January 28th, 2012
꼬리 - 서스펜션 시험은 마우스에서 약물 치료의 약은 효능을 평가하기위한 실험 절차로 검증됩니다. 생쥐 6 분 동안 자신의 꼬리에 의해 중단되고 탈출 관련 동작이 평가됩니다. 우리는 꼬리 정지 테스트를 수행에 사용되는 절차를 설명합니다.
꼬리 현탁액 검사는 다양한 실험 조작의 항우울제 효능을 예측하는 데 사용되는 일반적인 행동 검사입니다. 이 동영상은 이 테스트의 절차를 보여줍니다. 꼬리 서스펜션 테스트는 마우스에 대해 검증되었으며 더 큰 설치류에는 권장되지 않습니다.
꼬리 서스펜션 테스트에서 마우스는 꼬리에 매달려 있습니다. 마우스가 6분 동안 일시 중단된 상태로 유지됩니다. 이 시간 동안 피험자의 행동이 기록된다.
6분의 실험 기간이 끝나면 피험자의 꼬리에서 테이프를 제거합니다. 테스트가 완료된 후 시각적 기록은 컴퓨터 또는 비디오 모니터로 전송됩니다. 분석을 위해 관찰자는 전체 6분 세션 동안 마우스가 고군분투하는 데 소비하는 시간을 측정합니다.
항우울제 성분이 있는 화합물은 내가 고군분투하는 시간을 증가시킵니다. 이것은 부동성의 기간이 짧아진 것에 의해 반영됩니다. 예를 들어, 항우울제 보조제로 임상적으로 유용한 기분 안정제 리튬이 꼬리 서스펜션 테스트에서 부동성 시간을 감소시켰다고 보고했습니다.
안녕하세요, 제 이름은 볼티모어에 있는 메릴랜드 대학교 의과대학 정신의학과의 토드 굴드 박사 연구실의 션입니다. 안녕하세요, 저는 같은 연구실의 Chantel입니다. 이 비디오에서는 테일 서스펜션 테스트를 수행하고 점수를 매기는 방법을 보여 드리겠습니다.
테일 서스펜션 테스트는 항우울제 치료의 잠재적 효능을 평가하는 데 사용됩니다. 이제 실험실로 가서 실험을 실행하는 방법을 보여드리겠습니다. 필수는 아니지만 특별히 설계된 테일 서스펜션 박스를 사용합니다.
이 테스트의 경우. 테일 서스펜션 박스는 4개의 수납 공간으로 나뉘어져 있으며, 각 수납 공간은 단일 마우스용으로 예약되어 있습니다. 칸막이는 테스트 중에 마우스가 서로를 관찰하는 것을 방지합니다.
그러나 선반이나 다른 구조를 사용하여 마우스를 매달아 놓을 수 있습니다. 꼬리 서스펜션 테스트 박스의 치수는 마우스가 가장자리에 도달하여 유지하는 것을 방지하기 위해 선택됩니다. 실험을 시작하기 전에 충분한 테이프 조각을 자르고 꼬리에 접착하는 데 사용할 세그먼트를 표시하십시오.
우리 실험실에서는 17cm 테이프 조각을 사용할 것입니다. 이 테이프 조각의 끝에서 2cm 떨어진 곳에 표시해야 하며 꼬리에 부착하는 데 사용됩니다. 우리는이 2 센티미터 부분의 중간에 꼬리를 놓습니다.
테일 서스펜션 테스트 박스와 비디오 카메라를 배치합니다. 동물을 소개하기 전에 이전 피험자로부터 남은 냄새를 중화하기 위해 살균 용액으로 상자를 철저히 청소해야 합니다. 우리 실험실에서는 색상을 제외한 모든 면에서 동일한 두 개의 서로 다른 테일 서스펜션 박스를 사용합니다.
알비노 마우스의 경우 짙은 회색 상자는 비디오 녹화에 좋은 대비를 제공합니다. 더 어두운 색의 마우스 균주의 경우 흰색 상자가 적합합니다. 백색 소음 기계를 시작합니다.
간헐적인 소리를 마스킹해야 합니다. 쥐를 시술실로 데려와 적응시킵니다. 실내 조건은 일정하게 유지되어야 하며 소음, 조명 수준의 변화 및 기타 가능한 방해가 없어야 합니다.
이 시간은 일반적으로 최소 1시간입니다. 적응 기간이 끝나면 특정 마우스 균주가 꼬리를 타고 올라가는 것을 방지하기 위해 테스트를 진행할 수 있습니다. 테일 서스펜션 테스트 중에는 테일 위에 놓는 플라스틱 실린더를 사용합니다.
이 실린더는 테스트 중에 꼬리 바닥에 놓입니다. 우리 실험실에서는 길이 4cm, 지름 1cm, 무게 1.5g의 플라스틱 실린더를 사용합니다. 등반을 방지하기 위해 플라스틱 실린더를 사용하는 경우 테이프를 붙이기 전에 꼬리에 놓아야 합니다.
우리는 꼬리의 맨 끝에 테이프를 붙이고 꼬리의 2-3mm는 테이프 바깥쪽에 남습니다. 집 새장에 있는 쥐의 꼬리에 테이프를 붙입니다. 테이프의 표시된 끝을 사용하여 테이프가 꼬리에 붙었다가 다시 붙는지 확인하십시오.
