Name: (A)의 안전주의 사항 및 운영 절차 BSL-4 실험실 : 1. 바이오 안전성 레벨 4 정장 연구소 스위트 출입국 절차 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-03T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 54 s
Description: 학습하세요 양압 보호복 착탈 및 BSL-4 실험실 출입 절차를 통한 고위험 병원체 연구 안전 관리 방법. 개인 보호 장비 점검과 화학 샤워를 활용한 오염 제거 과정을 상세히 확인할 수 있습니다.

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이 출판물의 내용이 미국 보건복지부 또는 저자와 제휴한 기관 및 회사의 견해나 정책을 반드시 반영하는 것은 아닙니다. KJ, MRH 및 LB는 Battelle Government Services, Inc.의 직원으로 이 작업을 수행했습니다. Tunnell Government Services, Inc.의 직원으로서의 JHK; Lovelace Respiratory Research Institute, Inc.의 직원인 MGL, Tunnell Government Services 및 Lovelace Respiratory Research Institute는 계약 번호에 따라 NIAID와의 주요 계약에 따라 Battelle Memorial Institute의 하청업체입니다. HHSN272200700016I.

1. 매일 외부 점검 <ol><li> 안전 시스템을 확인합니다. 공기 시스템 호흡 확인 깨고 공기 시스템을 백업, 유출 오염 제거 시스템 (EDS) 시스템, 화학 샤워 시스템, 양방향 공기 흐름 및 오토 클레이브 기능 (그림 1). </li></ol> 2. 연구소 입국 절차 <ol><li> 연구소 직원에 의해 버퍼 복도 입구 절차 <ol><li> 인사 입 / 출력 로그 북에서 연구에서, 입구, 실험실 위치 및 병원균의 시간을 직원 개인의 이름을 입력합니다. 자기 보드의 실험실 위치를 나타냅니다. </li><li> 실험실 &#39;시스템이 제대로 작동하고있는 BSL-4 양복을 보장하기 위해, 외부 시스템이 확인되었으며, 실험실이 매일 외부 시스템 안전 체크리스트에 항목 (그림 1)에 대한 해제되어 있는지 확인합니다. </li><li> 그 실험 실내의 압력을 보장하는 법안을 유지 부압 설정치 이내ER 방향의 공기 흐름은 빌딩 자동화 시스템 (BAS) 외측 변경 입실 외부 모니터를 확인한다. 실내 압력이 정상 범위 내에 있지 않은 경우, 또는 바이오 시설 직원에게 통지하고 정상 범위와 같은 압력까지 복귀 실험실 항목 지연. </li><li> 실험적인 작업 다음과 같은 생물학적 폐기물 및 / 또는 세탁물의 살균 오토 클레이브의 가용성을 보장합니다. </li><li> 인사 입 / 출력 로그 북 근처에있는 시설의 공급을 포함하는 창고에서 스크럽, 양말, 수건을 가져옵니다. </li></ol></li><li> 연구소 직원에 의해 외부 변경 룸 입학 절차 : <ol><li> 규제와 biocontainment 실험실에 문서 액세스 전체 보안 요구 사항. 외부 변화 룸을 입력합니다. </li><li> 모든 거리 의류, 속옷, 보석과 시계를 제거 스크럽을 돈과 스위트 룸으로 진행합니다. </li></ol></li><li> 긍정적 인 압력 보호 복 검사 라하여 무결성 테스트소송 룸에서 boratory 직원 수 : <ol><li> 적절한 크기의 양압 보호 복을 획득하면, 모든 구멍, 눈물, 펑크 포인트, 심 입술, 또는 약점을 찾고 소송의 육안 검사를 수행합니다. 장갑이 손상 될 가능성이 가장 높은 곳이기 때문에, 철저하게 외부 정장 장갑을 검사합니다. </li><li> 변경 장갑은 적어도 매 7 일 또는 장갑에 손상이 확인 된 경우. <ol><li> 외부 정장 장갑을 교체하려면, 기존의 정장 장갑에서 덕트 테이프를 제거 슬리브에 O 링을 출시하고, 기존의 정장 장갑을 제거합니다. </li><li> 소송의 팔목에 새 장갑을 넣고 장갑 전체 커프를 포함하고 엄지 손가락이 올바른 위치에 있는지 확인합니다. , 장갑 위에 O 링을 배치 커프의 홈에 O 링을 장착하고, 외부 정장 장갑을 확보하기 위해 덕트 테이프를 사용합니다. </li><li> 덕트 테이프와 O 링 위에 장갑 커프를 접어 덕트 테이프의 하나의 마지막 조각으로 장갑을 밀봉하고, 새로 아타 재 - 검사CHED 장갑입니다. </li></ol></li><li> 적어도 일주일에 한 번 지퍼에 지퍼 윤활제의 얇은 층을 적용합니다. </li><li> 헤드 커버 뒤에 슈트 내부 덕트 테이프 또는 알루미늄 압력 시험 캡 하나와 배면의 왼쪽에있는 배기 밸브의 각각을 커버하고, 정장 폐쇄 지퍼. </li><li> / 빠른 연결하거나 연결을 끊고 소송에 호스 연결 각 호흡 라인의 끝에 첨부 파일을 연결합니다. 팔과 다리는 회사가 될 때까지 소송을 팽창 및 수직 위치로 소송을 배치합니다. 공기 공급 장치를 분리합니다. </li><li> 과도한 압력이 소송에 심각한 손상을 줄 수 있으므로 소송을 통해 가압이어야한다. 철저 약 5 분 동안 공기 누출의 표시에 대한 소송을 검사하고 시각적으로 디플레이션의 징후에 대한 소송을 검사합니다. 과잉 압력이 소송에 심각한 손상을 줄 수 있으므로 소송을 통해 가압되지 않았는지 확인합니다. </li><li> 소송이 탄력을 잃게되면 다시 inflati에 의해 누출에 대한 소송을 체크소송을 ng를. 듣고 소송에서 누출을 느낀다. 필요하다면, 비누 용액으로 보호 한 벌의 모든 표면을 스프레이. 누수에 대한 몇 가지 일반적인 지역은 양복, 지퍼 영역 및 정장 재료로 바이저 재료의 접합의 솔기이다. 솔기와 바이저에 특히주의를 기울이고, 누출을 나타내는 거품의 형성을 모니터링합니다. 배기 밸브가 완전히 밀봉되어 있는지 확인하십시오. </li><li> 덕트 테이프로 일시적으로 작은 직물 누수를 복구합니다. 양복 수리 키트의 자료를 사용하여 전체 영구 수리. 소송이 쉽게 복구 할 수없는 경우, 알코올 계 살균제로 소송을 오염을 제거하고, 정장 방에서 제거합니다. 소송은 수리가 불가능한 경우, 사용으로 소송을 은퇴 및 소각. </li><li> 무결성 검사가 완료되면, 소송의 압축을 풀고 배기 밸브의 덮개를 제거합니다. 배기 커버를 제거하지 않으면 여과를 방해하고 심각하게 옷을 손상시킬 수 있습니다. 테스트를 입력하고 정보를 복구긍정적 인 압력 정장 무결성 테스트 로그인합니다. </li></ol></li><li> 소송 룸에서 긍정적 인 압력 양복을 걸치고 및 BSL-4 정장 연구소에 입력 : <ol><li> 수술의 다리에 테이프 양말. 