0 조회수 • 3:58 분 • August 7th, 2025
척추뼈가 노출된 마취된 쥐를 예로 들어 가시돌기와 판판을 흉부 T7에서 T9까지 절제합니다.
T8 위와 아래의 등쪽과 복쪽 뿌리를 자릅니다.
출혈을 멈추기 위해 식염수를 바르고 스펀지를 사용하여 액체를 제거합니다.
T8과 T9 사이의 척수를 절개하여 신경 섬유를 절단합니다.
틈새에 압축 폼을 놓고 식염수를 바릅니다.
출혈이 멈추면 거품을 제거하고 잔여액을 제거합니다.
창문을 연 상태에서 미리 준비된 압전 폴리머 도관을 척수 그루터기 위로 밀어 넣습니다.
꼬리 그루터기를 도관의 반대쪽 끝에 삽입합니다.
도관 창을 통해 주사 가능한 매트릭스에 현탁된 슈완 세포를 주입합니다.
창문을 단단히 닫으십시오.
슈완 세포는 도관을 채우고 축삭 성장을 지원하는 신경 영양 인자를 분비합니다.
도관은 구조적 안내를 제공하는 반면, 압전 특성은 신경돌기 성장에 대한 생체 전기 신호를 생성합니다.
점차적으로 축삭이 다리를 가로질러 재생되어 그루터기 사이의 연속성을 복원합니다.
판막을 모두 제거한 후 특히 T8에서 횡돌기 사이의 틈이 보이는지 확인하고 T7과 T9 사이의 양쪽을 따라 뼈를 검사하여 바깥쪽으로 돌출된 뼈 조각이 없는지 확인하고 등근이 보여야 합니다. 각진 스프링 가위를 사용하여 T8 위와 아래의 등쪽과 복부 뿌리를 자릅니다. 그리고 출혈을 멈추는 데 도움이 되도록 척수에 식염수를 첨가하십시오.
다음으로 척수 위의 T8 횡돌기 사이의 틈새에 각진 스프링 가위를 놓고 신경 조직을 완전히 절단하기 위해 한 번 절단합니다. 생성된 2-2.5mm 간격에 압축 폼의 작은 조각을 놓고 즉시 해당 부위에 식염수를 추가합니다.
절단된 탯줄 그루터기가 지혈에 도달할 때까지 기다리는 동안 흡수 삼각형을 얇고 긴 조각으로 자르고 PBS 보관소에서 도관을 제거합니다. 도관에 삼각형을 놓아 여분의 PBS를 제거하고 미리 절단된 창이 열려 있는지 확인합니다.
다음으로, GFP 슈완 세포 펠릿에서 배지를 제거하고 슈완 세포를 10마이크로리터의 차가운 DMEM/F-12에 재현탁합니다. 10마이크로리터의 냉주사 젤을 세포 현탁액에 첨가하고 반복적인 피펫팅으로 잘 혼합합니다. 그런 다음 세포 현탁액을 얼음 위에 놓습니다. 탯줄 그루터기가 준비되면 압축된 폼을 제거한 다음 흡수 삼각형의 긴 조각을 사용하여 추궁 절제술 부위에서 식염수와 혈액을 제거합니다.
그런 다음 마이크로 주걱을 사용하여 그루터기를 부드럽게 들어 올리고 창문이 위를 향하도록 도관을 그루터기 위로 밀어 넣습니다. 그루터기 전체가 삽입되고 도관으로 과도한 출혈이 없도록 주의하십시오. 꼬리 그루터기를 부드럽게 들어 올리고 도관의 다른 쪽 끝을 그 위로 밀어 넣습니다. 그루터기 전체가 삽입되고 창이 등쪽 표면에 있는지 주의하십시오.
그런 다음 웨스턴 블롯 로딩 팁이 장착된 마이크로피펫을 사용하여 미리 절단된 창 중 하나를 통해 20마이크로리터의 GFP Schwann 세포 주사 가능한 매트릭스 혼합물을 도관에 주입합니다. 그리고 창문을 닫으십시오.