생체 내 이미징을 위한 마우스의 척수 창 이식

외과적으로 노출된 척수가 있는 마취된 마우스로 시작합니다.

척수 위에 붕규산 커버 유리를 놓아 이미징을 위한 광학 창을 만듭니다.

따뜻한 아가로스를 커버 유리의 가장자리에 바르면 모세관 작용이 유리 아래로 끌어당겨 조직 수분을 유지합니다.

척수 창을 안정화하기 위해 부위를 둘러싼 온전한 뼈 구조에 조직 접착제를 도입합니다.

접착제 층 위에 촉진제와 혼합된 치과용 시멘트를 도포한 다음 시멘트가 경화되기 전에 커버 유리 위에 3D 프린팅 백플레이트를 배치합니다.

백플레이트 접착력을 강화하기 위해 시멘트를 얇게 추가로 도포합니다.

시멘트가 건조된 후 호흡과 심장 박동으로 인한 움직임 아티팩트를 최소화하기 위해 백플레이트를 갈래 백플레이트 홀더에 고정합니다.

식염수를 추가하여 누출 여부를 확인하고 필요한 경우 추가 시멘트로 밀봉하십시오.

마지막으로 이미징을 위해 마우스와 플랫폼을 2 광자 현미경으로 옮깁니다.

커버 유리 이식의 경우 노출된 코드에 3mm 붕규산 커버 유리를 부드럽게 도포합니다. 작은 주걱을 사용하여 섭씨 39도, 예열된 2% 아가로스를 유리 가장자리에 바르고 모세관 작용으로 아가로스를 커버 유리 표면 아래로 끌어당깁니다. 흉부 수준 11 및 13 척추 척추에서 온전한 인접 척추의 노출된 뼈 관절 돌기에 조직 접착제를 도포합니다.

추궁 절제술 부위 주변, 인접한 힘줄 및 가로 돌기 위에 링에 추가 조직 접착제를 도포합니다. 그런 다음 새 주걱을 사용하여 촉진제와 혼합된 치과용 시멘트를 조직 접착층에 도포하고 커버 유리창 중앙에 수술 부위에 백플레이트를 놓습니다.

치과용 시멘트를 여러 겹 얇게 도포하면 백플레이트 접착력이 더 강해지지만 치과용 시멘트가 마르기 시작하기 전에 백플레이트를 빠르게 배치해야 합니다.

치과용 시멘트를 10분 동안 경화시킨 후 내부 베이스와 백플레이트 밑면을 추가 접착제로 채웁니다.

치과용 시멘트를 얇은 층으로 도포하면 시멘트가 커버 유리와 아가로스로 퍼질 위험을 줄이는 데 도움이 될 수 있으며, 이로 인해 전체 프로토콜이 손상될 수 있습니다.

치과용 시멘트가 건조되면 갈래 백 플레이트 홀더를 창 위의 적절한 위치에 적용하고 백 플레이트를 백 플레이트 홀더에 나사로 고정합니다. 그런 다음 백플레이트에 식염수를 바르고 누출 여부를 테스트합니다. 그런 다음 동물과 수술 플랫폼을 2광자 현미경의 광학 테이블로 옮겨 덮개 유리창을 통해 이미징할 수 있습니다.