돈 내부 니트릴 장갑과 덕트는 수술의 소매로 테이프. 돈 내부 장갑을 통해 (안 테이프) 니트릴 장갑 한 쌍의 제 2. 필요한 경우, 증가 가시성 유리 청소기로 내면 실드를 청소합니다. </li><li> 돈 긍정적 인 압력 정장, 확인 소송이 완전히 폐쇄 압축하고, 호흡 공기 라인에 맞게 연결되어 만들기. BAS 모니터는 알람 무료입니다 때 BSL-4 정장 실험실에 입력합니다. </li><li> 소송 방에서 호흡 에어 라인에서 분리를 BSL-4 정장 연구소를 입력하고 화학 샤워를 위해 버튼에 액세스 할 수있는 요청을 밀어합니다. </li><li> 공기 내압 APR () 문이 활성화되면, 상기 도어 주변 시일 뺐다 도어 자석 분리된다. 화학 샤워 RO 내의 4 월 문다른 하나는 항상 봉쇄를 유지하기 위해 열려있을 때 엄마는 폐쇄해야 하나 4 월 문을 의미 연동된다. 화학 샤워 실을 통과하기 위해, 도어 프레임을 다시 팽창 완전히 밀봉 방광 기다립니다, 양복 방에 4 월 문을 닫고 실험실로 이어지는 두 번째 4 월 문을 활성화합니다. </li><li> BSL-4 정장 실험실에 진입하면, 가능한 호흡 공기 라인에 소송을 연결합니다. </li><li> 더 진행하기 전에, 실험실로 이어지는 4 월 문을 닫고 자동 화학 샤워 영역과 소송을 소독하기 위해 활성화되는 화학 샤워를 보장합니다. 소독 후에, 화학 샤워 실에서 4 월 문은 스위트 룸에서 다시 열 수 있습니다. 주기는 연락처 시설 관리 요원을 시작하지 않습니다. </li><li> 소송이 통합 부츠가없는 경우, 문, 화학 샤워 4 월 문을 종료 옆에있는 선반에있는 부츠 한 켤레를 돈. 추가 위험 / 위험을 방지하기 위해, 비켜가 있는지 확인rshoes 폼 피팅과 아늑한입니다. </li></ol></li></ol> BSL-4 정장 연구소 내 3. 운동 <ol><li> 분리 및 실험실에 걸쳐 공기 라인에 다시 연결하여 실험실 주위에 자유롭게 이동합니다. 이상 구부리거나 접지에 가까운 항목을 검색 할 때 양압을 유지하기 위해 공기 라인에 접속 된 유지. 참고 : 이러한 움직임은 에어 라인에서 연결이 끊긴 상태에서 소송 내에서 호흡 공기를 배기 및 실험실 공기가 소송에 어떤 위반을 입력 할 수 있습니다 부압을 생성합니다. </li><li> 다양한 알람과 현재의 제품군 상태에 대한 실험실에 걸쳐 모니터를 관찰한다. </li></ol> BSL-4 정장 연구소 4. 실험 종료 절차 <ol><li> 싱크 또는 내부 복도에서 플라스틱 덩크 탱크 세제 살균제 청소기에 장갑을 낀 손을 오염을 제거. 더 덩크 탱크가 없으면 충분히 살균제 낀 손 살포. &lt;/ 리&gt; <li> 눈에 보이는 물질에 대한 부츠 나 부츠의 바닥을 검사합니다. 부츠가 깨끗한 경우, 덧신을 제거하고 화학 샤워 4 월 문 옆에있는 선반에 배치합니다. 호흡 공기 라인에서 실험실, 분리의 모든 내부 문을 닫고, 화학 샤워를 진행합니다. </li><li> 부츠가 더러운 경우 세제 살균제 청소기로 싱크대에 철저히 씻는다. </li></ol> 5. BSL-4 화학 샤워 절차 <ol><li> APR에 문을 여는 버튼에 액세스 할 수있는 요청을 밀어 화학 샤워를 입력하고 문을 닫습니다. 샤워 내부 호흡 공기 라인에 소송을 다시 연결합니다. </li><li> APR에 문이 닫히면, 화학 샤워주기가 자동으로 적절하게 양복과 화학 샤워 영역을 소독 세제 살균제 청소기의 적절한 혼합물을 해제 활성화됩니다. 주기가 자동으로 시작되지 않으면, 홍수 핸들을 잡고 분리합니다. 밀어, 약 1 분 동안 소송을 문질러화학 소독제 탱크 배수 완전히 방지하기 위해 제자리에 다시 처리 홍수. 수동 샤워주기는 사용할 수 없습니다. </li><li> 세제 살균제 청소기 솔루션을 포함하는 플라스틱 욕조에 장갑을 낀 손과 발을 배치하여 장갑과 발 누출을 점검 화학 샤워 실 내부. 입술 또는 외부 장갑에 약한 부분, 외부 장갑 아래에 액체 또는 습기를 찾아 눈물을 확인합니다. 누출이 외부 장갑 중 하나에서 발견되는 경우, 샤워 사이클이 완료 될 때까지 기다려 외측 정장 장갑 및 최 내측 장갑을 제거하고 플라스틱 욕조 외부 장갑을 떠난다. </li><li> 소송의 모든 표면에 화학적 소독제를 배포하는 긴 처리 스크럽 브러시 또는 손으로 양복과 통합 정장 부츠 스크럽. 철저하게 샤워의 물주기 동안 세제 살균제 청소기의 소송을 씻어. </li><li> 화학 및 D에 물의주기 동안 모두 이전 실험 공기에 노출 된 흡입 공기 라인을 분리소송의 연결을 isinfect. 어떤 세제 살균제 청소기의 공기 라인 연결을 씻어. 단절없이 세제 살균제 청소기는 달리 공기 라인 연결을 청소할 수 없다. </li><li> 소송 방으로 이어지는 문을 열고 종료 한 후 닫습니다. </li><li> 비상 사태의 경우, 이러한 손해 위협 컷 화재로, 5.2에 설명 된 절차를 따릅니다. </li></ol> 6. 스위트 룸 절차 화학 샤워를 종료 한 후 <ol><li> 큰 수건으로 소송의 외부를 닦아냅니다. , 긍정적 인 압력 소송의 압축을 풀고 외부 정장 장갑에서 한 손으로 제거하고 수분을주의 깊게 외부 니트릴 장갑의 외부를 검사합니다. </li><li> 수분이 외부 정장 장갑을 통해 누출 된 경우, 외부 정장 장갑 및 외부 니트릴 장갑을 제거하고 생물 학적 폐기물 쓰레기통에 폐기하십시오. 반면를 제거하고 검사를 반복합니다. </li><li> 옷을 제거하고 건조 부패 d를 방지하기 위해 소송의 외부를 건조 계속amage. 유리 세정제와 얼굴 방패의 내부 스프레이 건조 닦아냅니다. 건조까지 소송을 끊습니다. 수술에서 덕트 테이프와 내부 니트릴 장갑을 제거하고 지정 학적 폐기물 쓰레기통에 이러한 항목 폐기하십시오. </li><li> 소송 로그에 소송에 누출 또는 수리를 문서화 및 시설 관리에보고. </li><li> 내부 변경 방에 진행 더러운 수술과 양말을 제거하고 지정된 세탁 빈에 배치합니다. 진행 및 개인 샤워로 입력합니다. </li></ol> 7. 개인 샤워 및 외부 변경 방 출구 절차 <ol><li> 샤워를 활성화하고 완벽하게 비누와 물로 3 분의 최소 머리와 몸을 씻는다. 개인 샤워를 종료하고 외부 변경 객실로 진행합니다. </li><li> 오프 건조하고 돈 거리 의류, 바깥 변경 방을 종료, 지정된 세탁 빈에 사용 된 수건을 배치하고, 버퍼 복도를 진행합니다. </li><li> 인사 입 / 출력 로그 북에 종료 시간을 표시하고 실험 예를 나타냅니다그것은 로케이터 보드. </li></ol>