테이프가 붙으면 다른 동물에 부착된 테이프가 엉키지 않도록 각 마우스를 케이지 벽에 고정합니다. 이 프로세스를 신속하게 완료하십시오. 그렇지 않으면 쥐는 불필요한 스트레스를 받게 됩니다.
동물이 중단되기 전에 녹음을 시작해야 합니다. 테이프의 다른 쪽 끝을 서스펜션 바에 놓아 치료 그룹 간에 균형을 이루고 카메라 시야를 방해하지 않는 방식으로 동물을 매달아 놓습니다. 쥐는 한 마리씩 매달려 있기 때문에 각 동물은 테스트 시작 시간이 약간 다릅니다.
일시 중단 기간이 시작될 때 정확히 각 마우스에 점수를 매기기 시작해야 합니다. 카메라 시야를 가리지 않는 것이 중요합니다. 전체 테일 서스펜션 세션이 방해로 점수가 매겨지기 때문에 카메라 뷰로 인해 데이터가 누락될 수 있습니다.
모든 테이프 끝이 동일한 길이의 슬랙으로 서스펜션 바에 수직인지 확인하십시오. 각 주제에 대해 타이머를 시작합니다. 테일 서스펜션 테스트는 6분 동안 진행됩니다.
6분의 테스트 기간이 경과하면 각 꼬리 끝에서 테이프를 제거하고 생쥐를 집 우리로 되돌립니다. 테스트가 끝나면 피험자 정보를 비디오로 녹화해야 합니다. 생쥐를 군체실로 되돌린 후, 테스트 박스를 철저히 세척하고 살균 용액으로 닦아야 합니다.
이제 테스트를 마쳤으므로 동작에 점수를 매기는 방법에 대해 설명하겠습니다. 꼬리 정지 테스트를 채점할 때 일반적으로 평가되는 유일한 변수는 동물이 움직이지 않는 시간입니다 부동성 시간을 얻기 위해 마우스가 움직이는 시간을 측정하고 6분 테스트 시간에서 이를 뺍니다. 우리는 테스트의 6분 전체를 채점할 것입니다.
먼저 관찰자가 각 마우스 시간 동안 한 동물에만 집중할 수 있도록 평가되지 않은 마우스를 다룹니다. 모바일은 게임패드 장치로 제어되는 화면 스톱워치로 측정됩니다. 여기에서 보시다시피 동시에 제어되는 두 개의 별도 화면 스톱워치가 있습니다.
첫 번째 스톱워치는 360초부터 카운트다운하고 관찰자에게 테스트 기간을 나타냅니다. 두 번째 스톱워치는 피험자가 이동 중인 시간을 측정합니다. 아시다시피 두 번째 스톱워치는 첫 번째 스톱워치로 덮여 있으며 관찰자는 밀리초 소수만 볼 수 있습니다.
이러한 방식으로 관찰자는 스톱워치가 카운트 중인지 확인할 수 있지만 스코어링이 완료될 때까지 총 이동 시간은 볼 수 없습니다. 관찰자 편향이 결과에 영향을 미치는 것을 방지하기 위해 이 작업을 수행합니다. 생쥐는, 특히 세션 초반에, 탈출 관련 행동을 보인다.
이러한 행동에는 장치와 서스펜션 바의 벽에 도달하려는 시도, 신체의 강한 흔들림 및 달리기와 유사한 팔다리의 움직임이 포함됩니다. 이러한 움직임은 명백히 모빌리티를 구성합니다. 그러나 테스트가 진행됨에 따라 움직임이 더 미묘해집니다.
우리 실험실에서는 앞다리에 국한된 작은 움직임을 계산하지 않지만 뒷다리의 움직임이 없는 것을 이동성으로 간주합니다. 이 외에도 이전 모빌리티 시합 중 모멘텀 이득으로 인한 스윙과 같은 진자는 모빌리티로 간주되지 않습니다. 이제 실제 테일 서스펜션 테스트 세션의 점수를 살펴보겠습니다.
일반적으로 이동 시간이 아닌 부동성 시간이 보고됩니다. 부동성 시간은 360초 테스트 시간에서 총 이동성 시간을 빼서 계산할 수 있습니다. 점수. 테일 서스펜션 테스트는 교육과 연습이 필요합니다.
내부 실험실 표준을 수립하고 새로운 관찰자가 높은 수준의 신뢰성에 도달할 때까지 교육하는 것이 중요합니다. 이 백서에서는 테일 서스펜션 테스트를 수행하고 점수를 매기는 방법을 설명합니다. 앞으로의 실험에 행운을 빕니다.
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꼬리 현수 시험은 마우스에서 약물 치료의 항우울제 효과를 평가하는 데 사용되는 검증된 행동 절차입니다. 이 시험 동안 마우스는 6분 동안 꼬리로 매달리고, 탈출 관련 행동이 기록됩니다.
The tail suspension test provides a standardized behavioral readout for evaluating antidepressant-like activity in preclinical models, supporting early-stage target validation and mechanistic de-risking of CNS-active compounds. By quantifying escape-oriented behaviors as a proxy for behavioral despair, the assay enables high-throughput screening of prospective therapeutics with predictive confidence in mood disorder indications. This assay informs go/no-go decisions in discovery pipelines by linking pharmacological modulation to quantifiable behavioral outputs relevant to antidepressant efficacy.
The tail suspension test fits within the discovery continuum from target hypothesis testing through lead identification to preclinical efficacy assessment, particularly for CNS depression indications where behavioral despair is a measurable endpoint.