Name: 마우스 폐 삽관 법의 간단한 방법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 6 s
Description: 학습하세요 마우스 폐 삽관법을 통해 기계적 환기 및 액체 주입을 수행하는 효율적인 방법을. 섬유광원을 활용한 이 기술은 폐 기능 측정 연구에 필수적인 비용 효율적인 실험 기법입니다.

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NIH HL-10342에 의해 지원.

1. 절차 준비 하나는 먼저 획득하고 다음 항목을 준비해야합니다 : <ol><li> 캐뉼라. 20-35g 마우스의 삽관을 위해, 우리는 긴 1 또는 1.5 인치, 20 게이지 IV 카테터를 (BD Insylte, 스파크, MD 또는 Jelco Optiva, Carlsbad, CA)을 사용합니다. 새로운 멸균 카테터는 각 마우스에 사용할 수 있지만, 카테터는 하루 아침에 70 %의 에탄올에 몸을 담글 수에 의해 살균 후 재사용 할 수 있습니다. 마우스의 인두 나 기관도는 멸균 장갑과 악기의 사용을 포함한 멸균 적절한 청결 절차이지만, 준수해야합니다. </li><li> fiberoptic 케이블. 우리 오빠 광학에서 0.5 mm 광학 케이블의 ≈ 70cm를 사용하지만, 길이가 중요하지 않습니다. 이 레이저와 길이로 케이블을 절단 한 후, 에지가 상대적으로 좌회전되기 때문에 섬유, 그 가장자리 부드럽게이 있는지 확인하는 것이 중요합니다, 그것은 tracheal 벽 피어스에 많은 노력을하지 않습니다. 그러나, 전s은 (는) 매우 간단 1,000 그릿 멀리 종이를 (의 비디오 및 그림 1의 데모를 볼 터치 끝의 가장자리에 끝에서 2cm에 대한 섬유를 개최 한 후 몇 초 동안 작은 원을 만들어이 가장자리를 부드럽게하기 맥도널드, 외. 10). 다른 쪽 끝은 고무 마개를 통해 삽입됩니다. 이것은 가장 쉽게 첫번째 다음 바늘을 인출, 마개를 통해 18 게이지 바늘을 밀어 바늘 구멍을 통해 광섬유를 삽입하여 수행됩니다. 고무 마개 (예 NCL-150, Volpi 미국, 또는 기타 나 광원, 심지어 미만 150w) 150 와트 할로겐 라이트 소스에 연결되어 있습니다. 그것은 뜨거운 광원에 너무 가까이 위치하고 때 일반 고무 또는 코르크 굽기 수 있으므로, 실리콘 고무 (또는 다른 열 저항 소재)로 만든 마개를 사용하도록하십시오하는 것이 중요합니다. </li></ol> 2. 삽관 법을 수행 <ol><li> 도 1 및도 2를 참조하십시오. 광섬유 케이블 t를 삽입hrough 실리콘 고무 튜브의 짧은 부분 (≈ 0.8 mm ID X 4mm OD, 콜 - 팔머, EW-96410-13). 여전히 광섬유 케이블을 조정할 수 있도록하면서 매우 긴밀한이 고무 튜브를 묶어주세요. 캐뉼라의 Luer 끝에 석판 실리콘 튜브를 삽입하면 삽입 관 내부의 광섬유 케이블의 위치를​​ 수정합니다. 이 캐뉼라 끝의 앞에 캐뉼라 ≈ 4mm 통해 연장하도록 fiberoptic 케이블의 위치를​​ 조정합니다. </li><li> 의 상단 incisors (그림 3)에 의해 중지 수직 지원에 anesthetized 마우스를 놓습니다. 대부분의 조사는 자신이 직면하고있는 마우스의 복부 측면과 최고의 시각화를 찾으십시오. 아주 부드럽게 혀를 뽑아서 엄지와 집게 손가락으로 누르고 있습니다. 가운데 손가락은 목 및 플라스틱 지원 사이에 위치합니다. 집게 손가락과 엄지 손가락으로 혀 견인가 입을 열 및 삽관 경로를 바르게하는 데 사용됩니다, 머리의 각도는 목 뒤의 가운데 손가락으로 조정됩니다그림 3에 표시된. </li><li> 가벼운 소스와 소개 자로서 광섬유 케이블을 사용하여 시각화 성대를 통해 밀어. 코드가 표시되지 않으면 부드럽게 지원으로 가운데 손가락을 사용하여 혀에 더 당긴다. 삽입 할 때 더 캐뉼라 ≈ 5mm을 부활 시켰습니다. 그런 다음 매우 조심하는 것은, 캐뉼라를 이동 광섬유 케이블을 인출 할 수 없습니다. 마우스를 누워 캐뉼라를 확보 테이프 조각을하고 Plasticine (모델링 점토)의 작품에 캐뉼라 허브를 지원 그림 4에 표시. </li><li> 가 솔로 작업이기 때문에 3 단계의 절차는 쉽게 가르쳐거나, 입증 할 수 없습니다. 그러나, 혀와 머리 뒤의 지원에 견인의 미묘한 조정이 거의이 시도하는 모든 곧 성대를 시각화하기 위해 마우스를 위치 할 수있는 올바른 방법을 찾으십시오. </li></ol>