<ol><li>of Allergy and Infectious Diseases. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22NIAID+Category+A%2C+B%2C+and+C+Priority+Pathogens.+National+Institute+of+Allergy+and+Infectious+Diseases%22">NIAID Category A, B, and C Priority Pathogens. National Institute of Allergy and Infectious Diseases</a>. , National Institute. Bethesda, MD, . 
 <a target="_blank" href="http://www.niaid.nih.gov/topics/biodefenserelated/biodefense/pages/cata.aspx">http://www.niaid.nih.gov/topics/biodefenserelated/biodefense/pages/cata.aspx</a> (2013).</li>
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<li>Shurtleff, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+regulations%2C+safety+considerations+and+physical+limitations+on+research+progress+at+maximum+biocontainment%5BTitle%5D)+AND+%22Viruses%22%5BJournal%5D)">The impact of regulations, safety considerations and physical limitations on research progress at maximum biocontainment.</a> Viruses. 4, 3932-3951 (2012).</li>
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</ol>

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우리는 매우 위험 (리스크 그룹 4) 병원체 작업을위한 포트 데 트릭에서 NIH / NIAID 통합 연구 시설에서 사용되는 BSL-4 입구와 출구 절차를 설명했다. BSL-4 입구와 출구 절차를 시각화 한 목적은 실험실 획득 감염을 방지하기 위해 같은 병원체와 작업하는 동안 실험실 직원의 안전의 중요성을 강조하는 것입니다. 음의 압력, BSL-4의 실험실은 병원체 실험실에 포함 될 수 있도록하기 위해 안쪽 방향의 공기 흐름을 유지한다. 실험실 직원과 공기 병원체의 실험실 직원 완화 접촉에 의해 착용 전용 호흡 공기 시스템과 양압 정장. 실험실 직원이 BSL-4 실험실을 떠날 후, 화학 샤워는 잠재적으로 오염 소송의 표면을 소독하기 때문에 건물의 나머지 부분과 소송에서 변화하는 사람의 잠재적 인 오염을 방지 할 수 있습니다. positi의 무결성로적이 압력 소송 잠재적 인 병원균에 노출을 방지하기위한 몇 가지 중요한 기본 장벽 중 하나입니다, 직원은 입학 전에 정장 누출 및 BSL-4의 실험실에서 종료 한 후 확인이 필요합니다. 누수가 발생하면 직원이 누출 경보 시설 관리의 위치를 ​​식별합니다. 이 방법은 높은 결과 병원균에 대한 노출에 대한 신속한 응답을 보장합니다. 모든 노력을 실험실 직원에게 위험을 제거하는 데 걸리는 있지만, 소송의 위반은 유리, 날카로운 물건, 동물의 침략, 또는 연속 사용의 사용을 통해 발생할 수 있습니다. 여기에 제시된 절차는 일반적으로 CDC (2)에 의해 설명 된 BMBL 사양을 수행하는 동안,이 절차는 IRF-프레드릭에 따라 다릅니다. 각 BSL -4- 설비 실험실 작업의 정확한 방법에 영향을 미칠 다른 빌딩 설계 사양을 갖는다. BSL-4의 실험실을 입력하고 종료에 대한 대체 절차는 이러한 laboratori의 설계 및 운영에 부분적으로 의존에스. 또한, 각 국의 정부 규제는 각국 BSL -4- 실험실 절차에 영향을 미칠 수있다. 그럼에도 불구하고, BSL-4 절차에 대한 일반적인 이해와 비슷한 건물과 고위험 병원체 연구에 참여 외부 협력자의 디자인을 고민하는 건강 관리자에게 도움이 될 것입니다 실험실 직원의 안전을 지원하는 시스템을 모니터링 건물. 더 실험실 직원이 BSL-4 실험실 입구와 출구 절차 및 BSL-4 조건에서 실험을 수행 훈련 된 바와 같이 생산성이 증가 할 것이다. 외부 협력자와 프로토콜을 설계 할 때, 충분한 시간에도 기본 실험실 작업을 수행하기 위해 할당하고, 결과를 제공하기위한 시간 프레임의 기대 BSL -4- 실험실에서 작업 내재 어려움을 수락하여 조정되어야한다. 일반화 된 가정은 모든 실험 BSL-2에서 수행한다는 것입니다 (예를 들어, 2 시간)BSL -4- (예를 들면, 4 시간)에서 수행하는 시간의 두 배를 필요로한다.

