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이식 근육 전구 세포를 타겟팅 할 수 분자 이미징
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JoVE Journal Medicine
Molecular Imaging to Target Transplanted Muscle Progenitor Cells

이식 근육 전구 세포를 타겟팅 할 수 분자 이미징

Full Text
9,449 Views
09:24 min
March 27, 2013

DOI: 10.3791/50119-v

Kelly Gutpell1,2, Rebecca McGirr1, Lisa Hoffman1,2,3

1Imaging Program,Lawson Health Research Institute, 2Department of Anatomy and Cell Biology,Western University, 3Department of Medical Biophysics,Western University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a non-invasive method to evaluate the success of myoblast transplantation using a reporter gene approach and bioluminescence imaging. The technique employs a tri-fusion reporter gene to facilitate the tracking of transplanted cells in vivo.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Cell Biology
  • Transplantation Biology

Background

  • Myoblast transplantation is a potential therapy for muscular dystrophies.
  • Non-invasive imaging techniques can enhance the evaluation of transplantation success.
  • Reporter genes allow for the visualization of transplanted cells.
  • Bioluminescence imaging provides a sensitive method for tracking cell viability and integration.

Purpose of Study

  • To develop a non-invasive method for evaluating myoblast transplantation.
  • To utilize a tri-fusion reporter gene for effective cell tracking.
  • To assess the efficiency of transfected myoblasts in a dystrophic mouse model.

Methods Used

  • Introduction of a tri-fusion reporter gene into C2C12 myoblasts.
  • Quantification of transfection efficiency via fluorescence microscopy.
  • Intramuscular implantation of engineered cells into dystrophic MDX mice.
  • Baseline scans performed to evaluate cell integration post-transplantation.

Main Results

  • Successful transfection of myoblasts was achieved.
  • Bioluminescence imaging enabled tracking of implanted cells.
  • Control experiments demonstrated the effectiveness of the method.
  • Results indicate potential for monitoring cell therapy outcomes.

Conclusions

  • The developed method provides a reliable means to assess myoblast transplantation.
  • Bioluminescence imaging is a valuable tool for non-invasive evaluation.
  • This approach may enhance future studies in cell therapy for muscular dystrophies.

Frequently Asked Questions

What is the purpose of the tri-fusion reporter gene?
The tri-fusion reporter gene allows for the visualization of transplanted myoblasts using bioluminescence imaging.
How are the myoblasts introduced into the mice?
The engineered myoblasts are implanted intramuscularly into the hind limb of dystrophic MDX mice.
What imaging technique is used in this study?
Bioluminescence imaging is used to evaluate the success of myoblast transplantation.
What control is used in the experiments?
Non-transfected myoblasts are implanted into the contralateral hind limb as a control.
What is the significance of this research?
This research provides a non-invasive method to monitor the success of cell therapies in muscular dystrophies.
How is transfection efficiency measured?
Transfection efficiency is calculated by counting MRFP expressing cells using a fluorescence microscope.

myoblast 이식의 성공 여부를 평가하는 비 침습적 방법이 설명되어 있습니다. 방법은 그의 표현 다른 이미징 modalities를 이미징 할 수 있습니다 유전자로 구성된 통합 된 퓨전 리포터 유전자의 장점을 걸립니다. 여기, 우리는 사용을

이 절차의 전반적인 목표는 리포터 유전자 접근법과 생물 발광 이미징을 사용하여 근아세포 이식의 성공을 비침습적으로 평가하는 것입니다. 이는 CMV 프로모터의 제어 하에 f Luke, MRFP 및 SR three 90 tk를 발현하는 tri fusion 보고 유전자를 불멸화된 C two C 12 근아세포 세포주에 먼저 도입함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계는 포터 유전자를 발현하는 근아세포의 수를 정량화하는 것입니다.

이 연구에서는 형광 현미경에서 MRFP 발현 세포를 계수하여 transfection 효율을 계산합니다. 다음으로, 15마이크로리터 이하의 부피로 5개의 공학적 세포 중 10개를 영양이영양증 MDX 마우스의 뒷다리에 근육 주사로 이식합니다. UNT 형질주입된 세포를 대조군으로 반대쪽 뒷다리에 이식한 다음 기준선 스캔을 수행합니다.

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