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DOI: 10.3791/50119-v
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This study presents a non-invasive method to evaluate the success of myoblast transplantation using a reporter gene approach and bioluminescence imaging. The technique employs a tri-fusion reporter gene to facilitate the tracking of transplanted cells in vivo.
myoblast 이식의 성공 여부를 평가하는 비 침습적 방법이 설명되어 있습니다. 방법은 그의 표현 다른 이미징 modalities를 이미징 할 수 있습니다 유전자로 구성된 통합 된 퓨전 리포터 유전자의 장점을 걸립니다. 여기, 우리는 사용을
이 절차의 전반적인 목표는 리포터 유전자 접근법과 생물 발광 이미징을 사용하여 근아세포 이식의 성공을 비침습적으로 평가하는 것입니다. 이는 CMV 프로모터의 제어 하에 f Luke, MRFP 및 SR three 90 tk를 발현하는 tri fusion 보고 유전자를 불멸화된 C two C 12 근아세포 세포주에 먼저 도입함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계는 포터 유전자를 발현하는 근아세포의 수를 정량화하는 것입니다.
이 연구에서는 형광 현미경에서 MRFP 발현 세포를 계수하여 transfection 효율을 계산합니다. 다음으로, 15마이크로리터 이하의 부피로 5개의 공학적 세포 중 10개를 영양이영양증 MDX 마우스의 뒷다리에 근육 주사로 이식합니다. UNT 형질주입된 세포를 대조군으로 반대쪽 뒷다리에 이식한 다음 기준선 스캔을 수행합니다.
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