이국적인 높은 결과 병원균의 과학적 관심은 꾸준히 최근 몇 년 동안 증가하고있다. 특히 관심 잠재적 생화학 무기 신흥 고려 병원균 또는 재 신흥 에이전트입니다. 연구 우선 순위 및 위험의 관점에서,이 병원체는 생물 테러 카테고리 AC 에이전트 1과 질병 통제 예방 센터 (CDC)에 의해 분류된다. 또한, 높은 결과 병원균은 수입, 수출 및 액세스 규제에 관해서 선택 에이전트 [독소]로 분류됩니다. 미국, BSL-2, BSL-3, BSL-4 억제를 필요로 특별한 병원체와 일을 준수해야 바이오 안전성 규정과 절차에 미생물 및 생물 의학 연구소 (BMBL)에서 바이오 안전성에 설명되어 있습니다 2. 인간과 / 또는 동물에게 가장 중요한 건강 위험을 인식하는 병원체는 BSL-4 병원균으로 간주됩니다. 따라서, BSL-4 연구는 특히주의가 필요 highlY 전문 교육, 강력하고 중복 시설 인프라 3. 높은 억제 빌딩 운영 시스템 관리에 대한 요구 사항을 이해 BSL-4와 관련된 연구 과제의 일반적인 인식 및 엔지니어링 제어 루틴 검증 테스트를 개선하는 것은 필요하다. 우리는 시각적으로 운영 및 바이오 안전성의 증가 된 기준을 제시하고, BSL-4 억제 손 -에 대한 연구의 결과로 증가 어려움하여 이해를 발전하는 것을 목표로하고 있습니다. 시설 하우징 BSL-4 정장 연구소는 엄격한 요구 사항을 포함하지만, 전용 nonrecirculating 환기 시스템, 엄격한 폐기물 처리 시스템에 한정 4,5를 처리하고, 빌딩 자동화 시스템하지 충족해야합니다 (BAS) 파 -2,6,7-. 실험실 급기 번 여과하고, 배기 이중 필터링 매년 재 인증되어 고효율 미립자 공기 (HEPA) 필터를 통해서이다. 또한,BMBL 일반 폐기물 시스템에 릴리스하기 전에 고체 폐기물 수집 및 모든 배출 물질의 오염 제거의 오염 제거에 대한 엄격한 요구 사항을 부과한다. 다수의 중복은 BSL -4- 병원체의 어떤 유형의 방출을 방지하는 시스템에 내장된다. BAS 모니터 설비 원격 조작하여 문제 영역을 찾아 낼 수있다. 시설 지원 시스템은 최적의 동작을 실시간으로 문제의 통지 직원이 매일 확인됩니다. 모든 시스템은 CDC / 시설 운영에 대한 선택 에이전트 및 독소 요구 사항의 분할을 준수하기 위해 반복적으로 시험한다. 물리적 시설에 대한 이러한 표준뿐만 아니라, 선택 에이전트 및 독소 작업 실험실 직원은 사전 또는 선택 에이전트의 주위에 일에 법무부에 의해 보안 위험 평가 (SRA)에 제출해야한다. 또한, 직원은 1 단계 선택 에이전트 (예를 들어, 에볼라 바이러스, 탄저균)를 등록해야합니다 작업지속적으로 개별 연구자 8의 신체적, 정신적 건강을 평가하는 인사 안정성 프로그램 (PRP)이다. 건강 검진은 개인이 안전한 방식으로 BSL-4 억제의 작업을 수행 물리적으로 할 수 있는지 여부를 평가합니다. 정신 건강 검진은 일반 복지, 심리학 복지 및 탄력성 및 직원의 안전 의식을 평가. NIAID에서 선택 에이전트 작업 과학자들은 각 개인이 교육 및 전문 자격 증명, 범죄 기록, 금융 역사, 외국의 영향의 위험을 검사 액세스 국가 기관의 확인 및 문의 (ANACI) 배경 조사를 완료 한 항에있어서, 추가 조사를 받아야. BSL-2 실험실 항목에 비해 최대 봉쇄 항목은 자원, 시간 및 교육의 상당히 큰 투자를 필요로한다. 선택 에이전트 및 독소의 부와 SRA 승인 및 등록 후, 직원은 엄격한 손을-에 받아야 기차BSL-4 정장 실험실에 접근하기 전에 보내고. 연구소 직원은 중요한 기능 및 입 / 출력 과정 (9)의 일일 점검을 포함하여, 시설의 운영에 대한 교육을 받는다. 직원은 실험실 생물 안전성 및 관리에 긍정적 인 압력 정장의 사용에 대한 교육을한다. 폴리 염화 비닐 코팅 폴리 에스테르 직물로 만든 화이트 정장은 포트 데 트릭에서 NIH / NIAID 통합 연구 시설에서 사용된다. 다른 유형 / 양압 정장의 상업 브랜드를 사용하는 시설 입력하고 여기에 설명 된 그보다 BSL-4 실험실을 빠져 나오기위한 다른 운영 절차가 필요할 수 있습니다. 이전에 훈련 이러한 차이를 설명한다이 문서를 사용하는 시설에 연구원. 포트 데 트릭에서 NIH / NIAID 통합 연구 시설에서 정장 훈련은 옷을 걸치고 소송이 제대로 작동 보장, 수리 및 (실험실 내부와 외부) 정장을 유지하고, 실험실 내에서 이동하기위한 적절한 절차를 포함한다. 에이 훈련이 완료 가전, 실험실 직원은 BSL-4 정장 실험실 내에서 작업을 시작할 수 있습니다. 처음에, 또 다른 경험이 풍부한 직원의 멘토 일대일 BSL-4 정장 실험실에 처음 다섯 방문하는 동안 새로 훈련 된 직원. 포트 데 트릭에서 NIH / NIAID 통합 연구 시설에서 독립적으로 해결하려면 새로 교육을받은 직원은 실험실 내부의 실제 작업 시간의 최소 100 시간과 BSL-4 정장 실험실에 (40) 감독 방문의 최소를 완료합니다.