<ol><li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> J. Appl. Physiol. 87, 2362-2365 (1999).</li>
<li>Walters, D. M., Wills-Karp, M., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cellular+profile+and+lung+function+with+repeated+bronchoalveolar+lavage+in+individual+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Genomics%22%5BJournal%5D)">Assessment of cellular profile and lung function with repeated bronchoalveolar lavage in individual mice.</a> Physiol. Genomics. 2, 29-36 (2000).</li>
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<li>Vergari, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+of+orotracheal+intubation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22European+Review+for+Medical+and+Pharmacological+Sciences%22%5BJournal%5D)">A new method of orotracheal intubation in mice.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 8, 103-106 (2004).</li>
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<li>Hastings, R. H., Summers-Torres, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+Laryngoscopy+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Topics+in+Laboratory+Animal+Science+%2F+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Direct Laryngoscopy in Mice.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science / American Association for Laboratory Animal Science. 38, 33-35 (1999).</li>
<li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> J. Appl. Physiol. 106, 984-987 (2009).</li>
<li>Ewart, S. L., Levitt, R. C., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+system+mechanics+in+mice+measured+by+end-inflation+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">Respiratory system mechanics in mice measured by end-inflation occlusion.</a> Journal of Applied Physiology. 79, 560-566 (1995).</li>
<li>MacDonald, K. D., McKenzie, K. R., Mitzner, W., Zeitlin, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+Mechanics+in+Heterozygous+CF+Mice+after+Repeated+LPS+Dosing%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Respir.+Crit.+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Lung Mechanics in Heterozygous CF Mice after Repeated LPS Dosing.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 175 (4), A930(2007).</li>
</ol>

저자는 모두 공개 할 관심의 충돌이 없습니다.

여기에 설명 된 절차는 몇 가지 장점이 있습니다. 먼저 장치 간단하고 상대적으로 저렴 .. 장치의 제조는 특별한 도구 나 비싼 장비가 필요하지 않습니다. 카테터의 사용은 또한 광원이 하나가 소개 자의 tracheal 개방에 접근로 tracheal 개방의 시력을 잃게 없다는 의미입니다 소개합니다. 0.5 mm의의 소개 자 사용은 큰 캐뉼라의 초기 삽입으로 발생할 수있는 충격을 최소화하는 역할을한다. 우리는 유사한 광학 프로브는 상업 벤더 (Braintree 과학, Braintree, MA)에서 사용할 수 여기에 유의하십시오. 그들의 장치는 배터리 전원 광원 및 광학 섬유를 사용합니다. 현재 작업에서 우리는 폐 역학의 반복 측정과 절차를 테스트하지만, 이러한 삽관 법은 그냥 간단하게 LPS (12)의 반복 배달 설명 된 바와 같이, 폐에 화학 물질이나 세포를 심어하는 데 사용할 수 있습니다. 또한,보다 원시적 인 삽관 법 절차와 사전 보고서는 개별 마우스 <s...

1999 년 브라운 외이 있습니다. 마우스 폐 1 삽관하는 방법을 설명하는 논문을 발표했다. 이러한 기술은 종 방향 연구 2 개인 마우스에 반복 폐 기능 또는 bronchoalveolar 세척을하고있어서 상당한 유틸리티가 있습니다. 그 원래의 종이 있기 때문에, 마우스 삽관 3-9에 다른 방법을 설명했습니다 몇 가지 다른 논문도했습니다. 이러한 방법의 모든 성공적으로 사용할 수 있지만, 그들은 일반적으로 상당한 훈련 또는 비용이 필요합니다. 이러한 삽관과 주요 문제 중 하나는 삽관 법의 캐뉼라 방식으로 기관 중 삽입 가까워 것입니다, 캐뉼라 자체가 빛과 따라서이 가야 할 곳의 시각화를 차단합니다. 따라서, 삽입은 가장 중요한 시간에 맹인이된다. 이 논문에서 우리는 간단하고 저렴한 비용으로함으로써 상대적으로 약간의 훈련 또는과 성공적인 삽관을 확보,이 시각화 문제를 제거하는 방법을 보여줍니다경험.

