초기 단계의 추간판 질환을 시뮬레이션하기 위한 장기 배양 모델 생성

소 꼬리에서 척추뼈 사이에 위치한 쿠션 모양의 구조인 추간판(IVD)을 가져갑니다.

수직으로 배치하고 전염증성 사이토카인인 재조합 TNF-α를 젤 모양의 코어인 수핵(NP)에 주입합니다.

주사기를 반쯤 빼내고 플런저를 당겨 진공을 만들어 TNF-α 역류를 방지합니다. 그런 다음 주사기를 제거합니다.

IVD를 배지가 들어 있는 바이오리액터 챔버에 넣고 매일 강한 압력 부하를 가합니다.

TNF-α는 NP 세포의 수용체에 결합하여 신호 전달 캐스케이드를 유발합니다.

이것은 세포 단백질을 분해하고 세포사멸을 유도하는 개시자 및 집행자 카스파제를 활성화합니다.

TNF-α는 또한 염증 유전자 발현을 유도하는 전사 인자 NF-κB를 활성화하여 IVD의 세포외 기질을 분해하는 효소를 방출합니다.

또한 강한 압력 부하로 인해 기계적 응력이 발생하여 IVD의 성능이 더욱 저하됩니다.

이것은 치료되지 않은 대조군에 비해 IVD의 높이를 감소시켜 초기 단계 IVD 질병의 퇴행성 및 전염증성 모델을 확립합니다.

첫째 날에 첫 번째 동적 로딩 주기가 끝난 후 IVD를 페트리 접시에 수직 위치로 직접 넣고 핀셋으로 안정화합니다. 30게이지 인슐린 바늘로 재조합 TNF 알파를 분당 약 70마이크로리터의 속도로 병리학적 그룹의 IVD에 천천히 주입합니다. 주입 후 주사기를 반쯤 뒤로 당기고 플런저를 당겨 주입된 용액이 누출되는 것을 방지하는 진공을 만듭니다. 그런 다음 IVD에서 주사기를 완전히 제거합니다.