<table><tbody><tr><td>Micro-Chem Plus</td><td>National Chemical Laboratories</td><td>255</td><td></td></tr><tr><td>Windex</td><td>Grainger</td><td>3U560</td><td></td></tr><tr><td>Sperian 알루미늄 압력 테스트 캡</td><td>Honeywell Sperian</td><td>CC0199649</td><td></td></tr><tr><td>Sperian 슈트 수리 키트</td><td>Honeywell Sperian</td><td>CC0199621</td><td></td></tr><tr><td>Sperian 보호복 무결성 테스트 로그</td><td>NA</td><td>NA</td><td>생성 개별 실험실</td></tr><tr><td>Sperian 양압 슈트</td><td>Honeywell Safety Products</td><td>BSL 4-2</td><td></td></tr><tr><td>비눗물</td><td>NA</td><td></td><td>NA 개별 실험실에서 만든</td></tr><tr><td>외부 슈트 장갑 (통조림)</td><td>Fisher</td><td>19-019-601</td><td></td></tr><tr><td>외부 슈트 장갑 (MAPA)</td><td>Fisher</td><td>2MYU1</td><td></td></tr><tr><td>내부 니트릴 슈트 장갑</td><td>Fisher</td><td>19-050-592</td><td></td></tr><tr><td>지퍼 윤활유</td><td>아마존</td><td>B000GKBEJA</td><td></td></tr><tr><td>스크럽</td><td>Cintas</td><td>60975/60976</td><td></td></tr><tr><td>양말</td><td>Cintas</td><td>944</td><td></td></tr><tr><td>덕트 테이프</td><td>팩 - N 테이프</td><td>51131069695</td><td></td></tr><tr><td>수건</td><td>Cintas</td><td>2720</td><td></td></tr><tr><td>O- 링</td><td>O- 링 창고</td><td>AS568-343</td><td></td></tr><tr><td>덧신</td><td>아마존</td><td></td><td></td>B0034KZE22</tr><tr><td>플라스틱 덩크 탱크</td><td>Fisher</td><td>14-831-113</td><td></td></tr><tr><td>출입 일지 NA</td><td></td><td></td><td>NA 개별 실험실에서 만든</td></tr><tr><td>베이비 파우더</td><td>아마존</td><td>44230</td><td></td></tr><tr><td>에탄올</td><td>피셔</td><td>BP2818500</td><td></td></tr></tbody></table>

(a)의 안전주의 사항 및 운영 절차 bsl-4 실험실 : 1. 바이오 안전성 레벨 4 정장 연구소 스위트 출입국 절차

Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 1. Biosafety Level 4 Suit Laboratory Suite Entry and Exit Procedures

Biosafety level 4 (BSL-4) 소송 실험실은 감염 예방이나 치료 옵션이 존재하지 않는 중대한 결과를 초래하는 병원체를 연구하기 위해 특별히 설계되었습니다. 이러한 실험실의 특징은 맞춤형으로 설계된 밀폐 도어, 전용 공급 및 배기 공기 흐름 시스템, 음압 환경, 양압("우주") 슈트의 의무적 사용입니다. 고병원성 병원체를 다루는 실험실 전문가의 위험은 엄격한 교육과 엄격한 안전 프로토콜 및 표준 운영 절차 준수를 통해 최소화됩니다. 연구원들은 BSL-2 실험실에서 대부분의 작업을 수행하며 결과가 큰 병원체에 대한 작업이 필요한 경우 BSL-4 슈트 실험실로 전환합니다. BSL-4 프로젝트를 고려하는 공동 작업자와 과학자는 BSL-4 실험실 공간의 실험적 기술적 한계와 그러한 실험 기간 증가 측면에서 BSL-4 연구와 관련된 문제를 알고 있어야 합니다. BSL-4 보호복 실험실에 출입하는 것과 같은 작업은 BSL-2 및 BSL-3 실험실에 비해 훨씬 더 복잡하고 시간이 많이 걸립니다. 이 특정 기사의 초점은 기본적인 생물 안전성 문제를 해결하고 Fort Detrick에 있는 NIH/NIAID 통합 연구 시설의 BSL-4 실험실에 대한 출입 절차를 설명하는 것입니다. 이러한 절차에는 BSL-4 실험실을 지원하는 외부 시스템 점검, 양압 슈트 검사 및 착용, 실험실 출입, 공기 압력 저항 도어를 통한 이동, 공기 공급 호스 연결 등이 포함됩니다. 우리는 또한 화학 샤워기 사용, 양압 슈트 제거 및 보관을 포함하여 BSL-4 슈트 실험실 내부로의 이동 및 종료에 대해 논의할 것입니다.

