포도당이 결핍된 신경모세포종 세포에서 대기압 혈장 치료 평가

배지가 있는 멀티웰 플레이트에서 신경모세포종 세포의 배양을 취합니다.

산화 스트레스를 유도하기 위해 웰의 배지를 포도당이 없는 뉴런 배지로 교체합니다.

균일한 노출을 위해 최적의 거리에서 플라즈마 제트 노즐 아래에 플레이트를 배치합니다.

제어된

수준의 활성 산소 및 질소 종을 생성하는 저용량의 헬륨 기반 대기압 플라즈마 제트(APPJ)로 선택된 우물을 처리합니다.

APPJ 처리된 웰에서 스트레스 반응 경로의 활성화와 항산화 효소의 상향 조절을 허용하기 위해 세포를 배양합니다.

포도당 결핍 상태에서 처리되지 않은 우물의 세포는 추가 산화 세포 손상을 겪습니다.

세포 생존율 분석 시약을 추가하고 배양합니다. 생존 세포는 시약을 유색 제품으로 환원합니다.

마이크로플레이트 리더를 사용하여 색상 강도를 측정합니다.

APPJ로 처리된 우물은 더 높은 세포 생존력으로 인해 증가된 색상 강도를 나타내는 반면, 처리되지 않은 우물은 더 낮은 강도를 나타내어 포도당 결핍 상태에서 APPJ의 신경 보호 효과를 확인합니다.

석영 튜브의 노즐과 96웰 플레이트가 배치될 플랫폼 사이의 거리를 3cm로 조정하여 빔이 배양 배지 표면에 닿을 수 있도록 합니다. 처리 전에 각 웰의 배양 배지를 포도당 배지 없이 RPMI 1640으로 변경하십시오. 이제 플레이트를 대기압 플라즈마 제트 노즐 아래에 놓습니다. 그런 다음 0, 1, 2, 4, 8 및 12초 동안 별도의 웰에서 세포를 처리합니다.

처리 후, 섭씨 37도의 세포 인큐베이터에서 세포를 1시간 동안 배양한 후 각 웰에 10마이크로리터의 Cell Counting Kit 8 용액을 배양합니다. 그런 다음 세포를 섭씨 37도에서 4시간 동안 배양합니다. 마지막으로 마이크로플레이트 리더로 450나노미터에서 흡광도를 측정합니다.