쥐 척수 뉴런의 탈수초화(Demyelination and Remyelination of Mouse Spinal Cord Neurons)

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취된 마우스를 정위 프레임에 배치하고 척수 영역을 노출시키는 절개로 시작합니다.

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제인 리솔레시틴이 들어 있는 주사기를 가져 가십시오. 노출된 부위 위에 놓고 정중선의 한쪽을 만집니다.

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수의 백질에 리솔레시틴을 주입하여 수초가 있는 축삭이 있는 뉴런을 표적으로 삼아 더 빠른 신호 전달을 촉진합니다.

역류를 방지하기 위해 주사기를 잠시 제자리에 두었다가 제거하십시오.

절개 부위를 봉합하고 감염을 방지하기 위해 소독제를 바르고 마우스가 회복될 수 있도록 합니다.

주입된 리솔레시틴은 뉴런 주변의 수초를 방해하여 축삭 신호 전달을 손상시킵니다.

이 과정은 또한 염증을 유발하여 면역 세포를 모집하여 미엘린 파편을 제거하여 신경병리학적 상태인 축삭의 국소 탈수초화를 유발합니다.

시간이 지남에 따라 희소돌기아교세포 전구체 세포는 이 부위로 이동하여 희소돌기아교세포로 분화합니다.

나중에 이러한 희소돌기아교세포는 탈수초화된 뉴런 주변의 수초를 재생하고 점차적으로 신호 전달을 복원합니다.

척추의 곡률을 과장하기 위해 동물을 등쪽이 위로 향하게 하고 접은 종이 타월로 중앙 부분을 높인 정위 프레임으로 이동합니다. 그런 다음 톱니로 머리를 고정합니다.amps, 팔과 꼬리는 수술용 테이프로 고정합니다. 안정화 이어 바는 필요하지 않습니다.

이제 메스를 사용하여 귀 바로 아래에서 시작하여 꼬리 방향으로 절단하여 3cm 정중선 절개를 합니다. 그런 다음 두 개의 큰 지방 구조 사이의 칸막이를 찾아 양손에 미세한 집게를 사용하여 이들을 분리합니다. 견인기를 펼쳐 수술 부위를 엽니다.

수술용 현미경으로 C57 블랙 6 마우스 계통의 특징인 T2 척추의 두드러진 뼈 성장을 찾습니다. 척추뼈를 보려면 닫힌 스프링 가위로 오버레이된 근육 조직을 뭉툭하게 해부하십시오. 그런 다음 T3과 T4의 단단한 표면을 느껴 적절한 해부학적 위치를 확인합니다.

이제 T3과 T4 사이의 결합 조직에 얕은 측면 절단을 합니다. 너무 깊은 상처는 코드를 뚫고 손상시킬 수 있으니 주의하세요. 약간의 출혈은 흔하며 스펀지 창으로 제거할 수 있습니다. 척수는 두꺼운 경막층으로 덮여 있으며 이 수막층이 아직 절단되지 않은 경우 볼 수 있습니다.

경막이 손상되지 않은 경우 32게이지 금속 바늘로 측면으로 부드럽게 긁어 조심스럽게 제거합니다. 두껍지 않고 보기 어려운 나머지 밑에 있는 수막을 뚫지 마십시오. 지주막에서 뇌척수액이 새어 나오면 스펀지 창으로 제거하십시오. 모