직원들은 신중하고 철저하게 BSL-4 시설 내부 안전하고 일관된 관행을 보장하기 위해 이러한 기술 훈련을하고있다. 일일 체크리스트 (그림 1)에 나타낸 바와 같이 설비가 제대로 작동하는지 확인함으로써, 우리는 필요한 관리 및 엔지니어링 모든 컨트롤이 제자리에 안전하고 올바르게 작동 환경을 유지하기 위해 작동하는지 확인 할 수 있습니다. 긍정적 인 압력 소송은 직원에 대한 추가적인 보호 계층을 제공합니다. 이 소송의 적절한 유지 보수 및 사용은 직원 개인 보호에 필수적입니다. 이러한 절차에 대한 엄격한 준수를 통해 더 실험실 획득 감염 포트 데 트릭에서 NIH / NIAID 통합 연구 시설에 기록되지 않았습니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/52317/52317fig1.jpg" /> 그림 1 : 매일 시각적 체크리스트BSL-4에 대한 지원 및 백업 시스템. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52317/52317fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

연구자들은 일반적으로 생물안전성 1등급 또는 2등급(BSL-1/2) 실험에 필요한 절차와 안전 예방 조치에 대해 잘 알고 있지만, BSL-4 슈트 실험실의 실험 절차에 대해서는 익숙하지 않을 수 있습니다. 이 기사는 BSL-4 슈트 실험실 시스템 점검, 실험실 진입, 이동 및 탈출 절차에 대한 자세한 시각적 데모를 제공합니다.

(A)의 안전주의 사항 및 운영 절차 BSL-4 실험실 : 1. 바이오 안전성 레벨 4 정장 연구소 스위트 출입국 절차

Biosafety level 4 (BSL-4) suit laboratories are specifically designed to study high-consequence pathogens for which neither infection prophylaxes nor ...

