0 조회수 • 3:06 분 • August 7th, 2025
신경 영양 단백질인 신경 성장 인자 또는 NGF와 양전하를 띤 운반체 단백질인 프로타민이 들어 있는 미세 원심분리기 튜브를 가져갑니다.
캡슐화를 촉진하고 분해를 방지하는 정전기 상호 작용을 통한 NGF와의 프로타민 복합체.
유리 바이알에 나노입자 형성을 위해 고밀도 지단백질 또는 HDL의 지질 조성을 모방하는 지질 부형제를 함유한 에탄올을 첨가합니다.
균일한 분산을 위해 추가 에탄올과 혼합합니다. 질소 아래에서 에탄올을 증발시켜 얇은 지질막을 형성합니다.
초순수를 첨가하고 고속으로 균질화하여 HDL을 모방하는 프로토타입 나노입자로 자체 조립할 수 있습니다.
NGF-프로타민 복합체를 나노입자에 도입하고 교반하면서 배양하여 생체 활성을 보존하면서 NGF-프로타민의 캡슐화를 촉진합니다.
나노입자 안정화를 위해 현탁액을 냉각시킨 다음 HDL의 1차 구조 단백질인 아포지단백 A-I를 첨가하고 계속 저어주어 단백질을 나노입자 구조에 통합합니다.
이러한 NGF가 탑재된 HDL 모방 나노입자는 이제 추가 연구를 위한 준비가 되었습니다.
시작하려면 10마이크로리터의 NGF와 10마이크로리터의 프로타민 USP를 1.5밀리리터 미세 원심분리기 튜브에 혼합하고 실온에서 10분 동안 그대로 두어 복합체를 형성합니다. 다음으로, 59마이크로리터의 포스파티딜콜린과 11마이크로리터의 스핑고미엘린을 유리 바이알에 추가합니다.
또한 포스파티딜세린 4마이크로리터, 콜레스테롤 올리에이트 15마이크로리터, 토코페릴 폴리에틸렌 글리콜 숙시네이트 45마이크로리터를 추가합니다. 약 5분 동안 부드러운 질소 흐름 아래에서 에탄올을 혼합하고 증발시킵니다. 모든 부형제는 유리병 바닥에 기름지고 얇은 막을 형성해야 합니다.
바이알에 초순수 1밀리리터를 넣고 실온에서 5분 동안 9,500RPM으로 균질화하여 프로토타입 나노입자 또는 NP를 형성합니다. 그런 다음 준비된 복합체를 프로토타입 NP에 첨가합니다. 유리 바이알에 작은 교반 막대를 사용하여 현탁액을 섭씨 37도에서 30분 동안 교반하면서 배양합니다.
실온에서 30분 더 저어주어 MP를 식힙니다. 냉각 후 106마이크로리터의 아포지단백 A-I를 첨가하고 실온에서 밤새 저어주어 NP를 모방하는 최종 NGF HDL을 형성합니다.