알츠하이머병 모델링을 위한 아밀로이드-베타 방출 고분자 마이크로비즈 제작

0 조회수3:08 • July 8th, 2025

체 적합성 폴리머와 혼합된 신경독성 아밀로이드-베타를 분비하는 세포의 현탁액을 섭취하십시오.

현탁액이 있는 주사기를 마이크로비드 제조 장치에 부착한 다음 연속적인 액체 흐름으로 밀어 넣습니다.

장치의 진동 주파수는 스트림을 균일한 미크론 크기의 물방울로 나눕니다.

이 물방울은 정전기장을 통과하고 균일한 전하를 획득하여 서로를 밀어내어 합병을 방지합니다.

그런 다음 물방울은 칼슘 이온이 포함된 겔화 수조로 떨어집니다. 이온은 폴리머를 가교하여 세포를 구형 마이크로비드로 캡슐화합니다.

비드를 배양하여 겔화를 완료한 다음 필터에 수집합니다.

필터를 튜브 위로 뒤집고 배양 배지를 추가하여 비드를 튜브에 세척한 다음 현탁액을 배지가 들어 있는 플라스크로 옮깁니다.

폴리머 매트릭스는 알츠하이머병 뇌에서 볼 수 있는 만성 축적을 모방하여 아밀로이드-베타의 느린 방출을 가능하게 하는 동시에 세포 증식을 지원하기 위해 영양분에 접근할 수 있도록 합니다.

마이크로비드를 제조하려면 20밀리리터 주사기에 5밀리리터의 세포 알지네이트 현탁액을 로드하고 주사기를 캡슐화기에 부착합니다. 캡슐화기를 시작하려면 흐름을 활성화하여 피더를 통해 세포 알지네이트 현탁액을 밀어내고 물방울 흐름이 노즐을 통해 압출됩니다. 초기의 균일하지 않은 흐름을 피하기 위해 폐기물 비커에 처음 1밀리리터를 수집하십시오. 그런 다음 나머지 4밀리리터를 계속 실행하여 물방울이 염화칼슘 겔화 수조에 떨어지도록 합니다.

겔화 욕조와 접촉하면 물방울의 알지네이트가 겔화 욕조의 칼슘 이온과 즉시 가교되어 구형 마이크로비드를 형성합니다. 1분 후, 마그네틱 플랫폼에서 겔화 비커를 제거하고 마이크로비드를 교반하지 않고 4분 동안 더 쉬게 하여 실온에서 겔화를 완료합니다. 마이크로비드를 회수하려면 먼저 멸균 핀셋을 사용하여 큰 알지네이트 파편이나 인공물을 제거합니다. 플라스틱 피펫의 끝을 절단한 후 이를 사용하여 겔화 수조에서 폐기물 비커 위에 고정된 74마이크로미터 메쉬 필터로 마이크로비드를 옮깁니다.

성공을 보장하기 위해 우리는 항상 마이크로비드가 손상되지 않도록 플라스틱 피펫의 끝을 자르고 캡슐화 후 한 용기에서 다른 용기로 비드를 옮길 때마다 이 작업을 수행합니다.

메쉬 필터를 원심분리기 튜브 위로 뒤집습니다. 그 위에 적절한 배양 배지를 피펫팅하여 튜브 아래로 비드를 씻어내고 해당 배지에서 5분 동안 평형을 유지합니다. 그런 다음 배양 및 추가 실험을 위해 이전에 적절한 배지로 채워진 플라스크로 옮깁니다.

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마지막 업데이트: 22 8월 2026