이 절차의 전반적인 목적은 양압복을 올바르게 착용 및 탈의하고, 생물안전 4등급(BSL-4) 양압복 실험실에 진입하고 퇴실하는 방법을 시연하는 것입니다. 고위험 격리 연구에 처음 참여하는 인원을 위해, 본 절차에서는 양압복 착용 및 BSL-4 양압복 실험실 진입에 수반되는 단계들을 설명합니다. 이 기술을 통해 개인 보호 장구를 점검하고 양압복을 적절하게 멸균함으로써 Fort Detrick에 위치한 NIH 통합 연구 시설(NIH Integrated Research Facility) 인원의 안전을 증진합니다.시연을 진행할 전문가는 Fort Detrick에 위치한 NIH 통합 연구 시설의 기술자인 Ricky Adams입니다. 인원 출입 기록부에 직원 성명, 출입 시간, 실험실 위치, 연구 대상 병원체를 입력하십시오. 실험실 위치를 표시하고 실험실에 출입 가능 상태인지 확인하십시오.실험실실 압력이 적절한 방향성 기류를 유지하는 음압 설정 범위 내에 있는지 확인하려면, 작성이 완료된 시스템 체크리스트를 참조하십시오. 인원 출입 기록부 근처에 위치한 시설 비품 보관실에서 스크럽, 양말 및 수건을 준비하십시오. 보안 출입 통제 지점을 지나 외부 탈의실로 들어간 후, 평상복, 속옷, 장신구 및 시계를 제거하십시오.손을 씻고 방호복실로 이동합니다. 양압 보호복을 선택하여 구멍, 찢어진 부위, 천공 지점, 솔기 터짐 또는 취약한 부분이 있는지 육안으로 검사합니다. 장갑은 손상될 가능성이 가장 높은 항목이므로 외부 보호복 장갑을 철저히 검사하십시오.장갑은 최소 7일마다 한 번씩 교체하거나, 장갑의 손상이 확인된 경우에 교체하십시오. 이 모델의 외부 수트 장갑을 교체하려면, 기존 수트 장갑에서 덕트 테이프를 제거하고 O-링을 소매 쪽으로 밀어 올린 뒤 기존 장갑을 제거합니다. 수트의 커프에 새 장갑을 끼우고, 장갑이 커프 전체를 덮으며 엄지손가락이 적절한 위치에 있는지 확인하십시오.장갑 위에 o-ring을 놓고, 커프의 홈에 o-ring을 안착시킨 후 덕트 테이프를 사용하여 외부 슈트 장갑을 고정합니다. 장갑 커프를 덕트 테이프와 o-ring 위로 접어 덮고, 마지막 덕트 테이프 한 조각으로 장갑을 밀봉한 뒤 새로 장착한 장갑을 다시 점검합니다. 적어도 일주일에 한 번 지퍼에 지퍼 윤활제를 얇게 도포하십시오.다음으로, 슈트 내부의 각 배기 밸브를 덕트 테이프나 알루미늄 압력 테스트 캡으로 덮고 슈트의 지퍼를 잠급니다. 각 호흡 라인 끝에 있는 퀵 디스커넥트/커넥트 어태치먼트를 슈트의 호스 연결부에 연결합니다. 팔과 다리가 팽팽해질 때까지 슈트에 공기를 주입하고 슈트를 직립 상태로 세웁니다.공기 공급을 차단하십시오. 과도한 압력은 슈트에 심각한 손상을 줄 수 있으므로 슈트를 과압하지 마십시오. 약 5분 동안 슈트에 공기 누출 징후가 있는지 철저히 검사하고, 슈트의 압력이 낮아지는 징후가 있는지 확인하십시오.수트의 팽팽함이 줄어들면, 수트를 다시 팽창시켜 누출 여부를 확인하십시오. 수트의 솔기, 지퍼, 그리고 바이저와 수트의 접합부 주변에서 발생할 수 있는 누출 소리를 듣거나 느껴보십시오. 필요한 경우, 누출 위치를 시각적으로 확인하기 위해 수트에 비눗물을 분무하십시오.누설을 나타내는 기포가 형성되는지 관찰하되, 특히 바이저의 이음새 부분을 주의 깊게 확인하십시오. 배기 밸브가 완전히 밀폐되었는지 확인하십시오. 슈트의 지퍼를 열고 배기 밸브의 커버를 제거하십시오.배기 커버를 제거하지 않으면 공기가 빠져나가지 못해 슈트가 심각하게 손상될 수 있습니다. 양압 슈트 무결성 테스트 로그에 테스트 및 수리 정보를 입력하십시오. 다음으로, 양말을 스크럽 바지 다리 부분에 테이프로 고정하십시오.내부 니트릴 장갑을 착용하고 스크럽 소매 부분에 덕트 테이프로 고정합니다. 내부 장갑 위에 니트릴 장갑을 한 겹 더 착용합니다. 필요한 경우, 시야 확보를 위해 안면 보호구 내부를 유리 세정제로 닦아냅니다.양압복을 착용하고 지퍼를 완전히 올린 후 호흡용 공기 라인을 연결하십시오. BSL-4 실험실에 진입하기 전, 건물 자동화 시스템에서 구역 압력이 정상인지 확인하십시오. BSL-4 슈트 실험실에 들어가려면 슈트실에서 호흡용 공기 라인을 분리하고 화학 샤워실 출입 요청 버튼을 누르십시오.화학 샤워실을 통과하려면 수트실로 연결되는 기압 유지(APR) 도어를 닫고 블래더가 도어 프레임을 완전히 밀봉할 때까지 기다리십시오. 실험실로 연결되는 두 번째 APR 도어를 작동시키십시오. BSL-4 실험실로 진입하여 수트를 호흡용 에어라인에 연결하십시오.실험실로 이어지는 APR 도어를 닫으십시오. 화학 샤워가 자동으로 활성화되었는지 확인하십시오. 샤워 사이클이 완료되면 슈트 룸에서 APR 도어를 다시 열 수 있습니다.에어라인 연결 상태를 변경하여 실험실 내부를 자유롭게 이동하십시오. 몸을 굽힐 때에도 가능한 한 에어라인 연결 상태를 유지하십시오. 모니터의 다양한 알람과 현재 스위트 상태를 확인하십시오.BSL-4 실험실 구역을 나가려면, 플라스틱 폐기 탱크에 담긴 세제 소독 세정제로 장갑을 낀 손과 소매 끝부분을 소독하십시오. 폐기 탱크가 없는 경우, 장갑을 낀 손에 소독제를 충분히 뿌리십시오. 호흡용 에어라인 연결을 해제하고 화학 샤워실로 이동하십시오.실험실에서 APR 도어를 열기 위해 출입 요청 버튼을 누르고 화학 샤워실로 진입한 후 문을 닫으십시오. 샤워실 내부에서 보호복을 호흡용 에어라인에 다시 연결하십시오. APR 도어가 닫히면 화학 샤워 사이클이 자동으로 시작됩니다.화학 샤워기 내부에 비치된 세제 소독 세정액이 담긴 플라스틱 통에 장갑을 낀 손과 발을 넣어 누출 여부를 확인하십시오. 외부 장갑에 찢어짐, 갈라짐 또는 취약한 부분이 있는지 확인하고 외부 장갑 아래에 액체가 고여 있는지 살피십시오. 누출이 발견되면 샤워 사이클이 완료될 때까지 기다린 후, 외부 슈트 장갑을 벗어 플라스틱 통에 남겨 두십시오.긴 손잡이가 달린 세척 브러시나 손을 사용하여 슈트와 일체형 슈트 부츠를 문질러 화학 소독제를 슈트 전체에 도포합니다. 샤워기의 물 사이클 동안 세제 소독 세정제가 완전히 제거되도록 슈트를 철저히 헹굽니다. 호흡용 에어라인을 분리하고, 샤워기의 화학 및 물 사이클 동안 슈트의 연결 부위를 소독하고 헹굽니다.작업 완료 후 수트 룸으로 이어지는 APR 도어를 열고, 나간 뒤에 도어를 닫습니다. 큰 수건으로 수트 외부를 닦아 말립니다. 양압 수트의 지퍼를 엽니다.외부 보호복 장갑에서 한쪽 손을 빼고 외부 니트릴 장갑 겉면에 수분이 있는지 주의 깊게 확인하십시오. 다른 쪽 손도 빼낸 후 동일하게 확인하십시오. 보호복을 벗어 걸어두고, 건조 부식 피해를 방지하기 위해 보호복 외부를 계속해서 건조시키십시오.페이스 쉴드 안쪽을 유리 세정제로 뿌린 후 닦아 말립니다. 슈트를 걸어 말린 후, 스크럽복에서 덕트 테이프와 내부 니트릴 장갑을 제거하여 생물학적 위험 폐기물함에 버립니다. 탈의실로 이동하여 스크럽복과 양말을 벗고 개인 샤워실로 들어갑니다.개인 샤워를 마친 후, 퇴실 시간을 인원 출입 기록부에 기입하고 위치 표시판에 실험실 퇴실 상태를 표시하십시오. 직원은 생물 안전 4등급(BSL-4) 시설 내에서 안전하고 일관된 관행을 보장하기 위해 이러한 기술에 대해 세심하고 철저한 교육을 받았습니다. 일일 체크리스트에 표시된 대로 시설이 적절하게 작동하고 있는지 확인함으로써, 안전한 환경을 유지하기 위한 모든 필수 행정 및 공학적 제어 조치가 마련됩니다.양압복은 직원에게 추가적인 보호층을 제공합니다. 이러한 보호복의 적절한 유지 관리와 사용은 보호를 위해 필수적입니다. 이러한 절차와 관행을 엄격히 준수하고 공학적 제어 장치를 적절히 사용하면 실험실 획득 감염을 예방하고 감염성 물질의 밀폐를 보장하는 데 도움이 됩니다.Fort Detrick의 NIH NIAID 통합 연구 시설(IRF)은 현재까지 실험실 획득 감염 사례를 기록하지 않았습니다. 이 영상을 시청하고 나면 양압복을 착용 및 탈의하는 방법과 생물 안전 4등급(BSL-4) 실험실에 출입하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 이러한 절차는 일반적으로 IRF에서 시행되는 방식을 보여주며, 다른 BSL-4 실험실의 절차와는 다를 수 있습니다.다른 생물안전 4등급 실험실에서 작업할 때는 해당 실험실의 특정 프로토콜을 준수하십시오.

