상처 치유의 생쥐 모델

이 절차의 전반적인 목표는 부목을 댄 상처를 만들어 수축을 방지하고 상피화, 발바닥 증식 및 혈관 신생을 촉진하는 것입니다. 이것은 먼저 등쪽을 준비하고 정중선 양쪽에 두 개의 전체 두께의 절제 상처를 만들어 수행됩니다. 다음으로, 부목을 상처 위에 놓고 제자리에 봉합합니다.

그런 다음 상처를 측정하고 치료를 적용합니다. 마지막으로, 상처 부위에 폐색 드레싱을 씌우고 쥐가 회복할 수 있도록 합니다. 궁극적으로, 피부 절제 상처 치유 모델은 상처, 상피화 및 증식 및 혈관 신생을 포함한 관련 과정을 평가하는 데 사용됩니다.

다른 방법에 비해 이 기술의 주요 장점은 상처 수축이 방지된다는 것입니다. 이는 상피형성 증식과 혈관신생을 촉진하며, 이는 상처 치유 과정과 더 유사합니다. 인간의 경우, 이 방법은 치료 화합물의 효능을 평가하는 데 특히 유용하며, 각 마우스가 자체 대조군 역할을 하기 때문에 연구에 필요한 동물의 수를 최소화합니다.

부목을 만들기 위해 부목과 폐색 드레싱을 준비하는 것으로 시작하십시오. 먼저 실리콘 시트에 10mm 원의 윤곽을 그린 다음 가위나 생검 펀치를 사용하여 실리콘 디스크를 만듭니다. 다음으로, 중앙에 10mm 디스크 중간에 5mm 생검 펀치를 넣고 세게 눌러 부목으로 사용할 도넛 모양의 링을 만듭니다.

ops site와 같은 투명 폐색 드레싱을 사용하여 동일한 크기의 원형 드레싱을 만듭니다. 시작하려면 마취된 마우스에서 적절한 마취 깊이를 확인합니다. 수술 부위의 털을 모두 제거한 후 베타딘과 알코올을 반복해서 바르며 피부를 청소합니다.

준비가 되면 멸균 4mm 생검 펀치를 사용하여 어깨 높이에서 마우스의 정중선 양쪽에 있는 두 개의 원형 패턴의 윤곽을 만듭니다. 그런 다음 톱니 모양의 집게를 사용하여 윤곽 중앙의 피부를 들어 올리고 홍채 가위를 사용하여 상처를 만듭니다. panus osis를 포함한 피하 조직을 절단해야 합니다.

양쪽에서 조직을 절제합니다. 두 개의 원형 상처를 드러냅니다. 실리콘 부목의 양쪽에서 플라스틱 보호 코팅을 제거하고 한쪽 면에 시아노아크릴레이트 접착제를 도포합니다.

부목을 상처 중앙의 중앙에 놓고 중단된 6개의 오 나일론 봉합사로 제자리에 봉합합니다. 다른 상처에 부목 과정을 반복합니다. 이 시점에서 치료 화합물을 한 상처에 바르고 다른 상처를 사용할 수 있습니다.

차량 제어의 경우 부목 아래에 자를 놓고 사진 현미경 사진을 찍습니다. 앞서 준비한 원형 드레싱 중 하나로 상처를 덮으십시오. 진통제를 투여한 후 동물이 가열된 케이지에서 회복할 수 있도록 합니다.

동물들은 하루에 두 번 통증과 체중 감소의 징후를 모니터링합니다. 상처를 측정하려면 앞서 보여준 것처럼 동물을 마취하고 집게로 폐색 드레싱을 부드럽게 벗겨냅니다. 수술용 캘리퍼를 사용하여 여러 지점에서 상처 직경을 측정하여 평균을 구하고 나중에 참조할 수 있도록 사진 현미경 사진을 찍습니다.

이때 동물의 혈액 관류를 평가할 수 있습니다. 레이저 도플러 이미저를 사용하여 상처에 깨끗하고 투명한 폐색 드레싱을 바르고 완전히 회복될 때까지 동물을 따뜻하게 유지합니다. 부목이 제대로 고정되지 않으면 안락사 후 마취제 과다 복용으로 상처가 쉽게 수축할 수 있으므로 집게와 메스 날을 사용하여 봉합사를 제거하고 상처에서 부목을 조심스럽게 벗겨냅니다.

홍채 가위를 사용하여 상처 부위 주변과 아래를 넓고 완전히 절제합니다. 제거한 후에는 표준 절차에 따라 조직을 고정합니다. 헤마틴(Hematin) 및 에오신 염색(eosin staining)은 상처 구조와 상피 간극을 시각화하는 데 사용할 수 있습니다.

또한 모세혈관의 수를 결정하기 위해 면역조직화학적 분석을 통해 신생혈관형성을 평가할 수 있습니다. 상처 봉합 곡선은 상처의 평균 직경을 계산하고 결과를 백분율로 표현하여 결정됩니다. 이 사례에서, 치료용 화합물은 대조군과 비교했을 때 상처 봉합을 크게 가속화했습니다.

이 기술을 숙달하면 제대로 수행하면 30분 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 실험 간의 일관성을 유지하기 위해 균등하게 배치된 봉합사로 부목을 단단히 부착하는 것이 중요합니다.