<table border="1"><tbody><tr><td> 자료 </td><td> 회사 </td><td> # 카탈로그를 </td><td> 논평 </td></tr><tr><td> 삽관 법의 캐뉼라 </td><td> BD Insylte, 스파크, MD 또는 Jelco Optiva, Carlsbad, CA </td><td></td><td> 1 인치 길이, 20 게이지 정맥 주사 (IV) 카테터 </td></tr><tr><td> 광섬유 케이블 </td><td> 에드먼드 광학, 배 링턴, NJ </td><td> # NT02-542 </td><td> 약 2 피트 0.5-mm 광섬유의 길이 (통신 학년 플라스틱 섬유). 기관에 삽입되는 섬유 끝의 가장자리가 부드럽게 1000 그릿 모리 용지에 몇 초 동안 팁을 드래그 ≈ 2cm 끝에서 섬유를 개최하고 작은 원을 만들어 둥글게해야합니다. </td></tr><tr><td> 광원 </td><td> Volpi </td><td> NCL-150 </td><td> 우리는 훨씬 낮은 와트와 150 W 할로겐 광원, 이와 동등한 광원을 사용하지만사용할 수 있습니다. </td></tr><tr><td> 실리콘 고무 마개 </td><td></td><td></td><td> # 1 실리콘 고무 마개는이 예제에 사용되는 광원에 맞는. 다른 광원는 다른 크기를 필요로 할 수 있습니다. </td></tr><tr><td> 작은 실리콘 고무 튜브 </td><td> 콜 - 팔머 </td><td> EW-96410-13 </td><td> 실리콘 고무 튜브의 ≈ 1.5 cm 피스 (0.8 내부 직경 4mm 외경) </td></tr><tr><td> 각진 지원 스탠드 </td><td></td><td></td><td> 우리는 플렉시 글라스에서 constucted되어 있지만, 스레드 또는 와이어 거의 수직 각도로 마우스를 잡아 부착 할 수 있습니다에 대한 어떤 자료를 사용할 수 있습니다. </td></tr></tbody></table>

마우스 폐 삽관 법의 간단한 방법

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

폐 기능 측정을위한 쥐를 intubate하는 간단한 절차 제한된 숫자 나 값 비싼 동물과 세로 방향의 연구에 몇 가지 장점을 얻을 수 있습니다. 이 더 정기적으로 수행되지 않는 이유 중 하나는이 그것을 달성 할 수있는 방법을 설명하는 여러 출판 연구 임에도 불구하고, 상대적으로 어려운 것입니다. 이 논문에서 우리는이 삽관과 관련된 주요 장애물 중 하나 삽관 법의 전체 시간 동안기도를 시각화의를 제거하는 절차를 보여줍니다. 방법은 마우스 기관에 삽관 법의 캐뉼라를 직접 할 수있는 소개 자 역할을하는 0.5 mm fiberoptic 광원을 사용합니다. 우리는 적어도 몇 주 시간 과정을 통해 개인의 쥐 폐 기계를 측정하는이 절차를 사용하는 것이 가능하다는 것을 보여줍니다. 기술은 비교적 적은 비용과 전문 지식을 설정할 수 있습니다, 그리고 그것은 정기적으로 상대적으로 약간의 훈련을 수행 할 수 있습니다. 이 MAK해야합니다이 가능한 연구실은 정기적으로함으로써 이에 필요한 마우스의 수를 최소화하고 자신의 제어로 각 마우스를 사용하여 통계 전력을 증가, 개인 마우스의 종 방향 연구를 수 있도록,이 삽관 법을 수행 할 수 있도록 전자.

방법의 평가, 우리는 27.7의 평균 중량 (± SEM) ± 0.40 g없이 네 20주 세의 남자 BALB / C 마우스를 사용했습니다. 이전 11 설명 된대로 폐 저항이 시스템을 사용하여 측정 된 곳들은, 다섯 경기를 연속으로 주를 공부했다. 각 마우스 IP 주입을 통해 케타민 (100 μg / g BW) 및 염분의 xylazine (15 μg / g BW)와 anesthetized했습니다. 위에서 설명한대로 그들은 그 다음 intubated되었습니다. 캐뉼라가 기관이 아닌 식도에 있는지 여부를 의심이있는 경우, 이것은 작은 치과 미러를 사용하여 유효성을 검사 할 수 있습니다. 냉동고에 거울을 유지하고, 카테터의 Luer 허브의 앞에 장소를 필요로 할 때. 카테터가 기관에 있으면 exhaled 호흡이 거울에 보이는 응축수를 형성합니다. 삽관 후, 우리는 마우스는 2 Hz의 속도와 0.2 ML의 갯벌 볼륨과 통풍이 된 환풍기 및 측정 폐 저항에 마우스를 연...