safety-precautions-operating-procedures-an-bsl-4-laboratory-1

Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

BSL-4 실험실에서 바이러스 분석을 수행하는 것은 필요한 추가 안전 예방 조치로 인해 BSL-2 실험실에서 수행하는 작업에 비해 더 복잡합니다. 여기에서는 BSL-4 실험실 내에서 사용되는 관행 및 절차에 대한 개요를 제시하여 적절한 Class II 생물 안전 캐비닛 사용, 폐기물 관리/처리 및 샘플 제거를 보여줍니다.

(A)의 안전주의 사항 및 운영 절차 BSL-4 실험실 2. 일반 사례

여기에서는 동물 생물 안전성 4등급 실험실에서 의료 영상 촬영을 안전하게 수행하는 데 필요한 준비 및 동물 취급 절차에 대한 개요를 제공합니다. 모의 감염 기니피그의 컴퓨터 단층 촬영은 결과가 높은 병원체로 인한 질병을 평가하는 데 사용할 수 있는 이러한 절차를 보여줍니다.

(A)의 안전주의 사항 및 운영 절차 BSL-4 실험실 4. 의료 영상 절차

고위험 병원체는 공기 중 입자를 통해 피험자를 감염시킬 수 있기 때문에 공기 생물학은 병인 연구 및 의료 대책 개발에 점점 더 많이 적용되고 있습니다. 우리는 동물 생물 안전 레벨 4 최대 봉쇄 환경에서 비인간 영장류의 에어로졸 챌린지 중 항공 생물학 절차에 대한 자세한 시각적 시연을 제시합니다.

(A)의 안전주의 사항 및 운영 절차 BSL-4 실험실 3. 공중 생물학

신속 하 게 구축, 오프-그리드 실험실 설계 되었고 원격, 리소스 제한 전역 설정에 대 한 내장. 기능 및 물류 개선, 확장, 다기능 실험실 모듈의 중요 한 측면을 탐구 된다. 기본적인 실험실 작업에 대 한 점검 및 호흡기 바이러스 진단 테스트에 대 한 프로토콜 개발 이며 제시.

원격 실험실 관리: 호흡기 바이러스 진단

이 프로토콜은 클린룸 환경에서 미생물 바이오버든을 최소화하기 위한 모범 사례를 요약하고 환경 모니터링, 공정 모니터링 및 제품 멸균 테스트와 같은 전략을 포함합니다. 이는 현재 우수 조직 관행 표준 및 현재 우수 제조 관행 표준을 충족하는 데 필요한 제조 및 테스트 시설과 관련이 있습니다.

클린룸 환경 및 세포 치료를 위한 미생물 제어 및 모니터링 전략

여기에서는 면역표현형을 위한 혈액 샘플링을 예로 들어 "야생 마우스" 시설의 미생물 억제 조치를 포함한 구조 및 운영 절차를 설명합니다.

천연 마이크로바이옴을 가진 실험용 마우스를 위한 시설의 운영 및 생물 봉쇄 절차: 면역표현형 분석 절차

HIV / 에이즈 치료에 방지 retroviral 요법은 대규모 남아 프리카에서 모니터합니다. 유동세포계측법는 혈액학 (CD45), 면역학 (CD4) 및 바이러스 부하 링크 CD38 분석을위한 결합입니다. NHLS - SA 실험실, 요하네스 버그에 기록이 현대적인 방법은 자원 제한 진단을위한 역할 모델 역할을, 강한 지역 내부 품질 관리와 비용 효율적인 수 있습니다.

HIV / AIDS의 종합 및 비용 효과적인 실험실 감시 : 아프리카 역할 모델

HIV tropism는 바이러스 봉투의 V3 지역에서 유추하실 수 있습니다. V3는 PCR은 RT - PCR 중첩, 합성을 사용하여 세중의에 증폭하고, bioinformatic 소프트웨어를 사용하여 해석됩니다. 낮은 g2P 점수 1 개 이상의 시퀀스 (S)와 함께 샘플이 아닌 R5 바이러스로 분류됩니다.

V3의 HIV - 1 Tropism의 Genotypic 추론 사용 인구를 기반 시퀀싱

이 문서는 엔도 또는 ectoparasitism을 감지 선별 쥐 및 생쥐를위한 각종 절차에 대해 설명합니다. 여러 진단 assays이 시연되고, 살아있는 동물에서 사용하기에 적합 사람과 동물의 안락사 후 사용되는 모두. 쥐, 마우스 기생충의 식별에 도움을 사진이 포함됩니다.

연구실 고양이와 마우스에 외부의 뜻과 Endoparasites의 진단

청소부는 질병이없는 지역에 자신의 배설물에 전염성 전염성 해면상 뇌증의 프리온을 이동시키다 수있는 가능성이있다. 우리 마우스 적응 스크래피 프리온은 미국의 까마귀의 소화 기관 (까마귀 brachyrhynchos), 죽은 동물의 일반적인 소비자 비록 통과 후 감염성 유지 여부를 확인하는 데 사용 세부 방법.

조류 종의 소화 기관을 통과 한 후 감염성 프리온을 확인하기위한 절차

학습하세요 양압 보호복 착탈 및 BSL-4 실험실 출입 절차를 통한 고위험 병원체 연구 안전 관리 방법. 개인 보호 장비 점검과 화학 샤워를 활용한 오염 제거 과정을 상세히 확인할 수 있습니다.

(A)의 안전주의 사항 및 운영 절차 BSL-4 실험실 : 1. 바이오 안전성 레벨 4 정장 연구소 스위트 출입국 절차

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