운동 종판을 따라 근육 주사를 통해 추적자를 쥐 운동 뉴런으로 직접 셔틀

마취된 쥐를 가져다가 눈 윤활제를 바르십시오.

표적 팔다리를 면도하고, 피부를 소독하고, 표적 근육에 최적으로 접근할 수 있도록 쥐의 위치를 지정하십시오.

피부를 들어 올리고 절개하여 근육을 노출시킵니다.

운동 뉴런 축삭 말단이 근육 섬유와 시냅스를 형성하여 신경근 접합부를 형성하는 영역인 운동 종판 또는 MEP의 사진을 참조하십시오.

MEP 영역을 노출된 근육에 정신적으로 매핑합니다.

형광 추적자가 들어 있는 유리 마이크로피펫을 가져 가십시오.

MEP 영역을 따라 여러 지점에 추적자를 근육 주입합니다.

과도한 추적자를 제거하고 절개 부위를 봉합한 다음 진통제를 투여합니다.

주사는 신경근 접합부에서 추적자의 가용성을 향상시켜 축삭 말단에서의 엔도사이토시스를 촉진합니다.

소

포 내에 둘러싸인 추적자는 척수의 운동 뉴런 세포체로 역행적으로 운반됩니다.

척수에 추적자 표지 운동 뉴런의 존재는 MEP 표적 전달의 신경 치료 가능성을 시사합니다.

모터 엔드 플레이트에 살아있는 근육을 주입하려면 먼저 마이크로피펫 풀러를 사용하여 플런저가 장착된 등급이 매겨진 유리 마이크로피펫을 당깁니다. 다음으로, 해부 현미경을 사용하여 각 내강의 내경이 약 0.5mm가 되도록 한 쌍의 집게로 마이크로피펫의 끝을 부수십시오. 그런 다음 당긴 피펫에 플루오로-골드를 채웁니다.

이제 마취된 동물에게 눈 윤활제를 바르고 주사할 팔다리를 면도합니다. 거즈를 사용하여 클로르헥시딘과 70% 알코올을 번갈아 세 번 번갈아 사용하여 면도 부위를 닦습니다. 그런 다음 동물을 깨끗한 언더 패드 위에 올려 목표 근육에 접근할 수 있도록 합니다. 동물이 제자리에 있으면 톱니 그립이 있는 집게를 사용하여 대상 근육 위의 피부를 밑에 있는 근육 조직에서 멀리 들어 올리고 수술용 가위를 사용하여 피부를 절개합니다.

절개 부위가 근막에 대한 중단을 최소화하면서 관심 있는 근육을 완전히 노출시킬 수 있을 만큼 충분히 크도록 주의하십시오. 그런 다음 모터 종판 사진을 사용하여 관심 있는 운동 종판 영역의 위치와 모양을 근육에 정신적으로 전치하고 모터 종판 영역의 전체 길이를 따라 1-2마이크로리터의 플루오로-금을 3-4회 주사했습니다.

마지막 주사 후 근육을 부드럽게 닦아 스며드는 부분을 제거합니다. 그런 다음 무딘 집게를 사용하여 절개한 피부의 두 끝을 서로 가깝게 가져옵니다. 수술용 클립으로 상처를 봉합하고 적절한 국소 마취제로 상처의 전체 범위

에 침투시킵니다.