0 조회수 • 5:04 분 • June 17th, 2025
요추 척추관에 가이드 캐뉼라를 이식한 마취된 쥐부터 시작합니다.
가이드 캐뉼라를 통해 뇌척수액 또는 CSF가 순환하는 척수강내 공간에 카테터 와이어 어셈블리를 비스듬히 삽입합니다.
가이드 캐뉼라를 제거하고 카테터를 천천히 더 깊게 밀어냅니다.
그런 다음 와이어를 완전히 제거하고 카테터를 전달 시스템에 연결합니다.
멸균 식염수를 척추관에 주입하여 통로가 깨끗해지도록 합니다.
테스트 화합물 용액을 CSF에 천천히 투여한 다음 멸균 식염수로 세척합니다.
전달 시스템을 분리하고 카테터를 절단한 다음 끝을 열 밀봉합니다.
열 밀봉 카테터를 결합 조직에 봉합한 다음 카테터 위의 피부를 봉합합니다. 부위를 청소하고 쥐가 회복되도록 하십시오.
테스트 화합물은 CSF를 통해 중추신경계 또는 CNS를 구성하는 척수와 뇌로 퍼집니다.
CNS 내에서 뉴런으로 들어가 치료 가능성을 제공합니다.
카테터 배치 및 화합물 주입을 위해 면도한 골반 위의 근육 사이에 있는 두 개의 자연 구덩이를 식별하십시오. 그리고 한 손으로 구덩이를 잡고 다른 손으로 꼬리에서 방향으로 척추를 부드럽게 누르고 느껴 척추뼈 사이의 첫 번째 주요 움푹 들어간 부분을 찾습니다. S1과 L6 척추 사이의 추간 공간을 확인한 후 주둥이쪽으로 약간 움직여 L5와 L6 척추 사이의 추간 공간을 식별합니다.
메스를 사용하여 주둥이에서 꼬리 방향으로 정중선을 따라 이 부위의 피부와 근육낭에 2cm 이하의 길이를 절개하여 주사 부위가 절개 부위의 중앙에 오도록 합니다. 해부 가위를 사용하여 근육층이 시각화될 때까지 결합 조직을 해부합니다. L1 요추의 등쪽 척추 돌기 바로 측면의 근육낭에 6cm 절개를 합니다.
가이드 캐뉼라 바늘 어셈블리를 여섯 번째 요추의 앞쪽 근처에 배치하고 바늘 끝이 척추관을 관통하도록 여섯 번째 척추의 앞쪽을 따라 어셈블리를 추간 공간으로 밀어 넣습니다.
무딘 겸자를 사용하여 L6 요추의 등쪽 척추 돌기를 찾습니다. 그런 다음 여섯 번째 척추의 앞쪽을 따라 바늘을 추간 공간으로 밀어 넣습니다.
바늘을 따라 가이드 캐뉼라를 제자리에 밀어 넣습니다. 바늘을 제거하고 카테터 와이어 어셈블리를 가이드 캐뉼라에 삽입합니다. 카테터를 척추관에 대해 약 45도 각도로 기울이고 카테터 끝을 근관 안으로 약 0.3cm 밀어 넣습니다.
카테터의 척수강내 끝에서 약 2.5cm 떨어진 탐침 와이어를 제거하고 카테터의 2cm 표시가 근육 바로 아래에 보일 때까지 카테터를 척추관으로 전진시킵니다. 카테터가 제자리에 있으면 가이드 캐뉼라를 제거하여 카테터와 탐침 와이어를 제자리에 둡니다.
근관 입구에 2cm 표시가 될 때까지 카테터를 척추관으로 전진시키고 탐침 와이어를 완전히 빼냅니다. 뇌척수액이 이식된 카테터로 들어가는 것을 시각화할 수 있습니다. 그런 다음 30게이지 바늘 끝을 통해 이식된 카테터의 원위 끝에 전달 카테터 어셈블리를 연결합니다.
다음으로, 60마이크로리터의 멸균 식염수를 100마이크로리터 주사기에 넣고 30마이크로리터의 테스트 화합물을 두 번째 주사기에 넣습니다. 식염수 주사기를 전달 카테터 어셈블리의 튜브 어댑터 끝에 연결하고 20마이크로리터의 멸균 식염수를 척수강내 공간으로 세척합니다.
모든 식염수를 씻어내면 식염수 주사기를 볼루스 주입 주사기로 교체하고 30초 동안 30마이크로리터의 테스트 화합물을 척수강내 공간에 주입합니다. 볼루스가 모두 전달되면 볼루스가 장착된 주사기를 다른 식염수 주사기로 교체하고 추가로 40마이크로리터의 식염수로 카테터를 세척합니다.
두 번째 부피의 식염수가 전달되면 이식된 카테터에서 전달 카테터 어셈블리를 분리하고 한 쌍의 매우 뜨거운 구슬 멸균 해부 겸자를 사용하여 튜브를 고정하여 이식된 카테터를 무균적으로 절단하고 열 밀봉합니다. 흡수성 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 열 밀봉 카테터를 결합 조직에 고정한 다음 비흡수성 봉합사를 사용하여 피부를 봉합합니다. 그런 다음 거즈와 식염수를 사용하여 피부의 혈액을 씻어내고 완전히 누운 상태가 될 때까지 모니터링하면서 가열된 인큐베이터에 쥐를 넣습니다.