쥐에서 신경 활동의 억제 및 전기생리학을 사용한 검출

두개골이 노출된 정위 고정 프레임에 고정된 마취된 쥐부터 시작합니다.

해부학적 랜드마크인 브레그마와 람다를 사용하여 시각 정보 처리를 담당하는 심부 뇌 구조인 상구를 찾습니다.

드릴을 뚫어 뼈 플랩을 만들고 제거한 다음 완충액을 적용하여 노출된 뇌에 수분을 유지합니다.

마이크로 주사기에 전극이 부착된 마이크로피펫으로 구성된 주사 장치 어셈블리를 배치합니다.

마이크로피펫에는 신경 흥분성을 억제하는 억제성 신경 전달 물질 용액이 포함되어 있으며 전극은 동시에 신경 활동을 기록합니다.

주사기를 상부 구간으로 내리고 탈수를 방지하기 위해 녹은 한천으로 노출된 표면을 덮습니다.

현재 빛이 눈에 번쩍이며 뉴런을 자극하고 동기화된 활동 전위를 불러일으

킵니다.

수용체에 결합하여 염화물 이온 유입을 유발하는 신경 전달 물질을 주입합니다.

이 유입은 막 전위를 과분극시켜 활동 전위를 억제합니다.

시간이 지남에 따라 신경 전달 물질 농도가 감소함에 따라 신경 활동이 회복됩니다.

 

기록 주입 피펫을 준비하려면 먼저 외경이 1mm인 7cm 모세관을 당깁니다. 경찰 수직 모델 720 또는 이와 유사한 장치의 경우 히터를 18로 설정하고 솔레노이드를 1로 설정합니다. 그런 다음 장갑을 끼고 팁을 수동으로 부러서 구멍을 만들고 현미경으로 내경이 30-40마이크로미터인지 확인합니다. 뷰파인더의 눈금자로 측정합니다. 0.3에서 0.6메가옴의 상대적으로 낮은 임피던스를 생성합니다.

그런 다음 테이퍼되지 않은 끝에서 약 7cm 길이의 피펫에 은선을 삽입하고 피펫에서 1-2cm를 매달아 둡니다. 이 여분의 와이어를 모세관에 직교로 구부립니다. 그런 다음 30게이지 피하 주사 바늘을 사용하여 샤프트에 유연한 플라스틱 접착제를 바릅니다. 그런 다음 바늘을 가능한 한 멀리 피펫에 천천히 삽입합니다.

접착제를 더 추가하여 피펫과 바늘 사이의 접합부에 밀봉을 만듭니다. 피펫 팁이 위로 향하게 하여 어셈블리를 약 12시간 동안 건조시킵니다. 쥐를 마취하고 정위 프레임에 넣은 후 안과 연고를 바르고 머리를 깨끗하게 면도하십시오.

국소마취제를 바르고 마취의 수술 계획을 확인한 후 10번 메스날을 사용하여 정중을 따라 두피를 절개합니다. 이렇게 하면 관상 봉합사와 시상 봉합사가 노출됩니다. 그런 다음 수술용 주걱을 사용하여 람다 및 브레그마 해부학적 참조를 식별합니다.

이러한 랜드마크가 동일한 수평면에서 수평이 되도록 머리의 위치를 조정합니다. 그런 다음 브레그마에 유리관과 같은 미세한