본 논문은 폐 기능 측정 또는 쥐가 복구 나중에 시간에 공부를 할 수 있습니다 폐 기지에 대한 쥐를 intubating의 striaghforward하고 효율적인 방법을 설명합니다. 절차는 직접 기관을 비춰 저렴한 fiberoptic 광원을 포함한다.

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

본 절차의 전반적인 목표는 마우스에 기관 내 삽관을 하여 기계적 환기를 실시하거나 액체를 주입하는 것입니다. 이를 위해 먼저 캐뉼라와 광원을 조립합니다. 두 번째 단계는 마우스의 상악 절치로 마우스를 수직으로 매다는 것입니다.기관 삽관을 위해 직선 경로가 확보되도록 머리와 몸을 조정한 후, 섬유 광학 유도 catheter와 cannula를 성대를 통해 삽입합니다. 최종적으로 광섬유를 제거하고, cannula가 장착된 마우스를 환기 또는 설치를 위해 앙와위로 눕힙니다. 좋습니다, 오늘은 마우스 폐에 기관 삽관을 하는 간단한 절차를 시연하겠습니다.시각화는 매우 중요합니다. 마우스의 위치 선정은 캐뉼라 삽입에 있어 결정적인 단계이며, 약간의 연습이 필요하기 때문입니다. 누구나 짧은 시간 내에 이 과정을 반복해서 수행할 수 있어야 합니다. 오늘 이 절차를 시연할 분은 폐의학 분과 및 의과대학의 주니어 교수인 Dr.Sandy Doss입니다. 첫 번째 단계는 준비 과정입니다.성체 마우스를 위한 캐뉼라를 준비하며, 길이는 1~1.5인치, 20게이지인 IV 카테터를 사용합니다. 다음으로, 0.5밀리미터 길이의 광케이블을 절단하여 끝부분을 매끄럽게 다듬어 광섬유 케이블을 준비합니다. 절단 후, 광섬유의 끝부분을 잡고 작은 원을 그리듯 움직여 팁이 1000그릿 에머리 페이퍼에 닿게 합니다.반대쪽 끝을 광원 개구부에 맞게 크기가 조정된 실리콘 고무 마개에 삽입합니다. 먼저, 18 gauge 바늘을 밀어 넣습니다. 다음으로, 광섬유를 바늘 구멍을 통해 삽입한 후 바늘을 제거합니다.그런 다음 고무 마개를 150 watt 할로겐 광원에 연결합니다. 다음으로, 짧은 실리콘 고무 튜브 속으로 광섬유 케이블을 삽입합니다. 광섬유 케이블을 조정할 수 있는 상태를 유지하면서 튜브를 제자리에 고정합니다.위치가 잡히면, 실리콘 튜브를 캐뉼라의 루어 끝부분에 딱 맞게 삽입합니다. 광섬유 케이블의 위치를 조정하여 케뉼라를 통과해 팁 앞쪽으로 약 4 mm 정도 돌출되도록 합니다. 모든 준비가 완료되면, 마취된 마우스의 상악 절치를 조심스럽게 고정하여 수직 지지대에 매답니다.고정이 완료되면, 아주 조심스럽게 혀를 당겨 엄지와 검지로 잡습니다. 중지를 목과 플라스틱 지지대 사이에 배치하고 검지로 혀에 견인력을 가합니다. 손가락과 엄지를 사용하여 입을 벌리고 삽관 경로를 직선화합니다.여기에 표시된 것처럼 목 뒤에 가운데 손가락을 대어 머리 각도를 조절합니다.

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연구

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의학

쥐 호흡 생리학과기도 염증 세포의 샘플링의 반복 측정이 바람직하지만, 일반적으로 가능하지 않습니다. 여기 구두기도 염증 세포의기도 기능 항 진성과 샘플링의 반복 측정을 허용 쥐를 intubating에 대한 반복 방법을 설명합니다.

