방사형 운동 분석법을 사용한 예쁜꼬마선충 모델의 운동 손상 평가

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신경과학

0 조회수 • 2:39 분 • July 8th, 2025

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선충 성장 배지에 균일한 분포의 벌레 먹이를 포함하는 페트리 접시를 취하십시오.

각 플레이트를 뒤집고 중앙을 표시합니다.

현미경을 사용하여 Caenorhabditis elegans 벌레를 중앙에 표시된 지점에 도입합니다.

그런 다음 나머지 접시에 나이가 맞는 벌레를 도입합니다.

이 벌레는 인간 RNA 결합 단백질의 야생형 또는 돌연변이 형태를 발현하며, 이는 신경 세포질에 독성 응집체를 형성하고 신경 사멸을 초래합니다.

이로 인해 근육 움직임을 제어하는 벌레의 능력이 감소하여 운동 기능이 손상됩니다.

벌레가 일정 기간 동안 크롤링되도록 합니다.

현미경을 사용하여 각 벌레의 최종 위치를 표시합니다.

웜이 중앙 지점에서 최종 위치까지 이동한 반경 거리를 측정합니다.

대조군과 비교하여 낮은 수준의 야생형 단백질을 발현하는 벌레는 경미한 운동 장애를 나타내고, 높은 수준의 야생형 단백질을 발현하는 벌레는 중등도의 손상을 나타내며, 돌연변이 단백질을 가진 벌레는 심각한 장애를 나타냅니다.

NGM 분석 플레이트를 거꾸로 뒤집고 분석할 C. elegans 균주에 대한 식별자로 바닥에 라벨을 붙입니다. 거꾸로 된 접시 중앙에 마커로 작은 점을 만듭니다. 해부 현미경으로 작업하는 동안 벌레를 분석 플레이트의 중앙으로 옮기고 타이머를 30분으로 설정합니다. 뚜껑을 접시에 다시 덮고 따로 보관하십시오. 모든 균주가 지정된 분석 플레이트에 있을 때까지 웜을 계속 옮깁니다.

30분 후, 뚜껑을 제거하고 해부 현미경 아래에 플레이트를 뒤집어 놓아 첫 번째 플레이트에 점수를 매기기 시작합니다. 한천을 통해 모든 벌레가 보일 때까지 현미경 초점을 조정합니다. 중심점에서 다른 색상의 펠트 펜을 사용하여 각 웜의 위치에 작은 점을 놓습니다.

일부 벌레가 접시에 닿을 수 있으므로 접시의 가장자리를 확인하십시오. 또한 중심점에서 움직이지 않은 웜의 수를 세고 기록합니다. 각 웜의 중심점에서 최종 위치 표시까지의 거리를 측정하고 눈금자를 사용하여 거리를 기록합니다. 첫 번째 웜 포인트는 대시로 표시됩니다. 플레이트를 시계 방향으로 회전시켜 각 도트의 길이 데이터를 연속적으로 기록합니다.

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마지막 업데이트: 15 8월 2026