유도만능줄기세포 유래 인간 미세아교세포를 마우스 뇌로 경비강 이식

0 조회수3:18 • August 7th, 2025

억제제 함유 식단을 먹인 마취된 마우스를 예로 들어보겠습니다.

뇌 조직에서 이 억제제는 미세아교세포를 선택적으로 제거합니다.

히알루로니다제 용액을 양쪽 콧구멍에 바릅니다.

용액이 배수되는 것을 방지하기 위해 마우스를 바로 누운 자세로 잠깐 놓습니다.

히알루로니다아제는 코 점막의 세포외 기질을 분해하여 세포를 느슨하게 하고 조직 침투를 향상시킵니다.

유도만능줄기세포 유래 인간 미세아교세포 또는 iPSMG 세포 현탁액을 한쪽 콧구멍에 투여합니다.

마우스를 바로 누운 자세로 놓습니다. 그런 다음 다른 쪽 콧구멍에 현탁액을 투여합니다.

투여를 여러 번 반복합니다.

iPSMG 세포는 비강 점막을 관통하고 후각 경로를 따라 뇌에 도달하여 혈액-뇌 장벽을 우회합니다.

마우스가 복구되도록 합니다.

마우스를 마취하고 일정한 간격으로 비강 내 이식 배지를 투여합니다.

배지의 성장 인자는 마우스 뇌에 이식된 iPSMG 세포의 성장과 생존을 지원합니다.

경비강 이식을 위해 마우스를 준비하려면 수컷 마우스에게 PLX를 함유한 식단을 7일 동안 먹입니다. 일곱 번째 날이 끝나면 PLX 식단을 섭취하고 쥐에게 정상적인 식단을 먹입니다. iPSMG의 경비강 이식 1시간 전에 10마이크로리터 피펫 팁을 사용하여 PBS에 함유된 2.5마이크로리터의 히알루로니다제를 각 콧구멍에 두 번 투여하여 코 점막에 대한 투과성을 높입니다.

히알루로니다제 적용 후 마우스를 바로 누운 자세로 눕힙니다. iPSMG의 비강 이식 10분 전에 2.5마이크로리터의 히알루로니다제를 투여합니다. 10마이크로리터 피펫 팁을 사용하여 마우스의 한쪽 콧구멍에 2.5마이크로리터의 세포 현탁액을 도포합니다. 다른 쪽 콧구멍에 세포 현탁액을 투여하기 전에 마우스를 5분 동안 누운 자세로 눕힙니다.

세포 현탁액을 4회 투여하여 동물당 총 부피 20마이크로리터를 도포합니다. PLX 수유 중단 후 48시간 후, 동일한 마우스에 히알루로니다제 및 세포 현탁액의 투여를 반복합니다. 사이토카인을 투여하기 위해, 10마이크로리터 피펫 팁을 사용하여 2.5마이크로리터의 이식 배지를 마우스의 한쪽 콧구멍에 도포한다.