신경근 접합부 재생을 연구하기 위해 마우스에서 비골 신경 손상 유도

0 조회수3:47 • August 7th, 2025

다리를 면도한 마취된 마우스를 수술용 현미경 아래에 놓습니다.

면도한 다리의 피부를 절개한 다음 결합 조직층을 절단하여 밑에 있는 근육을 노출시킵니다.

견인기를 사용하여 근육을 분리하여 총비골 신경을 노출시킵니다.

신경에는 축삭 말단이 근육 섬유와 연결되어 신경근 접합부 또는 NMJ를 형성하는 운동 뉴런이 포함되어 있습니다.

무릎의 비복근 힘줄과 신경의 교차점을 찾습니다.

집게로 신경을 잡고 압력을 가하여 부상을 유발합니다.

반투명 손상 부위는 축삭 손상을 나타내며 이는 NMJ 손상으로 이어집니다.

축삭 재생을 안내하기 위해 신경의 외부 신경외막층이 손상되지 않았는지 확인하십시오.

견인기를 제거하고 근육을 재정렬합니다. 절개 부위를 봉합하고 마우스가 회복되도록 합니다.

손상된 축삭의 신호는 대식세포를 모집하여 축삭 파편을 제거하여 축삭 재생과 NMJ의 재건을 지원합니다.

수술용 보드에 마우스를 놓고 발가락 꼬집기에 반응이 없는지 확인합니다. 구속 장치 내에서 팔다리를 정렬하고 대상 뒷다리를 해부학적으로 자연스러운 위치에 두고 무릎 관절을 내부 또는 외부 회전 없이 약간 확장합니다.

그런 다음 수술용 현미경으로 동물을 옮깁니다. 그리고 뼈 무릎 관절과 전경골근과 비복근 사이의 능선이 대물렌즈를 통해 보일 때까지 보드를 조정합니다. 메스와 겸자를 사용하여 총비골 신경의 기본 경로에 수직으로 피부를 통해 약 3cm 절개합니다. 표재성 근막을 통해 절개를 계속하여 대퇴이두근과 외측광근을 노출시킨 다음 연결된 심부 근막을 통해 1-2cm 절개하여 근육을 분리합니다.

다음으로, 기계적 견인기를 사용하여 대퇴이두근을 꼬리쪽으로 후퇴시켜 총비골신경을 드러냅니다. 비복근 외측 머리의 힘줄과의 교차점이 발견될 때까지 신경을 근위부로 추적합니다. 그런 다음 가는 집게를 사용하여 신경을 잡고 끝을 비복근 힘줄의 측면 경계와 평행하게 정렬합니다. 그리고 5초 동안 일정한 집중 압력을 가하여 총비골 신경을 분쇄합니다.

집게를 섬유에 수직으로 잡고 집게 끝 바로 뒤에 있는 영역으로 조직을 잡습니다. 그리고 힘줄의 경계를 따라 신경을 깨끗하고 선형적으로 짓밟기 위해 단단하면서도 부드러운 압력을 가합니다.

수술용 현미경을 통해 신경을 육안으로 검사하여 조직이 완전히 부서졌는지 확인합니다. 신경은 손상 부위에서 반투명하게 나타납니다. 신경이 충분히 손상된 경우 견인기를 제거하십시오. 그리고 해부학적 위치에서 근육을 재정렬하십시오. 그런 다음 6-0 실크 봉합사를 사용하여 1-3개의 단순하고 단속된 봉합사로 절개 부위를 봉합하고 완전히 회복될 때까지 모니터링이 있는 깨끗한 케이지의 가열 패드 위에 마우스를 놓습니다.