배근 신경절 주입 및 등뿌리 크러시 손상을 사용하여 쥐의 감각 축삭 재생 모델링

마취된 쥐부터 시작하십시오.

경추 C2와 흉추 T2 사이에 정중선 피부 절개를 합니다.

다음으로 백색 섬유 조직 정중선을 따라 절개하고 첫 번째 근육층을 후퇴시킵니다.

두 번째 근육층의 정중선에서 얇은 막 조직을 해부한 다음 줄무늬 세로 근육을 후퇴시킵니다.

마지막으로 세 번째 근육층을 절개하여 척추를 노출시킵니다.

왼쪽 C4에서 T1 척추뼈 위에 있는 추판과 척추경을 제거하여 C5에서 C8 후근 신경절 또는 DRG를 드러냅니다.

재조합 아데노 관련 바이러스 현탁액을 DRG에 주입합니다.

이 바이러스는 축삭 재생을 돕는 성장 촉진 단백질을 암호화합니다.

겸자를 사용하여 C5에서 C8 등근을 부수어 DRG에서 척수까지의 축삭 연결을 절단하여 제어된 축삭 손상을 만듭니다.

이 모델은 바이러스 매개 축삭 재생을 연구할 준비가 되었습니다.

피부 위의 눈에 띄는 C2 및 T2 극돌기를 찾아 수술을 시작합니다. 그런 다음 10번 메스를 사용하여 C2와 T2 극돌기 사이에 피부를 절개합니다. 피부가 열리면 젤리 같은 질감을 가진 근육의 첫 번째 층에 흰색 섬유 조직 정중선이 보여야 합니다.

흰색 정중선을 따라 근육의 첫 번째 층에 비슷한 크기의 절개를 합니다. 눈에 띄는 T2 극돌기 근처에 주요 혈관이 있으므로 넘어가지 마십시오. 하나는 주둥이에 배치되고 다른 하나는 꼬리쪽에 배치된 두 개의 견인기를 사용하여 근육의 첫 번째 층을 후퇴시킵니다.

이제

줄무늬가 있는 근육의 두 번째 층이 보여야 합니다. 얇은 막 조직으로 연결된 두 개의 세로 근육을 관찰할 수 있는 근육의 두 번째 층의 정중선을 찾습니다. 그런 다음 마이크로 가위를 사용하여 막 조직을 해부하고 두 개의 세로 근육을 분리합니다.

견인기를 조정하여 척추를 덮고 있는 얇은 주둥이의 세 번째 층을 노출시킵니다. 극돌기는 근육의 세 번째 층을 한 쌍의 집게로 가볍게 만지면 느낄 수 있습니다. 마이크로 가위를 사용하여 근육의 세 번째 층에 작은 절개를 합니다. 그리고 큐렛이나 메스를 사용하여 뼈의 근육을 옆으로 부드럽게 긁어내어 척추뼈를 선명하게 노출시킵니다.

왼쪽 C5를 C8 DRG에 노출시키려면 한 쌍의 미세한 롱저를 사용하여 박판과 척추경의 일부를 조심스럽게 제거하여 C4에서 T1 척추에 왼쪽 반절제술을 수행합니다. 주사를 위해 충분한 DRG가 노출되면 맞춤형 33게이지 무딘 바늘이 장착된 바이러스로 채워진 마이크로리터 주사기를 정위 주사기 홀더 위에 놓아 주사기를 준비합니다. 다음으로, 30게이지 경사진 바늘을 사용하여 각 표적 DRG에 작은 표면 구멍을 만들어 주사 바늘 삽입을 지원합니다. 정위 좌표를 부드럽게 조정하여 33게이지 바늘을 DRG 중앙에 삽입합니다.

이상적으로는 주입된 용액이 DRG 전체에 균일하게 확산되도록 바늘을 DRG의 중앙에 배치해야 합니다.

바늘이 삽입되면 주입 주사기 펌프를 사용하여 각 DRG에 1마이크로리터의 바이러스를 주입합니다. 주입하는 동안 바이러스 용액에 유색 염료가 포함되어 있으면 DRG의 색상이 천천히 변합니다. 바늘을 과도하게 삽입하면 DRG의 복부 쪽에서 유체가 누출될 수 있으므로 사용하지 마십시오.

주사 중 누출이 발생하면 즉시 바늘의 위치를 조정하십시오. 주사 종료 후 3분 후 주사 바늘을 빼십시오. 동시 C5에서 C8 등근 압착 손상을 수행하려면 한 쌍의 끝이 가는 겸자를 사용하여 각 뿌리를 10초 동안 세 번 부수십시오. 집게의 끝을 완전히 반대합니다. 조직의 흰색 선이 압착 부위에 나타나야 합니다.