에어웨이 저항 측정 및 마우스에 Bronchoalveolar 세척 유체 샘플링에 대한 가역, 비침습 방법

이 비디오는 폐 점안, 고정 및 폐 용적 측정을 위해 기관에 액체를 주입하는 간단하고 신뢰할 수 있는 방법을 설명합니다.

폐 주입 및 고정: 기관에 액체를 주입하고 폐를 고정하여 고정된 폐 용적을 측정합니다.

우리는 2.0 mm 검경과 이경을 사용하여 직접 후두경을 통해 마우스에서 기관 내 삽관을위한 간단하고 신뢰할 수있는, 그리고 상대적으로 저렴한 방법을 개발했습니다. 이 기술은 atraumatic이고 만성 실험에서 반복 측정에 사용될 수있다. 우리는 우수한 기관 절개 또는 이전에 비수술 적 방법을보고 찾을 수 있습니다.

마우스의 기관 내 삽관<em&gt;를 통해</em이경 사용&gt; 직접 후두경

인간 폐 질환의 상태를 본뜬 모델의 사용은 특정 질환의 병태 생리학 및 / 또는 병인을 연구 및 치료 적 개입을 개발에 중요하다. 여기에 직접 마우스의 폐에 외인성 물질을 제공 할 수있는 비 침습적 인 기관 내 삽관 방법이 제시된다.

비 침습적 기관 내 삽관 마우스 폐의 병리학 및 생리학을 연구하는

시약의 기관 내 삽관 매개 (IMIT) 점안 호흡기 질환뿐만 아니라 폐에 직접 치료 시약을 주액하는 방법을 연구 우수한, 비 침습적 방법이다. 이 임상 시험에 적합한 신속하고 재현성이 높은 방법이다.

삽관 매개 기관 내 (IMIT) 떨어 뜨림 : 비 침습적, 폐 별 전달 시스템

이 논문의 목적은 크게 폐암 또는 다른 병리와 설정 및 마우스 폐의 분석에 도움이 될 간단한 방법을 설명하는 것입니다. 우리는 간단하고 확실하게 폐 instillations, 정착, 폐 용적 측정을 수행하는데 3 프로토콜을 제시한다.

마우스 폐 암 연구에 유용한 점안 및 고정 방법

이 문서에서는 삽관을 통해 마우스 기관에 직접 블레오 마이신 관리를위한 신속하고 간단한 방법을 제공합니다. 이러한 방법의 주요 장점은 마스터 높은 재현성 쉽고, 특수 장비 나 긴 회복 시간을 요구하지 않는다는 점이다.

마우스의기도 신속 삽관 용 개선 된 방법

쥐에서 실험제의 INTracheal (IT) 투여는 종종 말단 폐에 비대칭 전달을 초래한다.  이 보고에서는, 우리는 살아있는 마우스에 있는 각 폐를 비 작동가능하게 캐뉼기 위하여 직접적인 기관내 (IB) 접근을 기술합니다.  이러한 접근법은 하나의 폐에 제제를 선택적으로 투여하기 위해 사용될 수 있거나 또는 두 폐에 대한 대칭에이전트 전달을 개선하기 위해 적응될 수 있다.

마우스 폐 내 선택적 에이전트 침착을 개선하기 위한 직접 기관내 투여

이 문서의 목적은 실험실 마우스의 정교한 삽관 방법을 설명하는 것입니다. 이 방법은 비침습적이며, 따라서 호흡기 기능의 연속 모니터링 및 / 또는 폐로의 치료 의 주입을 필요로하는 연구에 이상적입니다.

마우스에서 반복된 Orotracheal 삽관

환기를 유지하고 저산소증을 피하면서 왼쪽 폐 허혈 재관류 (IR) 손상을 만드는 마우스 수술 모델.

Orotracheal 삽관 및 환기 폐 허혈 재관류 수술의 마우스 모델

이 프로토콜은 마우스를 최적으로 배치하고 카메라 기반 검이경을 경구로 삽입하면 성문을 시각화하고, 조직 외상을 최소화하면서 신속한 삽관을 수행하며, 폐에 액체를 일관되게 전달할 수 있는 방법을 보여줍니다.

쥐의 폐에 액체를 전달하기 위한 개선된 방법론: 소비자 검이경을 사용한 삽관

학습하세요 마우스 폐 삽관법을 통해 기계적 환기 및 액체 주입을 수행하는 효율적인 방법을. 섬유광원을 활용한 이 기술은 폐 기능 측정 연구에 필수적인 비용 효율적인 실험 기법입니다.

마우스 폐 삽관 법의 간단한 방법

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