Proofreading and DNA Repair Assay Using Single Nucleotide Extension and MALDI-TOF Mass Spectrometry Analysis

Kang-Yi Su; Steven D. Goodman; Hung-Ming Lai; Rong-Syuan Yen; Wei-Yao Hu; Wern-Cherng Cheng; Liang-In Lin; Ya-Chien Yang; Woei-Horng Fang

doi:10.3791/57862

교정 및 DNA 복구 분석 결과 단일 뉴클레오티드 확장 및 TOF MALDI 질량 분석 분석을 사용 하 여

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Biochemistry

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Proofreading and DNA Repair Assay Using Single Nucleotide Extension and MALDI-TOF Mass Spectrometry Analysis

교정 및 DNA 복구 분석 결과 단일 뉴클레오티드 확장 및 TOF MALDI 질량 분석 분석을 사용 하 여

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11:08 min

June 19, 2018

DOI: 10.3791/57862-v

Kang-Yi Su*^1,2, Steven D. Goodman*³, Hung-Ming Lai¹, Rong-Syuan Yen¹, Wei-Yao Hu¹, Wern-Cherng Cheng², Liang-In Lin^1,2, Ya-Chien Yang^1,2, Woei-Horng Fang^1,2

¹Department of Clinical Laboratory Sciences and Medical Biotechnology, College of Medicine,National Taiwan University, ²Department of Laboratory Medicine,National Taiwan University Hospital, ³Center for Microbial Pathogenesis, Nationwide Children's Hospital and the Department of Pediatrics,The Ohio State University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

교정 하는 DNA 중 합 효소와 DNA 수리 분석 결과 대 한 비 표시, 라디오 동위-방법 고해상도 TOF MALDI 질량 분석 및 단일 뉴클레오티드 확장 전략을 사용 하 여 개발 되었다. 분석 결과 매우 특정, 간단 하, 빠른, 고 교정에 대 한 수행 하 여 복구 패치 9-뉴클레오티드 보다 짧은 입증 했다.

이 방법은 교정 방법 및 분석과 같은 DNA 폴리머 충실도 및 DNA 복구 분야의 주요 질문에 답하고 DNA 복구 패치를 정의하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 매우 구체적이고 간단하며 빠르고 수행하기 쉽다는 것입니다. 일반적으로, 이 방법에 새로운 개인은 DNA 복제에서 아직도 그들 때문에 고군분투할 것이고 수선 분야는 질량 분석 기계 사용 및 자료 해석에 익숙하지 않을지도 모른다.

가장 중요한 것은 돌연변이 및 대리와 같은 임상 응용 분야를 위해 상업적으로 개발된 질량 분석법이 DNA 교정 및 복구 연구에 어떻게 편리하게 적용될 수 있는지 보여줄 수 있기 때문에 시각적 시연이 매우 중요하다는 것입니다. 이 절차를 시연하는 것은 제 연구실의 Rong-Syuan 대학원생과 Kuei-Ching 대학원생입니다. 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 프라이머 및 템플릿 준비로 이 절차를 시작합니다.

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