켜고 가열 켜기 버튼을 눌러 시작합니다. 디지털 온도 컨트롤러의 키패드를 사용하여 가열 챔버의 온도를 섭씨 50도로 설정합니다. 열 챔버 바닥에 속대 침구를 깔아주세요.

열 챔버 앞에 비디오 녹화 카메라를 장착합니다. 직경 140mm의 페트리 접시에 두꺼운 티슈 페이퍼를 깔고 얼음 위에 올려 냉각 패드 역할을 합니다. 스크리닝 분석을 위해 마우스의 체중이 15g 이상인지 확인하십시오. 절차를 시작하기 전에 마우스가 발가락 꼬집기로 완전히 마취되었는지 확인하십시오.

직장 온도 프로브의 금속 끝에 윤활제를 바르고 마우스에 부드럽게 삽입합니다. 직장 탐침을 테이프로 마우스 꼬리에 고정합니다. 속대 침구가 늘어선 새 회복 케이지에 마우스를 넣습니다. 타이머를 시작하고 마우스가 마취에서 완전히 회복되고 온도가 섭씨 35도에서 36도에서 안정될 때까지 심부 체온을 모니터링하면서 5분 동안 마우스를 관찰합니다.

5분이 지나면 마우스의 체온을 0분의 초기 체온으로 기록합니다. 마우스를 예열된 마우스 가열 챔버의 바닥으로 빠르게 옮겨 실험 시험을 시작합니다. 예열된 마우스 챔버에 마우스를 넣은 후 카메라와 스톱워치를 시작합니다.

마우스의 체온이 분당 섭씨 0.25도에서 0.5도의 속도로 증가하도록 일정한 간격으로 가열 챔버의 온도를 높입니다. 실험 기간 동안 1분 간격으로 마우스의 체온 기록을 시작합니다. 9.5분에 열실의 온도를 섭씨 55도로 설정하여 10분까지 열실의 온도를 섭씨 55도로 안정시킵니다.

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