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신경과학
0 조회수 • 2:57 분 • June 18th, 2025
신경퇴행성 프리온 질환과 관련된 단백질인 프리온 단백질 발현을 억제하는 작은 간섭 RNA로 시작하십시오.
양이온성 리포솜 현탁액을 첨가하십시오.
음전하를 띤 siRNA는 양전하를 띤 리포좀 표면에 결합합니다.
폴리아르기닌 꼬리에 부착된 광견병 바이러스 당단백질인 RVG-9r 펩타이드를 소개합니다.
아르기닌 잔기는 RVG-9r-siRNA 결합을 촉진합니다.
리포솜-siRNA-펩티드 복합체를 마취된 마우스의 꼬리 정맥에 주입합니다.
LSPC는 혈류를 통해 순환하여 뇌에 도달합니다.
RVG-9r 펩타이드는 내피 세포의 니코틴성 아세틸콜린 수용체에 결합하여 혈액-뇌 장벽을 가로질러 수용체 매개 전세포증을 유발합니다.
뇌 내부에서 RVG-9r은 신경 아세틸콜린 수용체에 결합하여 LSPC 엔도사이토시스 및 siRNA 방출을 촉진합니다.
RNA 유도 침묵 복합체는 siRNA에 결합합니다.
승객 가닥은 해리하는 반면, 가이드 가닥은 PrP mRNA에 결합하여 절단하여 번역을 방지하고 PrP 발현을 감소시킵니다.
20마이크로리터의 4나노몰 리포솜 현탁액을 200마이크로리터의 20마이크로몰 스톡 siRNA 용액에 첨가하고 실온에서 10분 동안 배양합니다. 그런 다음 80마이크로리터의 RVG-9r 표적 펩타이드 스톡 500마이크로리터를 siRNA 리포좀 용액에 첨가하고 실온에서 10분 동안 배양합니다.
산소에 2 내지 3% 이소플루오란을 사용하여 마우스를 마취한 후, 마우스의 눈을 안용 연고로 덮고 발가락 꼬집기를 수행하여 마취를 확인합니다. 반응이 없는 경우에만 진행하십시오. 마취를 유지하면서 마우스를 등이나 옆으로 눕혀 꼬리 정맥에 접근합니다.
70% 에탄올로 꼬리를 닦은 다음 26게이지 인슐린 주사기를 사용하여 꼬리 정맥에 300마이크로리터의 LSPC 또는 PALETS를 주입합니다. 원위부 주사를 시작하고 정맥이 붕괴되거나 파열되면 근위부로 이동합니다. 흉골 누운 자세를 유지할 때까지 마우스를 깨끗한 케이지에 넣으십시오.