Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures

Sharon J. Sequeira; Elise M. Gervais; Shayoni Ray; Melinda Larsen

doi:10.3791/50060

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Biology

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Genetic Modification and Recombination of Salivary Gland Organ Cultures

침샘 조직 문화의 유전자 변형과 재결합

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09:29 min

January 28, 2013

DOI: 10.3791/50060-v

Sharon J. Sequeira*¹, Elise M. Gervais*¹, Shayoni Ray¹, Melinda Larsen¹

¹Department of Biological Sciences,University at Albany, SUNY

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

유전자 전체에서 상피 세포를 조작하는 기술

이 절차의 전반적인 목표는 아데노바이러스 구조를 사용하여 마우스의 상피, 배아 턱밑 타액선에서 원하는 단백질의 발현을 변경하는 것입니다. 이것은 배아 13일째에 배아를 채취하고 턱밑 타액선을 해부함으로써 달성됩니다. 다음으로, 상피 기초를 주변 중간엽에서 분리하고 바이러스를 함유한 배양액에 담근다.

기초를 세척한 후 배지를 함유한 매트리겔(matrigel)에서 배양하고, 면역화학 및 표준 현미경 또는 서양 혈액 분석을 사용하여 표적 단백질 수준의 변화 및 분지 형태 형성에 미치는 영향을 생체 외 배양을 위해 3개의 중간엽과 결합했습니다. 이 기술을 사용하면 복잡한 장기에서 단 하나의 조직 구획만 유전적으로 변형할 수 있으며 형질전환 유기체를 만들지 않고도 재조립된 전체 장기 설명의 변화를 모니터링할 수 있습니다. 기존 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 상피 구획 내에서 야생형 또는 우성 음성 단백질의 발현을 가능하게 한다는 것입니다.

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