Stretching Short Sequences of DNA with Constant Force Axial Optical Tweezers

Krishnan Raghunathan; Joshua N. Milstein; Jens -Christian Meiners

doi:10.3791/3405

JoVE Journal
Bioengineering

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JoVE Journal Bioengineering

Stretching Short Sequences of DNA with Constant Force Axial Optical Tweezers

상수 강제 축 방향 광학 족집게로 DNA의 짧은 시퀀스를 스트레칭

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08:48 min

October 13, 2011

DOI: 10.3791/3405-v

Krishnan Raghunathan¹, Joshua N. Milstein², Jens -Christian Meiners²

¹LSA Biophysics,University of Michigan , ²LSA Biophysics, Department of Physics,University of Michigan

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

우리는 짧은 DNA 분자의 기계적 성질을 탐험 할 수있는 일정한 힘을 축 광 핀셋의 사용을 보여줍니다. 축 방향으로 DNA를 스트레칭함으로써, 우리는 우리 ~ 100 nm의 짧은으로 DNA 분자를 연구 할 수 있습니다 steric hindrances 및 종래의 측면 조작하여 발생하는 유물을 최소화합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 일정하고 잘 보정된 광력으로 100나노미터 길이의 짧은 DNA 분자를 조작하는 것입니다. 이것은 한쪽 끝의 DNA를 커버 슬립에 묶고 다른 쪽 끝을 폴리스티렌 미세구에 묶음으로써 수행됩니다. 다음으로, 광학 핀셋이 정렬되고 보정됩니다.

그런 다음 DNA는 미세구에 작용하는 구배력과 산란력의 조합으로 표면에서 멀리 뻗어 있습니다. 마지막으로, DNA는 전위의 선형 영역에 비드를 가두어 확장됩니다. 이 프로토콜은 DNA 및 DNA 단백질 결합 동역학의 기계적 특성을 연구하는 데 사용되었으며, 짧은 DNA 구조체의 탄성에 대한 경계 조건의 중요성을 밝히는 데 더욱 유용했습니다.

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